蛋氨酸亚砜还原酶B1在糖尿病小鼠肾脏中的表达及与氧化应激的关系

发布时间：2017-05-07 05:38

  本文关键词：蛋氨酸亚砜还原酶B1在糖尿病小鼠肾脏中的表达及与氧化应激的关系，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景和目的随着糖尿病发病率的不断升高,糖尿病及其并发症也更加严重地威胁着人类的健康和生存。已有大量的研究显示糖尿病引起的肾脏损害与氧化应激密切相关。蛋氨酸(Met)是生物体内最容易被氧化的氨基酸之一,活性氧簇(ROS)能将Met氧化为蛋氨酸亚砜(MetO),引起多种生物学功能发生改变,从而给细胞带来致命性的损伤。蛋氨酸亚砜还原酶(Msrs)可逆转这种氧化,起到修复的作用。哺乳动物Msrs分为两种亚型--MsrA和MsrB。编码MsrA的只有一个基因,而编码MsrB的有三个基因,即MsrB1, MsrB2和MsrB3。MsrB1是其中唯一一个能编码含硒的蛋白质的基因,它在修复蛋白损伤方面具有独特的作用。已有研究表明MsrB1的表达变化与衰老、神经变性疾病、白内障、癌症等许多疾病相关,但它在糖尿病肾病发生发展中的变化和作用尚未见报道。本课题探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾组织MsrB1的表达变化及其与氧化应激的关系。方法本文以STZ和单侧肾切除处理的C57BL/6小鼠为研究对象,将10周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组(NC组,n=12)、单侧肾切除组(UX组,n=12)、STZ组(n=12)和单侧肾切除加STZ组(STZ-UX组,n=14)。模型制备后的第8周末,采集标本,检测生理生化指标；通过高碘酸-希夫(PAS)和马松(Masson)染色,观察小鼠肾脏病理变化；通过免疫组化法检测MsrB1在肾组织中的表达和分布情况；通过实时定量PCR和western blotting分别检测MsrB1的mRNA和蛋白水平的变化；通过丙二醛(MDA)、蛋白羰基(PC)和总巯基(TSH)测试盒检测各组肾脏氧化应激情况；采用SPSS16.0统计软件对数据进行统计分析。结果1.生理生化指标及肾脏病理证明STZ组和STZ-UX组小鼠发生了糖尿病肾脏损害,且STZ-UX组更为严重。2.肾脏免疫组化显示MsrB1特异性地分布于肾小管,肾小球中并无MsrB1分布。在NC组小鼠的肾脏中,MsrB1广泛表达于肾小管上皮细胞的细胞核和细胞浆中；与之相比,STZ组分布稍有减少(P0.05),STZ-UX组分布明显减少(P0.01),而UX组分布未见明显变化(P0.05)。3.实时定量PCR和western blotting检测MsrB1的结果表明：与NC组相比,STZ组和STZ-UX组MsrB1 mRNA和蛋白水平降低(P0.05,P0.01),且STZ-UX组降低更明显,而UX组未见明显变化(P0.05)4.各组小鼠肾脏氧化应激水平：与NC组相比,STZ组和STZ-UX组的MDA, PC水平升高(P0.05,P0.01),TSH水平降低(P0.05),且STZ-UX组变化更明显,而UX组未见明显变化(P0.05)。5.相关性分析证明STZ组和STZ-UX组MsrB1蛋白表达与MDA和PC呈负相关(P0.05),与TSH含量呈正相关(P0.05)结论MsrB1在糖尿病小鼠的肾脏组织中表达下调,且与MDA和PC含量具有负相关性,与TSH含量具有正相关性,提示MsrB1的下调在糖尿病肾脏氧化应激病理生理过程中可能发挥重要的作用。因此,深入研究MsrB1下调的分子机制及作用,对探讨如何阻断DN的进程具有重要意义。
【关键词】：蛋氨酸亚砜还原酶B1 氧化应激 糖尿病肾病 C57BL/6小鼠
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2;R692.9
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符号说明11-13
• 前言13-16
• 材料和方法16-30
• 结果30-32
• 讨论32-36
• 结论36-37
• 附表37-38
• 附图38-43
• 参考文献43-49
• 综述49-56
• 参考文献53-56
• 致谢56-57
• 在读期间发表论文57-58
• 附件58

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李晓博;牟忠卿;陈丽;付艺凌;张岩;咸玉欣;侯新国;;糖尿病大鼠肾脏组织氧化应激及其在糖尿病肾病发病中的意义[J];中国病理生理杂志;2006年04期

  本文关键词：蛋氨酸亚砜还原酶B1在糖尿病小鼠肾脏中的表达及与氧化应激的关系，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：349216