CREKA肽修饰的载多西他赛脂质体抗前列腺癌靶向研究

发布时间：2021-07-28 03:40

　　目的构建以CREKA肽修饰的包载多西他赛脂质体（CREKA-lipo-DTX）,评价该药物传递系统体外靶向性和体外抗肿瘤效应。方法首先采用迈克尔加成反应合成靶向部分DSPE-PEG2000-CREKA,随后使用薄膜水化-超声法制备CREKA-lipo-DTX并对其基本表征进行评价;将PC-3细胞和RWPE-1细胞分别分为3组（n=3）:空白对照组、PEG-lipo-DiI组和CREKA-PEG-DiI组,脂质体与细胞共孵育后,用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分别对脂质体的细胞摄入进行定性和定量的分析,从而评价CREKA修饰脂质体对PC-3细胞的靶向性;将PC-3细胞分为4组（n=3）:空白对照组、游离DTX组、PEG-lipo-DiI组和CREKA-PEG-DiI组,通过CCK-8法和Annexin V/PI双染色法评价该药物载体对PC-3细胞的增殖抑制效应。结果成功制备出CREKA肽修饰的载药脂质体（CREKA-lipo-DTX）,其粒径为（130.37±1.44）nm,包封率为（91.93±4.64）%。该药物载体稳定性良好,体外释放结果显示其具有较好的缓释性。激光共聚焦显微镜和流式... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2020,42(21)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

DSPE-PEG2000-MAL、CREKA与DSPE-PEG2000-CREKA 的核磁氢谱图

表1 不同脂质体的粒径、PDI、Zeta电位及包封率 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 粒径/nm 多分散系数 Zeta电位/mV 包封率(%) PEG-lipo组 103.27±2.23 0.16±0.03 -31.81±0.33 - CREKA-lipo组 108.34±1.97 0.18±0.02 -27.49±0.48 - PEG-lipo-DTX组 120.70±2.43 0.22±0.01 -28.33±0.09 96.45±0.89 CREKA-lipo-DTX组 130.37±1.44 0.24±0.03 -30.74±0.28 91.93±4.642.3 体外细胞摄入实验

为了进一步说明细胞对脂质体的摄取能力,采用流式细胞仪检测并分析细胞摄入脂质体后的平均荧光强度来定量分析细胞摄取能力。结果显示,在PC-3细胞中,CREKA-lipo-DiI组的脂质体摄入量大约是PEG-lipo-DiI组的3倍(图3C);而在RWPE-1细胞中,CREKA-lipo-DiI组的脂质体摄入量只略高于PEG-lipo-DiI组,差别无统计学意义(P>0.05,图3D),与激光共聚焦显微镜观察结果是一致的。PC-3细胞对脂质体的摄入随着时间的增加而增加,共孵育1 h时,CREKA-lipo-DiI组的平均荧光强度与PEG-lipo-DiI组差异无统计学意义(P>0.05);共孵育2 h时,CREKA-lipo-DiI组的平均荧光强度显著高于PEG-lipo-DiI组(P<0.05);共孵育4 h时,CREKA-lipo-DiI组的平均荧光强度与PEG-lipo-DiI组的差异有统计学意义(P<0.05,图4A)。图4 时间和游离CREKA肽对PC-3细胞脂质体摄入的影响(n=3)


本文编号：3307134