siRNA干扰MACC1表达对前列腺癌细胞株PC-3生长与侵袭影响研究

发布时间：2017-08-05 21:34

  本文关键词：siRNA干扰MACC1表达对前列腺癌细胞株PC-3生长与侵袭影响研究

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【摘要】：目的结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer 1,MACC1)在肿瘤侵袭和转移中起重要作用,在前列腺癌中的研究较少,本研究探讨siRNA转染下调MACC1表达对前列腺癌细胞株PC-3增殖和侵袭的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)法检测10例前列腺癌和其癌旁组织及4种前列腺癌细胞株(LNCap、PC-3、DU145、C4-2)MACC1mRNA的表达;将前列腺癌细胞株PC-3分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转染MACC1特异性小干扰RNA(small RNA interference,siRNA)(MACC1siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做处理。RT-PCR法及蛋白质印迹法检测siRNA转染前后MACC1mRNA及蛋白水平的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测转染后PC-3细胞增殖变化,Transwell小室法检测PC-3细胞侵袭能力的变化,蛋白质印迹法检测Met/MAPK信号通路蛋白改变。结果 10例前列腺癌组织中MACC1mRNA相对表达量为0.82±0.27,高于癌旁组织的0.09±0.05,t=23.20,P0.001;前列腺癌细胞株PC-3、DU145和C4-2 MACC1mRNA的表达分别为0.86±0.19、0.65±0.23和0.77±0.23,高于LNCap细胞的0.17±0.07。实验组PC-3细胞转染siRNA后,MACC1mRNA表达为0.16±0.03,低于阴性对照组的0.79±0.04,t=7.91,P0.001;也低于空白对照组的0.81±0.34,t=8.61,P0.001。实验组MACC1蛋白表达量为0.10±0.01,显著低于阴性对照组的0.39±0.045,t=11.21,P0.001;也低于空白对照组的0.41±0.10,t=11.73,P0.001;MACC1siRNA组PC-3细胞增殖能力在72h分别为0.58±0.65,低于阴性对照组的1.18±0.10和空白对照组的1.23±0.05,P0.001;MACC1siRNA组PC-3细胞侵袭的细胞数目为126.0±9.8,低于阴性对照组233.3±12.0及空白对照组242.3±11.5,P0.05。转染后Met、p-MEK1/2和p-ERK1/2的MACC1siRNA蛋白相对表达量分别为0.47±0.03、0.34±0.03和0.94±0.03,较对照组的0.26±0.04、0.10±0.11和0.10±0.12明显降低,P0.05;MEK1/2和ERK1/2蛋白相对表达量无明显下降,P0.05。结论 MACC1可能通过上调Met和MAPK信号通路促进前列腺癌细胞的恶性行为。
【作者单位】： 天津医科大学肿瘤医院·国家肿瘤临床医学研究中心·天津市肿瘤防治重点实验室;天津医科大学第二附属医院·天津泌尿外科研究所;天津医科大学肿瘤医院病理科;天津医科大学第二附属医院肿瘤科;
【关键词】： 前列腺癌 siRNA干扰 结肠癌转移相关基因 细胞增殖 细胞侵袭
【基金】：国家自然科学基金(81572543;81301949) 天津市卫生行业重大公关项目(14KG141) 国家肿瘤临床医学研究中心个体化医学平台建设项目(13ZCZCSY20300)
【分类号】：R737.25
【正文快照】： 中华肿瘤防治杂志,2015,22(23):1803-1808Inhibition effects of MACC1siRNA on proliferation and invasion ofhuman prostate carcinoma PC-3cellsWEI Shi-qin1,LI Chang-ying2,LI Bao-guo1,LI Jian-min2,MENG Bin3,WANG Li-li1,WANG Hai-tao41.Tianjin Medical University ，

本文编号：627064