倍半萜内酯类衍生物DMAMCL对腹膜纤维化的抑制作用及其机制研究

发布时间：2022-01-26 18:45

　　背景:腹膜纤维化（peritoneal fibrosis,PF）是长期腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）治疗最重要的并发症之一。目前PF发病机制复杂,且尚无有效的治疗手段。倍半萜内酯类衍生物DMAMCL是一个安全性高、治疗窗口广、具有良好的抗炎抗纤维化效果的新型化合物。DMAMCL对PF的影响及相关机制迄今未见报道。（一）DMAMCL对PF的影响目的:从体内外两个水平探究DMAMCL对PF的影响。方法:（1）体内水平:①建立小鼠PF模型,并随机分为:正常组、PD14天组、PD28天组（即模型组）、DMAMCL早期干预组、DMAMCL延迟干预组。28天后收集标本;②通过马松染色检测壁层腹膜的厚度;Western Blot、QPCR以及免疫组织化学技术（IHC）检测腹膜Fibronectin、Collagen I、E-cadherin、α-SMA的表达水平。（2）体外水平:使用转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）干预人腹膜间皮细胞（HMrSV5）,并同时给予不同浓度的MCL（DMAMCL的体内有效活性成分）刺激... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－４?ＭＣＬ可逆转ＥＭＴ，减少ＥＣＭ沉积

Ｉ的表达不断增高（图１－２Ｃ），提示ＰＦ在进展；而我们发现，作为反映细胞自噬??情况的重要指标，ＬＣ３，在ＰＦ进展过程中，ＬＣ３－ＩＩ的表达水平表现为先升高后??降低的有趣现象（图２－１Ａ），这提示自噬与小鼠ＰＦ有密切的相关性，在ＰＦ发??生发展中，自噬减少，纤维化出现加重。??为探究自噬在ＰＦ中的作用，我们使用了国际上公认的自噬诱导剂ＲＡＰＡ和??自噬抑制剂３＾１八。＇＾５１６１１１６１（＾结果（图２－１丑、２－卟）显示，模型组１＾：３－１１的??表达水平与正常组对比明显下调，提示在小鼠ＰＦ模型里，自噬表现为抑制的趋??势；３ＭＡ干预组的ＬＣ３－ＩＩ的表达水平进一步下调，提示自噬抑制剂起作用，进??一步下调自噬水平；ＲＡＰＡ干预组的ＬＣ３－ＩＩ的表达水平升高，提示自噬诱导剂??起作用，成功上调自噬水平。??马松染色结果（图２－１Ｂ、２－１Ｄ）显示

５４．８３７４±９．１５８７３ｎｍ，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。以上结果提示ＤＭＡＭＣＬ??上调细胞自噬的特性在其对ＰＦ的抑制作用中起到一定的作用。进一步实验，我??们采用免疫组织化学染色实验（图２－２Ｄ），结果提示，３ＭＡ干预组和模型组对??比，腹膜层的Ｃｏｌａｇｅｎ?Ｉ和Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ表达水平无明显变化；ＤＭＡＭＣＬ千预组??的腹膜层的Ｃｏｌａｇｅｎ?Ｉ和Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ表达水平明显比模型组要低，但ＤＭＡＭＣＬ??和３ＭＡ联合干预组和单独ＤＭＡＭＣＬ干预组对比，腹膜层的Ｃｏｌａｇｅｎ?Ｉ和??Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ表达水平有升高；此外，ＤＭＡＭＣＬ和３ＭＡ联合干预组和３ＭＡ千预??组对比，腹膜层的Ｃｏｌａｇｅｎ?Ｉ和Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ表达水平降低。同样，Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ??结果（图２－２Ｆ、２－２Ｇ）得到的结果与免疫组织化学染色的结果相一致。??１．５－］?ＬＣ３－ＩＩ／ＡＣＴＢ??Ａ?ＰＤ?曲ｙ２８?！！．〇．?＝??Ｎｏｒｍａｌ?Ｖｅｈｉｃｌｅ?ＤＭＡＭＣＬ?■■?★＊?｜Ｍ｜｜??ＬＬｃＣ３３ｌ＝：?＝?＝?ｒ－二二ｇ■??ＡＣ七一—？一一《＿．?〇〇ＫｎｌＥ－ＳＥｃＬ??ＰＤ?ｄａｙ?２８??Ｂ???ＰＤ?ｄａｙ?２８????ＣＦ，?１?｜ｌ?Ｉ?■??｜?ｖ—?Ｓｍｃｌ??ｎ?ＰＤ?ｄａｙ?２８???Ｕ

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3610987