NGF、PGP9.5和5-HT受体亚型在自身免疫性间质性膀胱炎小鼠的差异性表达

发布时间：2017-05-11 09:01

  本文关键词：NGF、PGP9.5和5-HT受体亚型在自身免疫性间质性膀胱炎小鼠的差异性表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：建立UP3A65-84诱导的自身免疫性IC/BPS小鼠模型,研究在不同时程模型膀胱组织中神经生长因子的表达和神经纤维的分布情况,同时研究5-HT受体亚型在T13-L2脊髓节段的表达。方法：6-8周BALB/c雌性小鼠,采用UP3A65-84多肽与完全弗氏佐剂混合的乳化剂多点皮下注射免疫。正常BALB/c雌性小鼠为空白对照组,不含UP3A65-84多肽的乳化剂为实验对照组。分别采用疼痛反应测定、HE染色、RTq-PCR等方法,从行为学、形态学及分子生物学三个方面对该模型进行验证。采用免疫组织化学法及RTq-PCR法研究NGF在不同时程自身免疫性IC/BPS膀胱组织中的表达；免疫组织化学法和立体定量技术分析PGP9.5阳性神经纤维在膀胱组织中的分布情况；RTq-PCR法研究5-HTR2A、5-HTR5A和5-HTR7在各组小鼠脊髓T13-L2节段的表达。结果：UP3A65-84多肽联合完全弗氏佐剂可成功诱导出自身免疫性IC/BPS小鼠模型。行为学测定表现为模型组动物疼痛反应增加,各模型组膀胱湿重/体重比较正常组及CFA组均显著升高(P0.05)。形态学观察可见膀胱组织急慢性炎症细胞浸润、点状出血及血管扩张,上皮细胞坏死脱落等变化。RTq-PCR法检测到膀胱组织中IL-17A和TNFmRNA的表达较正常组及CFA组显著增加(P0.05)。膀胱组织中NGF阳性产物连续表达在膀胱粘膜上皮胞浆内,各模型组NGF蛋白及NGFmRNA的表达较正常组均显著升高(P0.05)。膀胱各层组织中均有PGP9.5阳性神经纤维表达,其中粘膜下层较逼尿肌层阳性表达明显。与正常组比较,不同时程模型组膀胱组织粘膜下层PGP9.5阳性神经纤维表达均升高,其中60d和90d模型组PGP9.5阳性神经纤维数密度显著升高(P0.05)。膀胱组织中PGP9.5阳性神经纤维数密度与NGF蛋白表达水平呈正相关(r=0.6448,p=0.0070)。与正常组比较,各模型组5-HTO2A、5-HTR5A和5-HTR7mRNA在脊髓的表达均显著上调(P0.05),不同时程模型组间无显著差异。结论：UP3A65-84多肽联合完全弗氏佐剂可成功诱导出从行为学、形态学及分子生物学均高度符合IC/BPS表现的自身免疫性间质性膀胱炎动物模型。NGF和PGP9.5在不同时程自身免疫性IC/BPS模型小鼠膀胱组织中出现高表达,并与机械性痛敏增高趋势同步,提示NGF可能通过促进神经纤维增生,参与IC/BPS小鼠模型疼痛相关神经环路的重塑。而支配膀胱的脊髓T13-L2节段中5-HTR2A、5-HTR5A和5-HTR7的表达显著上调,提示5-HT系统可能参与了IC/BPS脊髓水平疼痛的调控。
【关键词】：间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合症 神经生长因子 PGP9.5 疼痛 5-羟色胺受体
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R694.3
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 第一章 自身免疫性IC/BPS模型的建立及验证13-24
• 1. 材料与方法13-18
• 2. 结果18-21
• 3. 讨论21-24
• 第二章 NGF、PGP9.5和5-HT受体亚型在自身免疫性间质性膀胱炎小鼠的差异性表达24-35
• 1. 材料与方法24-26
• 2. 结果26-31
• 3. 讨论31-35
• 参考文献35-40
• 全文结论40-41
• 文献综述41-52
• 参考文献45-52
• 致谢52-53
• 攻读硕士学位期间撰写和发表的文章53

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本文编号：356888