雌激素通过诱导雄激素抑制性基因SOX4的表达促进前列腺癌细胞的恶性进展

发布时间：2017-05-13 07:25

  本文关键词：雌激素通过诱导雄激素抑制性基因SOX4的表达促进前列腺癌细胞的恶性进展，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景前列腺癌(Prostate Cancer, PCa)是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率在欧美国家仅次于肺癌,位居男性第二位。雄激素剥夺治疗(Androgen deprivation therapy, ADT)是进展期前列腺癌最常用的一线治疗方法。然而ADT对于进展期前列腺癌仅仅起到缓解的作用,而非治愈性的。大部分男性只有在治疗早期出现短暂的癌瘤缩小。治疗12～18个月后,几乎所有患者最终转为去势抵抗性前列腺癌(Castration resistant prostate cancer, CRPC),预后极差。目前,关于CRPC的发生机制极为复杂,主要包括雄激素受体(Androgen receptor, AR)依赖性和AR非依赖性两类机制。其中,AR依赖性的机制主要涉及AR基因扩增、AR基因突变,共调节因子异常及AR的非配体依赖性激活等。事实上,在去势治疗后,尽管体内雄激素水平显著下降,但AR及其介导的通路仍保持活跃状态。自从Higgins和Hodges两位科学家报道类固醇激素在前列腺癌进展和治疗中的重要性以来,雌激素(17β-estradiol, E2),作为一种典型的类固醇激素,在前列腺正常组织及前列腺癌中发挥的作用受到了越来越多的关注。众所周知,E2在体内主要是通过它的两个经典受体雌激素受体α (ERα)和雌激素受体β (ERβ)发挥各种各样的生物学作用。在前列腺组织中,ERa主要表达于组织的间质中,而ERβ主要表达于前列腺上皮的基底层和分泌层。传统观点认为：ERa介导E2对于生物体有害的效应,而ERβ介导着E2的抑癌效应。ERβ被认为在细胞增殖功能上可以拮抗ERa,并表现出一种抗侵袭和抗转移的潜能。然而,越来越多的证据表明ERβ在前列腺癌中也发挥着类似癌基因的作用。因此,ERβ在前列腺癌中的具体作用仍需更加深入的研究。SOX家族是一类SRY (Sex Determination Region of Y Chromosome)相关基因构成的基因家族,编码一系列SOX (SRY-related HMG-box)转录因子。迄今,已发现SOX家族包括20个成员,可分为A-H共8个亚族。SOX4基因是C亚族成员,参与胚胎发育、干细胞的维持和调控细胞分化。在许多癌症中,SOX4这个关键的转录因子的异常表达可以通过诱导上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)和转移的方式,与细胞加速增殖和凋亡抑制相关。SOX4在前列腺癌中可能扮演着一个转化性癌基因的角色。虽然已在接近三分之一的前列腺癌患者体内发现了SOX4的过表达,但SOX4基因过表达的分子机制仍不明确。实验方法免疫组织化学染色(Immuohistochemistry, IHC)用于检测SOX4蛋白的表达、分布特点,及其与ERβ之间的相关性,实时定量PCR和Western blotting被用于研究转录和蛋白表达水平。细胞免疫荧光染色和免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation, co-IP)评估ERβ和AR的亚细胞定位及相互作用。通过染色质免疫沉淀实验(chromatin-Immunoprecipitation, ChIP)和荧光素酶报告基因实验探讨ERp和AR与SOX4启动子区的结合以及对启动子活性的影响。MTS,侵袭和划痕实验评估细胞功能。实验结果我们的研究发现,相比于激素依赖性前列腺癌(Hormone dependent prostate cancer, HDPC)病例,在CRPC中SOX4表达上调。前列腺癌的细胞LNCaP经过长期的雄激素剥夺后也观察到SOX4蛋白表达上调,这证实了IHC结果,并进一步提示SOX4在去势抵抗性前列腺癌中的潜在作用。体外数据表明,DHT以剂量依赖的方式显著下调LNCaP和VCaP细胞系中SOX4的mRNA和蛋白表达。我们还发现,DHT抑制SOX4表达的过程呈现时间依赖性。ChIP实验证实SOX4是AR的靶基因。在缺乏雄激素的情况下,E2通过ERp和AR之间的蛋白复合物的形成上调SOX4表达。敲除AR或ERβ可以抵消E2诱导SOX4表达,这表明,这两种受体是E2诱导SOX4表达所必需的。ChIP实验证实,在E2刺激后,ERβ和AR均结合到SOX4启动子。因此,无论是由DHT或E2激活,AR起着SOX4表达的转录调控的根本性作用。此外,AR可以在于不同的配体结合时可表现出不同的转录行为。在功能上,沉默SOX4显著减弱的E2促进PCa细胞增殖、侵袭和迁移的作用。在HDPC和CRPC的临床样本中,SOX4的过表达与ERβ阳性有显著相关性。结论综上,我们证明SOX4是一种新的雄激素抑制性靶基因。在缺乏雄激素环境下,E2可以通过诱导SOX4表达以促进PCa细胞的增殖,这提示SOX4可能在CRPC的过渡过程中发挥重要作用。机制上,我们的数据表明,AR信号通路控制SOX4表达,在接受不同配体刺激时,对SOX4表现出不同转录调控。这种细胞模型的存在,可以促进ERp和AR阳性PCa细胞通过诱导SOX4表达而逐渐发展为CRPC。
【关键词】：SOX4基因 前列腺癌 过表达 雄激素受体 雌激素受体BETA
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.25
【目录】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 符号说明13-15
• 前言15-19
• 第一部分 SOX4在去势抵抗性前列腺癌中表达升高19-24
• 1. 材料19-20
• 2. 方法20-22
• 3. 结果22-24
• 第二部分 SOX4是雄激素抑制性基因24-33
• 1. 材料24-26
• 2. 方法26-30
• 3. 结果30-33
• 第三部分 雌激素上调SOX4表达及其机制的研究33-41
• 1. 材料33-34
• 2. 方法34-35
• 3. 结果35-41
• 第四部分 SOX4过表达与雌激素生物学效应的关系及其与ERβ表达的临床相关性41-44
• 1. 材料41
• 2. 方法41-42
• 3. 结果42-44
• 讨论44-47
• 参考文献47-51
• 致谢51-52
• 攻读硕士学位期间发表的论文目录52-53
• 硕士期间第一作者文章全文53-82
• 附件82

