mGM-CSF/βhCG融合蛋白的制备及其致敏树突状细胞疫苗抗小鼠RM-1前列腺癌的作用

发布时间：2021-08-01 20:24

　　利用分子生物学方法设计并构建含有βh CG基因和m GM-CSF基因的表达载体p ET-28a-m GM-CSF-X10-βh CGCTP37质粒。乳糖诱导表达该融合蛋白,通过硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱DEAE-cellulose进行纯化,并以此融合蛋白致敏从C57BL/6J小鼠体内提取的树突状细胞（DC）从而获得DC疫苗。将DC疫苗回输至接种前列腺癌RM-1的C57BL/6J小鼠体内,分组检测。结果显示,DC组和DC与紫杉醇（Pac）联用（DP）组与Pac组相比抗肿瘤效果具有极显著性差异（P<0.01）;且DP组的抗肿瘤效果优于DC组。可见构建的新型DC疫苗可抑制前列腺癌的生长,且与紫杉醇联合使用具有协同抗肿瘤作用。 

【文章来源】：中国药科大学学报. 2015,46(01)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材 料
    1. 1 菌种和质粒
    1. 2 试 剂
    1. 3 动物和细胞株
2 方 法
    2. 1 m GM-CSF / βh CG融合蛋白表达载体的构建
    2. 2 融合蛋白的诱导表达
    2. 3 融合蛋白的分离纯化
    2. 4 融合蛋白的 Western-blot 鉴定
    2. 5 DC 疫苗的制备
    2. 6 DC疫苗对小鼠RM-1前列腺癌的免疫治疗
3 结 果
    3. 1 m GM-CSF 与重组表达载体的鉴定
    3. 2 m GM-CSF / βh CG 融合蛋白的诱导表达
    3. 3 融合蛋白的分离纯化
    3. 4 融合蛋白的 Western-blot 鉴定
    3. 5 成熟 DC 的制备
    3. 6 DC 疫苗对肿瘤生长的影响
    3. 7 细胞因子检测
4 讨 论



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