供体兔获取前高钠血症对受体兔移植肾预后影响的研究
发布时间：2021-08-07 22:34
【目的】通过建立供体兔高钠血症模型及新西兰白兔异体原位肾移植模型,观察高钠血症组受体兔与正常血钠组受体兔肾移植术后尿素氮（Blood urea nitrogen,BUN）、血清肌酐（Serum creatin,Scr）及尿量情况,并比较两组移植肾组织病理变化及移植肾组织中血管平滑肌α肌动蛋白（α-SMA）的表达水平,初步探讨供体兔获取前高钠血症对受体兔移植肾预后的影响,为加强临床供体器官维护,保障供肾质量提供参考。【方法】选取60只健康成年雄性新西兰白兔,按照随机数字表法随机分为A、B两组,每组各30只,A组为高钠血症组,B组为正常血钠组。然后再次按照随机数字表法将A、B两组各自分为两组,即供体组、受体组。A组供体予以经过高钠血症造模,B组供体对照处理。获取并修整供体组左肾,对应供受体组间进行同种异体原位肾移植术,再切除受体右肾。术后常规环孢素抗排斥治疗,收集两组受体白兔术后第1、3、5、7天的尿素氮、血肌酐及尿量情况,并于术后第7天处死受体兔,获取移植肾组织进行病理检查,比较两组移植肾组织病理结构变化及移植肾组织α-SMA的表达情况。【结果】1、尿素氮变化高钠血症组受体兔术后第1、3...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
供肾灌注模型
第二章材料与方法9中备用。受体兔麻醉成功后，仰卧位固定于操作台上,对尿道外口进行清洁消毒，插入F8双腔导尿管，然后夹闭导尿管。同法取腹部正中竖切口，顺利进入腹腔，充分暴露左侧肾脏及血管，游离肾脏及裸化肾动静脉，钝性分离输尿管，于中下段处离断并结扎。然后使用血管夹在靠近腹主动脉处夹闭左肾动脉，在靠近下腔静脉处夹闭左肾静脉，接着在远离血管夹处使用显微剪剪断左肾动静脉，取出原左肾丢弃。迅速用肝素生理盐水冲洗血管断端管腔，将供肾放在左肾区,敷以冷盐水浸湿的纱布。在显微镜下于供受体肾动脉3点、9点方向分别用10-0号的尼龙线固定一针，两端留置足够长线牵引，间断缝合动脉前壁4-5针，翻转固定线吻合动脉后壁，同法用9-0号的尼龙线吻合供受体肾静脉，（如图2.3所示）血管吻合过程中,不断用4℃冷盐水浇灌,同时不间断经耳缘静脉注入5%葡萄糖溶液20ml，保持足够血容量。移植肾动静吻合完毕后（如图2.4所示），准备好温盐水，先开放肾静脉再开发放肾动脉，见供肾立即充血红润，观察动静脉吻合处有无出血，并不间断浇灌温盐水复温，（如图2.5所示），同时静脉推注10mg呋塞米溶液，可见输尿管开口处可有尿液滴出。于膀胱底部剪开一直径约为10mm的切口，将带膀胱壁瓣输尿管与其对齐，并使用4-0可吸收缝线以两定点全层连续缝合，每侧6-7针。开放导尿管，并经耳缘静脉输5%葡萄糖氯化钠溶液250ml，保证容量足够。然后将右侧肾脏动静脉、输尿管依次结扎并切断，移除后彻底止血创面。清点手术器械及无菌纱布，确保未遗留在腹腔，对腹腔内积血及血凝块进行清理干净后,往腹腔注入少许青霉素生理盐水，预防术后感染，逐层关腹。图2.2供肾灌注模型图2.3显微血管缝合模型（×10）
南华大学硕士学位论文102.2.3.4术后处理术后受体兔放入单独兔笼内饲养，腹部伤口每日规律换药一次，预防伤口感染，同时经耳缘静脉给予5%葡萄糖溶液50ml，每天2次，以满足能量需要，直到新西兰白兔能自由进食。青霉素每日40万U肌肉注射，使用3天，视伤口情况延长抗生素使用期限，预防感染。新西兰白兔肾移植术后使用环孢素A抗排斥治疗，按照10mg/kg的剂量肌肉注射[52],实验过程中如有白兔死亡，则剔除出数据，另增加补充实验。2.2.4实验数据收集2.2.4.1生化指标检测及尿量的收集采取新西兰白兔移植术后第1天、第3天、第5天、第7天的耳缘静脉血，通过生化检测仪检测并记录尿素氮及血清肌酐值，并且观察受体兔术后第1、3、5、7天的排尿情况，准确记录导尿管引流量。2.2.4.2移植肾组织处理两组经历肾移植手术的新西兰受体兔均于术后第7天处死，获取其移植肾肾脏，使用冷的等渗生理盐水适当灌注，以去除血细胞避免影响免疫组化结果。然后将肾脏沿冠状面切成约为5-9mm厚度的组织块，并将标本迅速固定在10%甲醛溶液中，经历脱水、包埋、脱蜡等一系列操作后，行HE染色、Masson染色和α－SMA免疫组化检测。2.2.4.2.1HE染色及形态学评分：图2.4血流开放前模型图2.5血流开放后模型