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王海青;杨崇礼;;雄激素的疗愈原理[J];天津医药;1986年05期

2 崔毓桂;雄激素受体研究方法及其进展[J];实用男科杂志;1996年03期

3 刘颖,陆一帆;运动对制动大鼠骨骼肌中雄激素受体的影响[J];中国康复医学杂志;2001年04期

4 张子彦;雄激素受体的研究进展[J];国外医学(分子生物学分册);2002年02期

5 江军,金锡御,靳风烁,王洛夫;雄激素对大鼠前列腺不同分叶雄激素受体及其mRNA表达的影响[J];第三军医大学学报;2003年13期

6 陈蕾蕾,姚兵;睾丸外组织雄激素受体的分布及检测[J];中华男科学;2003年01期

7 梁军;雄激素对淋巴细胞的调节[J];现代免疫学;2004年03期

8 王洛夫,江军;雄激素受体在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用[J];第三军医大学学报;2004年24期

9 杨洁,张秋养,葛玲,邱曙东;青春期大鼠实验性精索静脉曲张对附睾雄激素受体的影响[J];西安交通大学学报(医学版);2005年01期

10 朱院山;蔡力群;;雄激素对男性性别、行为和认知的影响(英文)[J];中南大学学报(医学版);2006年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 谢骏逸;陈力;;雄激素及其相关因素对痤疮影响的研究进展[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年

2 游冬青;肖锦松;赵芳;;人雄激素受体激素结合区的克隆表达与活性研究[A];第三届全国现代生物物理技术学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年

3 邱云霞;曲燕;李相如;于建荣;;雄激素受体抵抗1例[A];第5次全国中西医结合男科学术会议论文汇编暨男科提高班讲义[C];2007年

4 田军;陶天遵;王凯夫;高峰;单雨;李磊;;雄性大鼠成骨细胞内雄激素受体表达的研究[A];中华医学会第三次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨骨质疏松诊断技术继续教育学习班论文汇编[C];2004年

5 李霖;李红;尹雪瑶;潘倩倩;吴芳;;雄激素受体在波动性高糖致人脐静脉内皮细胞损伤中的作用[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年

