雌激素受体α抑制膀胱癌侵袭

发布时间：2022-08-10 13:32

　　膀胱癌是第二常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤。随着年龄的增长,男性和女性的发病率逐渐增加。男性发病率约为女性的三倍。在美国,2012年约50,000男性和17,000名女性患膀胱癌。对香烟及工作环境致癌物的过度暴露或泌尿系统感染可能引起男性高患病率。然而,即使在缺乏这些危险因素的情况下,与性别有关的发病率的差异依然存在。因此,男女患者间的性激素及其受体的差异可能是膀胱癌发生率性别差异的潜在因素,然而有关此方面的证据仍较少。第一部分雌激素受体α（ERα）抑制膀胱癌细胞侵袭目的：探讨ERα与膀胱癌细胞侵袭的关系方法：首先稳定转染ERa或空载体质粒（vector）进入膀胱癌细胞。嘌呤霉素筛选5天后,免疫荧光测转染效率。并收集蛋白,Western Blot进一步证实转染效率。同时利用RNA干扰技术,选择性的沉默人膀胱癌细胞株647v中ERα基因的表达。之后,使用3种ERa阴性膀胱癌细胞株（T24,UMUC3和J82）和一种ERa阳性膀胱癌细胞株（647v）进行Transwell侵袭实验。三维侵袭实验进一步验证这些膀胱癌细胞株的侵袭能力。结果：1.成功建立了稳定转染ERα及shERα的膀胱癌细胞株。2... 

【文章页数】：139 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、ERa抑制膀胱癌细胞侵袭
    1.1 对象和方法
        1.1.1 细胞株
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 实验仪器
        1.1.4 主要试剂溶液的配制
        1.1.5 实验方法
        1.1.6 统计分析
    1.2 结果
        1.2.1 Western Blot法验证转染效率
        1.2.2 免疫荧光法验证转染效率
        1.2.3 Transwell侵袭实验
        1.2.4 降表达ERα对膀胱癌647v细胞侵袭力影响
        1.2.5 三维侵袭实验
    1.3 讨论
        1.3.1 膀胱癌发病的病因及性别因素的影响
        1.3.2 雌激素及其受体在膀胱癌的表达
        1.3.3 肿瘤的侵袭转移
    1.4 小结
二、ERα敲除鼠模型建立及ERα抑制膀胱癌侵袭
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 实验仪器
        2.1.4 主要试剂溶液的配制
        2.1.5 实验方法
        2.1.6 统计分析
    2.2 结果
        2.2.1 建立ERαKO鼠模型及其基因型分析
        2.2.2 BBN诱导膀胱癌发生及血尿检测
        2.2.3 膀胱癌侵袭性
        2.2.4 生存率分析
    2.3 讨论
        2.3.1 ERaKO基因敲除鼠模型
        2.3.2 BBN诱导膀胱癌鼠模型
        2.3.3 其他膀胱癌动物模型
    2.4 小结
三、ERa调节IGF1、MMP2表达抑制膀胱癌侵袭
    3.1 对象和方法
        3.1.1 细胞株
        3.1.2 实验试剂
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 主要试剂溶液的配制
        3.1.5 实验方法
        3.1.6 统计分析
    3.2 结果
        3.2.1 UMUC3细胞过表达ERα后侵袭相关因子表达差异
        3.2.2 过表达ERα后IGF1和MMP2表达降低
        3.2.3 降表达ERα后IGF1和MMP2表达升高
        3.2.4 IGF1调控MMP2表达
        3.2.5 ERα/IGF1影响膀胱癌侵袭
        3.2.6 MMP2影响膀胱癌侵袭
        3.2.7 ERα/IGF1/MMP2在膀胱癌组织中表达
    3.3 讨论
        3.3.1 IGF1与肿瘤侵袭
        3.3.2 MMP2与肿瘤侵袭
        3.3.3 ERα/IGF1/MMP2轴影响膀胱癌侵袭
    3.4 小结
四、ERα激动剂体外和体内治疗膀胱癌
    4.1 对象和方法
        4.1.1 实验动物与细胞
        4.1.2 实验试剂
        4.1.3 实验仪器
        4.1.4 主要试剂溶液的配制
        4.1.5 实验方法
        4.1.6 统计分析
    4.2 结果
        4.2.1 ERα激动剂PPT抑制膀胱癌细胞侵袭
        4.2.2 ERα激动剂PPT抑制BBN鼠模型膀胱癌侵袭
        4.2.3 PPT治疗对鼠生存率影响
    4.3 讨论
        4.3.1 膀胱癌的治疗
        4.3.2 雌激素受体调节剂治疗膀胱癌
    4.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3673725