【参考文献】：
期刊论文
[1]高钠血症供体对肝移植受体围手术期肝功能的影响[J]. 王博,李霄,张鹏程,张若涵,陶开山. 器官移植. 2019(03)
[2]继往开来,中国器官移植的发展现状——在2018年中华医学会器官移植学年会上的报告[J]. 石炳毅. 器官移植. 2019(01)
[3]神经重症患者高钠血症与急性肾损伤的相关性研究[J]. 吴国志. 中国医药科学. 2017(23)
[4]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner. World Journal of Gastroenterology. 2016(18)
[5]重症脑卒中患者急性肾损伤发生情况及预后与高钠血症关系探讨[J]. 孙亚玲,谷未强,刘欣. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(20)
[6]中国心脏死亡器官捐献工作指南（第2版）[J]. 刘永锋. 中华移植杂志(电子版). 2012(03)
[7]一种简便可靠的兔肾移植模型的建立[J]. 曾春林,肖序仁,郁华亮. 军医进修学院学报. 2009(02)
[8]高糖对肾小管上皮细胞表达CTGF的影响及P38MAPK通路在其中的作用[J]. 汤珣,章俊,蔡德鸿,曾莉. 南方医科大学学报. 2009(01)
[9]急性肾损伤患者血浆渗透压的变化及其临床意义[J]. 沈健,智睿,李小军. 苏州大学学报(医学版). 2008(06)
[10]大鼠肾脏移植的应用解剖[J]. 刘小友,于立新,徐达传,孙煦勇,袁谦. 中国临床解剖学杂志. 2004(03)
硕士论文
[1]高钠血症患者血钠与肾损伤、病死率及血肌酐相关性的探讨[D]. 崔丽燕.暨南大学 2016
[2]不同肾替代治疗对终末期肾病患者生存质量的影响及相关因素的研究[D]. 李红梅.昆明医科大学 2014
本文编号：3328668
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
供肾灌注模型
第二章材料与方法9中备用。受体兔麻醉成功后，仰卧位固定于操作台上,对尿道外口进行清洁消毒，插入F8双腔导尿管，然后夹闭导尿管。同法取腹部正中竖切口，顺利进入腹腔，充分暴露左侧肾脏及血管，游离肾脏及裸化肾动静脉，钝性分离输尿管，于中下段处离断并结扎。然后使用血管夹在靠近腹主动脉处夹闭左肾动脉，在靠近下腔静脉处夹闭左肾静脉，接着在远离血管夹处使用显微剪剪断左肾动静脉，取出原左肾丢弃。迅速用肝素生理盐水冲洗血管断端管腔，将供肾放在左肾区,敷以冷盐水浸湿的纱布。在显微镜下于供受体肾动脉3点、9点方向分别用10-0号的尼龙线固定一针，两端留置足够长线牵引，间断缝合动脉前壁4-5针，翻转固定线吻合动脉后壁，同法用9-0号的尼龙线吻合供受体肾静脉，（如图2.3所示）血管吻合过程中,不断用4℃冷盐水浇灌,同时不间断经耳缘静脉注入5%葡萄糖溶液20ml，保持足够血容量。移植肾动静吻合完毕后（如图2.4所示），准备好温盐水，先开放肾静脉再开发放肾动脉，见供肾立即充血红润，观察动静脉吻合处有无出血，并不间断浇灌温盐水复温，（如图2.5所示），同时静脉推注10mg呋塞米溶液，可见输尿管开口处可有尿液滴出。于膀胱底部剪开一直径约为10mm的切口，将带膀胱壁瓣输尿管与其对齐，并使用4-0可吸收缝线以两定点全层连续缝合，每侧6-7针。开放导尿管，并经耳缘静脉输5%葡萄糖氯化钠溶液250ml，保证容量足够。然后将右侧肾脏动静脉、输尿管依次结扎并切断，移除后彻底止血创面。清点手术器械及无菌纱布，确保未遗留在腹腔，对腹腔内积血及血凝块进行清理干净后,往腹腔注入少许青霉素生理盐水，预防术后感染，逐层关腹。图2.2供肾灌注模型图2.3显微血管缝合模型（×10）
