小鼠足细胞特异敲除核因子-κB受体活化因子对蛋白尿的影响

发布时间：2017-08-12 17:26

  本文关键词：小鼠足细胞特异敲除核因子-κB受体活化因子对蛋白尿的影响

  更多相关文章： RANK LPS 足细胞 基因敲除

【摘要】：研究背景随着社会经济发展,人民生活水平的提高,慢性肾脏病(CKD)已成为威胁人类健康的全球性公共健康问题。有调查表明,在我国,成年人中CKD患病率高达10.8%。而慢性肾脏病的特点是隐匿起病,逐渐进展,不可逆转。近几年来,我国每年进入肾脏病终末期的患者人数依旧不断攀升,因此,如何延缓CKD的进展成为急需解决的一项医疗难题。大量研究表明,蛋白尿是影响CKD恶化的独立危险因素之一,蛋白尿的水平将直接影响慢性肾脏疾病的预后,故如何降低蛋白尿水平具有重大的医学研究价值。肾小球滤过屏障的功能和结构与蛋白尿的发生发展存在相关联系。肾小球滤过屏障由5层结构组成：内皮细胞表面膜结构,内皮细胞及内皮细胞窗孔,肾小球基底膜(GBM),足细胞下间隙和足细胞。足细胞足突之间的裂孔膜构成了肾小球滤过的最后一道屏障。随着认识的进一步加深,越来越多的文献指出,足细胞在参与蛋白尿的发生中占据了重要的地位。足细胞是位于肾小球脏层的上皮细胞。相邻足细胞足突之间呈指状交叉形成滤过的裂孔。裂隙间由裂孔隔膜构成,足突之间的裂孔膜构成了肾小球滤过的最后一道屏障。只有小分子物质能够通过裂孔隔膜,而蛋白质等大分子物质不能通过。足细胞顶膜区覆盖着带有负电荷的podocalyxin,它参与了维持肾小球滤过膜负电荷屏障。而足细胞特殊结构的维持有赖于微丝肌动蛋白为主的细胞骨架结构以及足细胞中特异性表达的蛋白分子,包括以nephrin为代表的SD膜蛋白；以α3β1整合素为代表的基底膜-足细胞连接到膜蛋白；以及以podocalyxin为代表的足细胞顶端蛋白。足细胞的受损会破坏正常的肾小球滤过屏障,导致蛋白尿的发生。在人类疾病中,微小病变型肾病、膜性肾病及局灶节段性肾小球肾病等已被证实与足细胞的损伤存在联系。而足细胞是有丝分裂期后的细胞,高度分化,分裂增殖能力有限,故损伤丢失后难以再生。足细胞损伤后,周边的足细胞会肥大以覆盖住裸露的毛细血管丛,同时,肥大的足细胞的易损性会增加。当肥大的足细胞失代偿后,不足以覆盖住裸露的毛细血管丛时,失去足细胞支撑的基底膜就会凸向肾小囊,进而与肾小球壁层细胞粘连,最终导致会肾小球硬化的发生。足细胞损伤后会发生形态学及非形态学的改变,形态学的改变如足突融合,细胞肥大及凋亡等；而非形态学的改变如足细胞特异蛋白分子(synaptopodin等)及足细胞骨架的改变等。例如LPS就是通过影响肌动纤维的重组从而引起足突动力系统改变,在体外实验表现为迁移能力及侵袭能力的增强,即活动力增强,而在体内实验中就表现为足细胞足突的融合,进而导致蛋白尿的发生。在人类肾小球疾病及LPS诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中可以观察到足细胞尿激酶受体(urokinase receptor,uPAR)表达增加。uPAR是糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白中的一种,主要在炎症细胞中表达,它通过与细胞表面的整合素结合,形成信号传导复合体,在炎症细胞的迁徙中起重要作用。在足细胞损伤的过程中,为了适应环境,足细胞会产生一些异常蛋白以避免损伤的恶化,及存在细胞骨架蛋白的丢失,这种丢失以肌动蛋白为主。同时,也存在一些足细胞特异性表达蛋白的缺失,例如WT1及Synaptopodin等。在足细胞胞浆区α3β1整合素通过肌动蛋白相关蛋白复合物(包括talin,vinculin等)与骨架蛋白肌动蛋白相互作用,从而维持滤过膜结构正常,且其对于GBM的黏附极其重要。α3β1整合素通过下调Bax/Bcl2/PKC通路阻止足细胞凋亡脱落。整合素是粘附分子的一种,它们存在于细胞表面,化学成分是糖蛋白,可以指导细胞合成细胞外基质,维持组织的正常结构和功能,介导细胞与细胞外基质的黏附及信息传递。而在肾脏组织中,以p1类整合素最为多见[1]。整合素的p链负责与下游信号转导分子相互作用[2]。α3β1作为足细胞最主要表达的整合素,主要沿着GBM分布,同时,将足细胞锚定于GBM上,从而维持肾小球的正常滤过功能。以往存在实验证实,利用特异抗体阻断β1结合域,可以引起足突消失及蛋白尿的发生。而进一步的研究表明,α3β1整合素通过下调Bax/Bcl-2、蛋白激酶C(PKC)通路阻止足细胞凋亡和脱落[3]。