PDGF通过PDGFR/STAT3通路诱导大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化

发布时间：2023-02-27 22:18

　　目的勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)是最常见的男性性功能障碍疾病。我们前期研究发现缺氧调控大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(corpora cavernosum smooth muscle cells,CCSMCs)表型转化,但是其中的分子机制仍然不清楚。血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)相关的通路与细胞表型转化关系密切,但是多数研究都集中在血管和气道平滑肌细胞。我们通过体外实验探究PDGF相关信号通路在大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化过程中所起到的作用。方法采用Ⅰ型胶原酶消化法获得大鼠海绵体平滑肌细胞并进行体外培养;以不同浓度PDGF干预CCSMCs,观察细胞形态变化,Western-blot法观察细胞表型变化;使用PDGF受体(PDGF receptor,PDGFR)阻断剂 crenolanib 和 PDGFR 小分子干扰 RNA(siRNA)处理平滑肌细胞后再以20ng/ml PDGF处理平滑肌细胞,检测表型相关蛋白、PDGFR蛋白及信号通路蛋白表达的变化;采用细胞转导和转录活化因子3(signal ...

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
一、材料和方法
    (一) 实验材料
        1. 实验动物
        2. 主要试剂
        3. 主要仪器和设备
    (二) 实验方法
        1. 大鼠海绵体平滑肌细胞的分离、培养
        2. 免疫荧光法(Immunofluorescence,IF)鉴定细胞
        3. PDGF处理平滑肌细胞
        4. PDGF受体阻断剂crenolanib处理平滑肌细胞
        5. PDGFR、STAT3和AKT基因沉默处理平滑肌细胞
        6. STAT3过表达处理平滑肌细胞
        7. Western-Blot蛋白印迹
        8. 统计方法
二、结果
    (一) CCSMCs的鉴定
    (二) PDGF-BB促平滑肌细胞肥大及由收缩型向合成型转化
    (三) PDGFR抑制剂可抑制PDGF-BB引起的CCSMCs表型转化
    (四) STAT3 siRNA可抑制PDGF-BB引起的CCSMCs表型转化
    (五) STAT3过表达削弱crenolanib对PDGF-BB促表型转化的抑制作用
三、分析与讨论
结论
参考文献
附图
致谢
文献综述 PDGF在勃起功能障碍中的研宄进展
    参考文献



本文编号：3751537