南华大学硕士学位论文102.2.3.4术后处理术后受体兔放入单独兔笼内饲养，腹部伤口每日规律换药一次，预防伤口感染，同时经耳缘静脉给予5%葡萄糖溶液50ml，每天2次，以满足能量需要，直到新西兰白兔能自由进食。青霉素每日40万U肌肉注射，使用3天，视伤口情况延长抗生素使用期限，预防感染。新西兰白兔肾移植术后使用环孢素A抗排斥治疗，按照10mg/kg的剂量肌肉注射[52],实验过程中如有白兔死亡，则剔除出数据，另增加补充实验。2.2.4实验数据收集2.2.4.1生化指标检测及尿量的收集采取新西兰白兔移植术后第1天、第3天、第5天、第7天的耳缘静脉血，通过生化检测仪检测并记录尿素氮及血清肌酐值，并且观察受体兔术后第1、3、5、7天的排尿情况，准确记录导尿管引流量。2.2.4.2移植肾组织处理两组经历肾移植手术的新西兰受体兔均于术后第7天处死，获取其移植肾肾脏，使用冷的等渗生理盐水适当灌注，以去除血细胞避免影响免疫组化结果。然后将肾脏沿冠状面切成约为5-9mm厚度的组织块，并将标本迅速固定在10%甲醛溶液中，经历脱水、包埋、脱蜡等一系列操作后，行HE染色、Masson染色和α－SMA免疫组化检测。2.2.4.2.1HE染色及形态学评分：图2.4血流开放前模型图2.5血流开放后模型
【参考文献】：
期刊论文
[1]高钠血症供体对肝移植受体围手术期肝功能的影响[J]. 王博,李霄,张鹏程,张若涵,陶开山. 器官移植. 2019(03)
[2]继往开来,中国器官移植的发展现状——在2018年中华医学会器官移植学年会上的报告[J]. 石炳毅. 器官移植. 2019(01)
[3]神经重症患者高钠血症与急性肾损伤的相关性研究[J]. 吴国志. 中国医药科学. 2017(23)
[4]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner. World Journal of Gastroenterology. 2016(18)
[5]重症脑卒中患者急性肾损伤发生情况及预后与高钠血症关系探讨[J]. 孙亚玲,谷未强,刘欣. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(20)
[6]中国心脏死亡器官捐献工作指南（第2版）[J]. 刘永锋. 中华移植杂志(电子版). 2012(03)
[7]一种简便可靠的兔肾移植模型的建立[J]. 曾春林,肖序仁,郁华亮. 军医进修学院学报. 2009(02)
[8]高糖对肾小管上皮细胞表达CTGF的影响及P38MAPK通路在其中的作用[J]. 汤珣,章俊,蔡德鸿,曾莉. 南方医科大学学报. 2009(01)
[9]急性肾损伤患者血浆渗透压的变化及其临床意义[J]. 沈健,智睿,李小军. 苏州大学学报(医学版). 2008(06)
[10]大鼠肾脏移植的应用解剖[J]. 刘小友,于立新,徐达传,孙煦勇,袁谦. 中国临床解剖学杂志. 2004(03)
硕士论文
[1]高钠血症患者血钠与肾损伤、病死率及血肌酐相关性的探讨[D]. 崔丽燕.暨南大学 2016
[2]不同肾替代治疗对终末期肾病患者生存质量的影响及相关因素的研究[D]. 李红梅.昆明医科大学 2014
本文编号：3328668
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