RNA甲基化识别蛋白YTHDC2调控CCNB在锰致精子发生障碍中的作用

发布时间：2023-02-28 19:12

　　目的:随着工业化进程的发展,世界上7%的男性患有不育症,使其成为公共关注的焦点,男性不育症的影响因素是多方面的,环境污染是重要的影响因素之一。引起生殖系统损伤的环境污染物种类复杂多样,重金属则是其中之一。锰(Manganese,Mn)作为重金属的一种,是人体必须的微量元素,参与人体的多种功能活动。但环境中过量的锰暴露也会对雄性生殖系统产生影响,已有研究表明,锰可通过血睾屏障而蓄积于睾丸,从而损害雄性生殖系统。精子发生是哺乳动物睾丸中贯穿一生每天产生数以亿计精子的基础。其包含精原干细胞的自我更新、精原细胞的有丝分裂、精母细胞的减数分裂以及精子变形这四个阶段,任何环节的失调都将导致精子发生障碍。细胞周期各个阶段交替变化可精确的调控精子发生过程,其细胞周期蛋白B1(CCNB1)和细胞周期蛋白B2(CCNB2)为调节亚基,推动细胞周期各时相的有序进行。生精功能障碍是男性不育的一个关键因素,从不同层面探究精子发生中的调控机制对于有效防治男性不育具有重要意义。m6A识别蛋白YTHDC2对于小鼠精子发生不可或缺,但其在精子发生中的功能和作用机制尚不清楚。因此,本研究探讨m6A识别蛋白YTHDC2在锰...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 人群样本、实验动物、细胞系
    2.2 主要试剂和仪器
        2.2.1 主要试剂
        2.2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 人群样本
        2.3.2 动物实验
        2.3.3 细胞实验
        2.3.4 数据处理和统计学分析
3 结果
    3.1 接触Mn作业对男工精液的影响
        3.1.1 研究对象的基本信息
        3.1.2 接触Mn作业男工精液质量的改变
        3.1.3 接触Mn作业男工精浆中锰含量的改变
        3.1.4 接触Mn作业男工精浆中与精子发生有关的m6A相关基因mRNA表达的变化
    3.2 染锰对小鼠生殖功能的影响
        3.2.1 染锰后小鼠睾丸组织的变化
        3.2.2 染锰后小鼠精子质量的变化
        3.2.3 染锰后睾丸中YTHDC2 mRNA表达和蛋白水平
    3.3 染锰对GC-1spg细胞的影响
        3.3.1 不同染锰剂量及暴露时间对GC-1 spg细胞活力的影响
        3.3.2 染锰对GC-1 spg细胞形态的影响
        3.3.3 染锰后GC-1 spg细胞中YTHDC2 mRNA表达和蛋白水平
        3.3.4 染锰对GC-1 spg细胞周期的影响
    3.4 锰对YTHDC2下游基因的筛选
        3.4.1 通过Pathway分析进行YTHDC2下游基因的筛选
        3.4.2 染锰后GC-1 spg细胞中CCNB1和CCNB2 mRNA表达和蛋白水平
        3.4.3 染锰后小鼠睾丸中CCNB1和CCNB2 mRNA表达和蛋白水平
        3.4.4 锰暴露的精浆中CCNB1和CCNB2的mRNA表达
    3.5 YTHDC2在锰致GC-1 spg细胞周期阻滞中的作用
        3.5.1 GC-1 spg细胞YTHDC2 基因转染效率鉴定
        3.5.2 转染后各实验组细胞周期的分析
        3.5.3 转染后染锰GC-1 spg细胞中CCNB1和CCNB2 mRNA表达
        3.5.4 转染后染锰GC-1 spg细胞中CCNB1和CCNB2的蛋白水平
4 讨论
5 结论
附件1
附件2
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
实践报告
致谢
个人简介



本文编号：3751691