初步探讨肿瘤转移抑制基因TMSG-1入核机制及检测其在人前列腺癌中表达

发布时间：2017-05-02 14:09

  本文关键词：初步探讨肿瘤转移抑制基因TMSG-1入核机制及检测其在人前列腺癌中表达，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分初步探讨肿瘤转移抑制基因TMSG-1蛋白的入核机制目的肿瘤转移抑制基因TMSG-1是新发现的一种重要的转移抑制基因,通过检测自然状态及刺激状态下Hela细胞中TMSG-1蛋白的表达及Hela细胞凋亡情况,初步探讨TMSG-1蛋白的入核机制。方法免疫荧光检测Hela细胞内自然存在的TMSG-1蛋白表达情况,对生长状态良好的细胞进行不同剂量的H2O2刺激后,再利用免疫荧光检测TMSG-1蛋白在细胞内表达情况有无差异;不同剂量H2O2刺激Hela细胞后,提取细胞m RNA和总蛋白,分别用反转录PCR和Western blot测定TMSG-1基因及蛋白表达变化;流式细胞仪测定不同剂量H2O2刺激后Hela细胞凋亡情况。结果免疫荧光结果表明,在自然存在及刺激状态下,肿瘤细胞内均有TMSG-1蛋白表达,H2O2刺激状态下细胞内蛋白表达量明显高于细胞内自然存在的蛋白量,且细胞核内蛋白量增加;反转录PCR检测结果表明,H2O2刺激后的Hela细胞内TMSG-1基因表达量可能高于肿瘤细胞自然存在的蛋白量,H2O2刺激剂量为1.5m M时,蛋白表达量增加较明显。Western blot检测结果表明,H2O2刺激剂量前后的Hela细胞内TMSG-1蛋白表达量有显著性差异(P0.05),以H2O2刺激剂量1.5m M时最明显。流式细胞仪测定结果显示,H2O2刺激前后,细胞凋亡发生率有显著改变(P0.05),H2O2刺激剂量为1.5m M时,凋亡细胞百分率最高。结论H2O2刺激状态下细胞内TMSG-1蛋白表达量明显高于细胞内自然存在的蛋白量,在经一定量的H2O2刺激后,细胞内TMSG-1蛋白表达量均有增加,细胞核内蛋白量增加,且细胞凋亡发生率一定程度地增加,H2O2刺激能促进TMSG-1蛋白入核并使TMSG-1表达增加,入核后TMSG-1蛋白发挥促进细胞凋亡的作用。第二部分检测肿瘤转移抑制基因TMSG-1在人前列腺癌组织中的表达目的肿瘤转移抑制基因TMSG-1是新发现的一种重要的肿瘤转移抑制基因,通过检测TMSG-1蛋白在前列腺增生、原发性前列腺腺癌及转移性前列腺腺癌组织中的表达,探讨其在人前列腺腺癌转移过程中发挥的作用。方法采用免疫组织化学技术检测TMSG-1蛋白在22例前列腺增生、38例原发性前列腺腺癌及18例转移性前列腺腺癌组织中的表达,并结合患者临床信息、肿瘤的病理学特点及预后综合分析。应用Kaplan-Meier对原发性及转移性前列腺腺癌患者进行生存分析。结果免疫组织化学结果表明,TMSG-1蛋白在前列腺增生(20/22)、原发性前列腺腺癌(34/38)及转移性前列腺腺癌(10/18)中均有表达,原发性前列腺腺癌中的阳性表达率明显高于转移性前列腺腺癌中的阳性表达率,差异有统计学意义(P0.05);前列腺增生中的阳性表达率高于转移性前列腺腺癌者,差异有统计学意义(P0.05);前列腺增生与原发性前列腺腺癌中的阳性表达率无明显统计学差异(P0.05)。原发性前列腺腺癌中TMSG-1蛋白的表达与神经侵犯有关(P0.05),而与Gleason评分、邻近组织侵犯及年龄均无关(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果表明,TMSG-1蛋白阳性组生存时间和生存率明显高于TMSG-1蛋白阴性组(P0.05)。结论TMSG-1蛋白在原发性前列腺腺癌中的表达明显高于转移性前列腺腺癌中的表达,TMSG-1蛋白的低表达可以作为预测前列腺腺癌转移的重要危险因素,其在前列腺腺癌的转移过程中发挥重要作用,为前列腺腺癌的临床治疗和预后预测提供了新靶点。
【关键词】：基因 蛋白 入核 应激反应 细胞凋亡 基因 肿瘤抑制 肿瘤转移 前列腺腺癌 预后
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.25
【目录】：

• 第一部分 初步探讨肿瘤转移抑制基因 TMSG-1 蛋白的入核机制2-26
• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第一章 材料与方法7-16
• 1.1 实验材料7-9
• 1.1.1 细胞系7
• 1.1.2 主要试剂7-8
• 1.1.3 主要仪器及材料8-9
• 1.2 实验方法9-16
• 1.2.1 细胞培养及细胞成分提取9-11
• 1.2.2 细胞免疫荧光11
• 1.2.3 反转录PCR11-12
• 1.2.4 Western Blot12-14
• 1.2.5 流式细胞术14-15
• 1.2.6 统计学方法15-16
• 第二章 结果16-21
• 2.1 荧光显微镜观察蛋白入核情况16-17
• 2.2 反转录PCR检测TMSG-1 基因表达17-18
• 2.3 Western Blot检测TMSG-1 蛋白表达18
• 2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡18-21
• 第三章 讨论21-23
• 结论23-24
• 参考文献24-26
• 第二部分 检测肿瘤转移抑制基因 TMSG-1 在人前列腺癌组织中的表达26-43
• 摘要26-27
• Abstract27-30
• 引言30-31
• 第一章 材料与方法31-34
• 1.1 实验材料31-32
• 1.1.1 主要试剂31
• 1.1.2 主要仪器及材料31
• 1.1.3 组织标本来源31-32
• 1.2 实验方法32-34
• 1.2.1 免疫组织化学基本步骤32-33
• 1.2.2 结果判定标准33
• 1.2.3 统计学方法33-34
• 第二章 结果34-38
• 2.1 TMSG-1 蛋白在前列腺增生、原发性及转移性前列腺腺癌组织中的表达34-36
• 2.2 TMSG-1 蛋白表达与临床病理特征的关系36
• 2.3 TMSG-1 蛋白表达与病人术后生存期的关系36-38
• 第三章 讨论38-40
• 结论40-41
• 参考文献41-43
• 综述43-54
• 参考文献51-54
• 攻读学位期间研究成果54-55
• 致谢55-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 徐晓艳;裴斐;由江峰;;一种新的肿瘤转移抑制基因TMSG—l的研究现状(英文)[J];癌症;2010年07期

  本文关键词：初步探讨肿瘤转移抑制基因TMSG-1入核机制及检测其在人前列腺癌中表达，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：341097