6 温俊平;陈刚;薛莹;;雄激素不敏感综合征的临诊应对[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年

7 刘娜;贾影;戚基萍;;雄激素受体在乳腺癌中的表达[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

8 郭东星;张华屏;刘立民;艾晓杰;乔中东;;核因子--κB在雄激素处理的巨噬细胞中的表达[A];动物学专辑——上海市动物学会2002年年会论文集[C];2002年

9 张曼娜;孙首悦;张惠杰;顾卫琼;洪洁;刘建民;王卫庆;宁光;李小英;;4例雄激素受体不敏感型综合征患者的分子遗传学研究[A];中华医学会第二届糖尿病及性腺疾病学术会议论文集[C];2012年

10 桂耀庭;;雄激素受体在精子发生的作用及其分子机制[A];中华医学会生殖医学分会人类精子库管理学组第三届年会全国男性生殖医学和精子库管理新进展第四次研讨会论文汇编[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前4条

1 张超群 李幼玲 范晓莉;山西医大第一医院研究发现：雄激素受体与再障贫血有关[N];中国医药报;2005年

2 白毅;新型雄激素受体调节剂有望治疗前列腺癌[N];中国医药报;2008年

3 陈茂j　余宁宁;ASC-J9为肌肉萎缩症治疗带来曙光[N];中国医药报;2007年

4 美国纽约罗切斯特大学教授 张传祥;雄激素 膀胱癌研究新目标[N];健康报;2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 莫文娟;前列腺癌雄激素转录调控网络的研究[D];复旦大学;2010年

2 张纪元;雄激素受体介导的基因调控网络及蛋白磷酸酶2Cκ的进一步功能研究[D];复旦大学;2010年

3 邹惟莹;Trihydrophobin 1促进雄激素受体降解及其在乳腺癌进展过程中作用的研究[D];复旦大学;2010年

4 庞莹;痤疮的流行病学及与雄激素受体基因多态性的相关研究[D];中国医科大学;2008年

5 伍学焱;雄激素受体结合分析和5α-还原酶活性测定方法的建立及初步临床应用[D];中国协和医科大学;1998年

6 曾星;L型钙通道CACNA1D调控前列腺癌细胞雄激素受体活性的机制研究[D];华中科技大学;2013年

7 杨之明;转胶蛋白抑制ARA54增强的雄激素受体转录功能和前列腺癌细胞的生长[D];浙江大学;2006年

8 杨延钟;Trihydrophobin 1相互作用蛋白以及Trihydrophobin 1与乳腺癌细胞化疗药物敏感性之间关系的研究[D];复旦大学;2007年

9 肖成武;雄激素剥夺对人前列腺癌细胞Egr1表达的影响及其机制研究[D];第二军医大学;2010年

10 叶鸣;低氧和运动经雄激素—雄激素受体途径对骨骼肌蛋白质合成的作用[D];北京体育大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张聪哲;LSD1介导的组蛋白H3K4去甲基化对雄激素受体调控靶基因转录的影响[D];复旦大学;2013年

2 杨木易;雌激素通过诱导雄激素抑制性基因SOX4的表达促进前列腺癌细胞的恶性进展[D];山东大学;2015年

3 王琰;二甲双胍通过雄激素受体途径抑制雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌[D];第三军医大学;2015年

4 吴淑芬;再生障碍性贫血患者雄激素和雄激素受体的改变及其意义[D];山西医科大学;2004年

5 吕红松;雄激素对血管平滑肌组织、细胞雄激素受体及血小板源性生长因子受体-β表达的影响[D];第一军医大学;2002年

6 王慧丽;雄激素受体类似物在拟黑多刺蚁中的免疫组织化学定位研究[D];陕西师范大学;2007年

7 王辉;雄激素受体在蛋白酶体抑制剂诱导的细胞自噬中的作用[D];哈尔滨工业大学;2013年

8 李靖华;乳腺癌中雄激素受体的表达及意义[D];河北大学;2010年

9 杨智;云南汉族痤疮与雄激素相关基因研究[D];昆明医学院;2005年

10 陈慧;雄激素促进组织型谷氨酰胺转移酶表达与原发性开角型青光眼的发病关系的研究[D];华中科技大学;2007年

  本文关键词：雌激素通过诱导雄激素抑制性基因SOX4的表达促进前列腺癌细胞的恶性进展，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：361939