QDPR基因表达水平对肾小管上皮细胞系NRK-52E细胞DHFR表达的影响

发布时间：2017-06-23 16:10

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【摘要】：目的 OLETF大鼠醌式二氢生物喋呤还原酶(Quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)存在K93T点突变,QDPR催化醌型二氢生物喋呤还原成四氢生物喋呤(tetrahydrobiopterin,BH4);二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)能将二氢喋呤还原成BH4,提示生物喋呤代谢与叶酸代谢通路之间有串扰。文中通过研究QDPR基因表达水平对肾小管上皮NRK-52E细胞DHFR表达的影响,探讨QDPR基因在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的作用机制。方法 Western blot检测高糖环境下NRK-52E细胞及OLETF大鼠DHFR蛋白表达情况。利用慢病毒技术感染NRK-52E细胞,制作空载过表达、过表达QDPR敲低随机序列对照和敲低QDPR模型。每组再分别给予5.4 mmol/L正常糖培养基和30 mmol/L高糖培养基培养细胞72 h,模拟DN模型。实验分组:NRK-52E对照组、NRK-52E高糖组、空载过表达病毒对照组、空载过表达病毒高糖组、QDPR基因过表达组、QDPR基因过表达高糖组、敲低随机序列对照组、敲低随机序列高糖组、QDPR基因敲低组、QDPR基因敲低高糖组。观察高糖环境QDPR基因的表达情况对DHFR蛋白表达水平的影响。结果 NRK-52E高糖组DHFR蛋白含量(0.33±0.16)低于NRK-52E对照组(0.64±0.05),差异有统计学意义(P0.05);OLETF大鼠DHFR蛋白的表达水平(1.03±0.12)明显低于LETO大鼠的表达水平(1.56±0.16),差异有统计学意义(P0.01)。与空载过表达病毒高糖组(0.63±0.08)相比,QDPR基因过表达高糖组DHFR蛋白含量(0.12±0.09)降低,差异有统计学意义(P0.01);与敲低随机序列对照组(0.52±0.08)相比,QDPR基因敲低高糖组DHFR表达量(0.62±0.27)差异无统计学意义(P0.05)。结论DHFR蛋白在DN的发生发展中可能起到重要作用,QDPR基因过表达使DHFR蛋白表达含量下降,QDPR基因过表达通过下调DHFR蛋白的表达水平进而影响DN的发展。
【作者单位】： 华北理工大学医学实验中心/老年医学国际科技合作基地;唐山市玉田县医院内分泌科;华北理工大学附属开滦总医院内分泌科;北京军区解放军261医院心血管内科;中日友好医院临床医学研究所;
【关键词】： 糖尿病肾病 二氢生物喋呤还原酶 二氢叶酸还原酶 肾小管上皮细胞
【基金】：国家自然科学基金(81100518,81373795) 河北省高等学校科学研究计划(QN2014013)
【分类号】：R587.2;R692.9
【正文快照】： Influence of QDPR expression on DHFR expression of NRK-52E cells in high glucose ambienceYANG Xiang-jun1,PU Zhi-jie2,MENG Ling-yu3,MA Yan-hong4,HE Hai-lan1,XIONG Hao1,WU Xue-jing3,ZHANG Hao-jun5,LI Zhi-guo1(1.Medical Research Center,North China Universit

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