弱精子症COX6B1的表达及其与体外受精结局的初步研究

发布时间：2017-06-21 08:14

  本文关键词：弱精子症COX6B1的表达及其与体外受精结局的初步研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨弱精子症及精液正常男性细胞色素氧化酶6B1在精子m RNA水平的表达及蛋白表达差异,同时了解该蛋白在精子的定位。方法收集于广西医科大学一附院生殖中心就诊的精液正常组、弱精子症组精液各50例,采用Pure Cepition液行密度梯度离心分离精子。提取精子总RNA后逆转录为c DNA,设计COX6B1基因特异性扩增引物,通过实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(q RT-PCR)以两组精子c DNA为模板进行特异性扩增,比较两组精子中COX6B1基因的转录水平差异。分别取两组少量离心后精子稀释至合适浓度,涂片后通过免疫荧光技术,在激光扫描共聚焦荧光显微镜600倍油镜下观察,了解COX6B1在成熟精子的定位,同时随机选择视野拍照,比较两组细胞平均荧光强度差异。结果COX6B1蛋白定位在精子尾部中段,弱精子症组COX6B1基因表达下调,m RNA转录相对表达量1.393±1.447显著低于精液正常组4.249±4.933(P=0.0080.01),弱精子症组COX6B1平均荧光强度低于精液正常组(32.341±6.195 vs 48.931±5.784),差异有统计学意义。结论COX6B1蛋白在精子尾部中段表达,弱精子症患者的精子中COX6B1 m RNA转录及蛋白表达水平较精液正常组均下调,提示COX6B1基因有望成为弱精子症的一个分子标记。目的COX6B1差异表达的弱精子症患者和精液正常者的IVF结局对照。方法两组患者各50例,均于广西医科大学第一附属医院生殖中心行体外受精-胚胎移植,比较两组的受精情况及临床结局。结果弱精子症组与精液正常组男性患者年龄、女性患者年龄、不孕年限无统计学差异(P0.05)。弱精子症组的受精率为72.36%,低于精液正常组的79.91%,有显著统计学差异(P0.01),弱精子症组正常受精率也低于精液正常组(70.08%vs 63.60%)。两组的卵裂率、优胚率、临床妊娠率及早期流产率无明显统计学差异(P0.05)。结论弱精子症组受精率及正常受精率均低于精液正常组,两组卵裂率、优胚率、临床妊娠率、早期流产率无统计学差异。推测COX6B1蛋白降低可能对线粒体能量代谢产生不利影响从而降低了受精率。
【关键词】：细胞色素氧化酶6B 男性弱精子症 基因表达 蛋白定位 细胞色素氧化酶6B 弱精子症 体外受精-胚胎移植 受精率
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R698.2
【目录】：

• 个人简历3-6
• 第一部分 摘要6-7
• 第二部分 摘要7-8
• 第一部分 ABSTRACT8-10
• 第二部分 ABSTRACT10-12
• 前言12-16
• 第一部分 弱精子症男性精子中COX6B1的表达及定位分析16-34
• 材料与方法16-22
• 结果22-26
• 讨论26-33
• 小结33-34
• 第二部分 COX6B1差异表达的弱精子症患者及精液正常者行IVF的结局比较34-43
• 材料与方法34-36
• 结果36-37
• 讨论37-42
• 小结42-43
• 参考文献43-49
• 附录49-50
• 综述50-64
• 参考文献59-64
• 致谢64-66
• 攻读学位期间发表的论文66-67

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本文编号：468031