以上结果均提示β1整合素在足细胞生长、发育及损伤中存在重要的作用。相对于β1整合素而言,β3整合素在肾脏表达的较少。但是近年来的研究发现, uPAR-β3整合素系统在蛋白尿的发生和局灶性节段性肾小球硬化疾病的发生中存在重要的作用。uPAR是一种与细胞活动性相关的分子,主要表达在活动性强的细胞上。p3整合素与uPAR结合为脂质依赖的复合物,共同地表达于足细胞上。因而,β3整合素结构的改变会该复合物的活化,进而导致与配体之间的吸引力增加。在小鼠体内,活化的β3整合素会导致蛋白尿的发生。相反,阻断uPAR的表达及β3整合素的活化会减少足细胞足突的融合及蛋白尿的发生[4]。已有研究表明,NFAT-钙调磷酸酶途径参与活化足细胞中uPAR的转录,从而导致β3整合素的活化和蛋白尿的发生。运用环孢素或NFAT抑制剂11R-VIVIT可阻断该途径且减少uPAR的表达。并且,钙调磷酸酶-]NFAT途径存在于uPAR的上游[5-6]。NF-κB配体的受体活化因子(RANKL)及RANK共同组成了TNF受体超家族成员信号传导路径。RANKL是破骨细胞分化、发育、成熟过程中起关键作用的细胞因子[7]。在破骨细胞中,RANKL通过与RANK结合,再募集TNF受体相关因子,激活核转录因子κB (NF-κB)或分裂原激活的蛋白激酶(MAPKs),从而调节破骨细胞的生存、分化、凋亡与活化。而骨保护素(OPG)是这一旁路的诱骗(decoy)受体,它通过与RANK结合从而阻断这一信号途径。对该系统的研究,以往的研究主要集中在骨质疏松及骨肿瘤性疾病中。但近年来的研究发现,该系统不仅在肾性骨病,前列腺癌及乳腺癌等疾病的发病中起重要作用[8-9],且参与自身免疫系统疾病的发生发展。近年来的研究中发现,该系统也与足细胞的损伤存在一定联系。在我们以往的研究中发现,正常足细胞上RANK表达低水平,但在足细胞疾病中,RANK表达水平明显升高；在动物模型中,嘌呤霉素氨基核苷可诱导大鼠足细胞产生RANK,且诱导足细胞凋亡,在5/6肾切除动物模型中,RANK也是高表达的,且缬沙坦可减少其水平；以上实验结果均说明RANK可能是导致足细胞损伤的有害因子[14-15]。因此,为进一步探讨足细胞损伤的原因,本实验利用Cre-LoxP重组酶系统得到足细胞特异性RANK敲除鼠,观察在足细胞中特异敲除RANK基因对足细胞所造成的影响,进而制作LPS诱导的小鼠短暂性蛋白尿模型,通过观察KO组小鼠与其同窝对照组小鼠(W组)及普通C57小鼠(C57组),探讨RANK参与足细胞损伤具体机制及可能的相关分子, 为治疗肾小球疾病寻找关键的调控靶点。研究目的RANK在足细胞损伤中的意义。损伤足细胞中RANK的信号途径。研究方法一、足细胞特异RANK基因敲除小鼠鉴定及表型观察。(一)、RABK：小鼠的培育及鉴定B6.Cg-Tg(NPHS2-cre)295Lbh/J小鼠购自美国Jackson实验室,RANK-loxP鼠由澳大利亚University of Western Australia的郑铭豪教授提供,在南京大学-南京生物医药研究院饲养及繁殖。饲养与中山大学北校区动物实验中心的无特定病原菌(SPF)环境中,12小时光照／黑暗交替,自由进食、饮水。留小鼠尾巴提取DNA后进行基因型鉴定。普通C57小鼠购于中山大学东校区动物实验中心,饲养于中山大学北校区动物实验中心的无特定病原菌(SPF)环境中,12小时光照／黑暗交替,自由进食、饮水。选择不同基因型的雌性小鼠各6只,年龄为6-8周,体重为20-30g,进行表型观察,内容包括：体重和肾脏形态。二、建立脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型,观察三组小鼠肾脏组织病理,足突融合及对Integrin-β1、integrin-β3、uPAR表达的影响。(一)、动物分组及脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型的建立随机选取年龄为6-8周的雌性小鼠经基因鉴定为RANK足细胞特异敲除鼠(RANK-/-),野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠各6只,体重为20-30g。分为C57组(普通C57小鼠),W组(野生型对照组小鼠)及KO组(足细胞特异性RANK-/-小鼠)。在LPS前分别收集18只小鼠的24h尿液,检测尿量及白蛋白肌酐比。