叶酸缺乏对精子发生的影响及分子机制研究

发布时间：2021-10-10 02:07

　　第一部分人精浆叶酸水平与精液参数的相关性分析目的:精液参数是预测男性生育潜力的良好指标,然而自上世纪三十年代以来,人类精液质量出现逐年下降,尤以精子密度最为突出,但具体原因不清。叶酸是一种重要的微量元素,参与DNA,RNA和蛋白质的合成及甲基化反应,与精子发生息息相关。以往的研究报道精浆叶酸浓度是反映机体叶酸营养状况的良好指标。因此,本课题的目的旨在探究⑴人精浆叶酸水平与精液参数（包括精子DNA碎片化指数,DFI）的相关性;⑵人精浆叶酸水平与男性不育的关系。方法:从华中科技大学同济医学院生殖医学中心和湖北省人类精子库招募受试者,经筛查合格后,收集其精液和血液标本。首先,采用计算机辅助精子质量分析系统（CASA）进行精液参数分析;用精子染色质结构分析法（SCSA）检测部分标本的染色质完整性（DFI）;将标本离心后,分离上层精浆和血清,用全自动生化分析仪测定叶酸和同型半胱氨酸（Hcy）的浓度。采用SPSS 17.0软件对各测量指标进行组间比较和相关性分析。结果:经筛查,本研究共纳入419名合格受试对象,包括313名男性不育患者（其中非梗阻性无精子症71名,严重少精子症12名,少精子症45名... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

叶酸代谢示意图

图 1-2 受试者筛选流程图四、标本收集及处理为避免进食对血清叶酸的影响，嘱研究对象空腹 8 12 h，于次晨 8 10 am 抽取 5 ml静脉血于真空采血管中，静置 20 min，3000g，4℃，离心，10 min，收集上层血清于 2 ml冻存管中， 80℃冰箱冻存，用于叶酸和 Hcy 检测。嘱不育患者和捐精志愿者取精前禁欲 2 7 天，告知手淫取精步骤和注意事项，给予标签和一次性无菌塑料烧杯，嘱其排尿，清洁阴茎、龟头及双手，0.1%新洁尔灭消毒，于温度适宜，安静的取精室自行手淫取精，完毕后放置于传递窗上。实验室技术员迅速将标本置于37℃恒温水浴箱中液化，约20 min液化完全后，拭干烧杯，称重，精确到 0.1 g。充分混匀，用 1.5 ml EP 管取 500 l 精液不加冷冻保护剂， 80℃冻存用于 DFI 检测；另用 1.5 mLEP 管取 1 ml 精液，参照文献[47]描述的处理方法，2500g，4℃，离心，10 min，收集上层精浆于一新的 1.5 ml EP 管中， 20℃保存用于叶酸和 Hcy 检测；其余精液用于精液分析。

图 1-3 流式精子染色质结构分析图例。六、 数据分析采用 SPSS 17.0 软件进行统计分析，正态分布的资料，用均值 标准误表示，否则用中位数（极差）。组间差异比较，满足正态分布，且方差齐，采用独立双向方差分析(Two-way ANOVA) 或独立样本 t 检验；否则，采用非参数检验；原始数据经对数转换后，相关性分析采用多元线性回归分析。以 P 0.05 为差异具有统计学意义。结果一、研究对象一般特征经严格筛查，排除可能影响人类精液参数的诸多混杂因素后，本研究共纳入 419 名合格受试对象，包括男性不育患者 313 名和已生育捐精志愿者 106 名。所有对象年龄


本文编号：3427433