之后给予100μg/只腹腔注射LPS,于24h后收集24h尿液测量尿量及白蛋白肌酐比。所有小鼠饲养于代谢笼中,自由进食和饮水。(二)、标本取材及处理分别在给药前及给药后第二天收集24h尿液,分别处死三组动物。留取肾皮质,一部分于液氮罐中长期保存,另一部分用于病理检查并制作冰冻切片用于后期免疫荧光实验,电镜检查以及提取蛋白做westernblot实验。(三)、各指标的检测与观察1、LPS造模后尿白蛋白肌酐比测定：小鼠腹腔注射LPS后收集24h尿液。按照试剂盒要求,用ELISA法测定尿液中白蛋白及肌酐的含量,计算尿白蛋白肌酐比值。2、病理：LPS前后三组小鼠均取肾组织制成石蜡切片行PAS染色,观察LPS前后三组肾小球和肾小管损伤程度。WT 1可作为足细胞胞核的特异性标记用来计数足细胞。免疫组化：兔抗大鼠WT1(SC-192)购自美国Santa Cruz公司,SP法按试剂盒说明书操作。实验结果应用病理图像分析软件做半定量分析,每个切片随机选取10个肾小球(400倍),对于WT1染色的切片,在电脑保存400倍图像的同时,计数染色阳性的足细胞个数。3、电镜：小鼠腹腔注射LPS后收集完24h尿液,第二天处死。取新鲜肾脏皮质标本1-2mm3,立即送冰冻切片。美国FEI透射电镜(Tecnai G2 Spirit Twin):观察肾小球基底膜厚度,足细胞形态。每只小鼠选择1-2个肾小球,对每个肾小球随机选取10-20个不同位置进行测定。4、免疫荧光及激光共聚焦：1).临用前拿出切片,室温充分晾干,切忌干片；2).用1xPBS洗3次×5分钟／每次；3).吸取0.5%TritonX-100置于组织上,透化20分钟;4).用1 xPBS洗3次×5分钟／每次；5).滴加5%BSA置于室温下封闭10分钟；6).加一抗在湿盒里,4℃过夜；7).1×PBS洗3次,每次5分钟；8).再于组织上滴加第二种一抗(须与第一种一抗种属不同)；9).滴加荧光二抗(用I%BSA稀释)置于室温37℃,反应60分钟,注意避光；10),.用1xPBS洗3次×5分钟／每次；11).如需做双重免疫荧光,再滴加第二种二抗于37℃,反应60分钟；12).用1xPBS洗3次×5分钟/每次；13).抗荧光衰减剂封片；14).湿盒避光放入4℃冰箱待观察；15).共聚焦显微镜观察。5、Westernblot:小鼠腹腔注射LPS后收集完24h尿液,第二天处死。取新鲜肾脏切取黄豆粒大小用锡箔纸包住放入液氮中,迅速取出后用研钵研磨至糊状,放入细胞裂解液中,再用细胞超声粉碎机粉碎；冰上静置10min。 14000rpm,5min离心,取上清至新EP管,而后8000rpm, 10min离心,取上清为相应标本的蛋白。用BSA试剂盒测量每个标本的蛋白浓度,计算配平后将蛋白变性。蛋白电泳使用7.5%SDS-聚丙烯酰胺凝胶,转膜使用PVDF膜,转膜后使用5%脱脂牛奶室温封闭1h,而后将膜放入特异性抗体中4℃过夜。第二天用PBS-0.1%Tween20洗膜,之后与相应的二抗结合室温孵育1h; PBS-0.1%Tween20洗膜3次,每次10min,暗房曝光。三、统计学处理本研究所有实验均重复3次,结果以x±s表示。本实验所有的数据应用SPSS19.0统计软件进行处理,组间比较采用单因素方差分析,Levene检验方差齐性为方差齐,P0.05为差异有统计学意义。结果一、足细胞特异RANK基因敲除小鼠的体质量,肾脏形态、重量与野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠差异无统计学意义。将RANK-loxP鼠与NPHS2启动Cre的转基因鼠B6.Cg-Tg(NPHS2-cre)295Lbh/J交配,筛选出同时含有Cre及RANK两种基因型的子代小鼠,其足细胞将缺失RANK基因表达。在小鼠成年期(6-8周时),对6只雌性的RANK-/-小鼠与WT小鼠及普通C57小鼠进行比较。C57组小鼠体重(25.47±6.03)vs W组小鼠体重(22.45±2.38) vs KO组小鼠体重(23.72±.41)差异无统计学意义。C57组小鼠肾脏重量(1.27±0.05)vs W组小鼠肾脏重量(1.12±0.11) vs KO组小鼠肾脏重量(1.15±0.10)差异无统计学意义。二、注射脂多糖(LPS)后,足细胞特异RANK基因敲除小鼠(KO组)蛋白尿较野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠有所减少。实验前,三组小鼠尿白蛋白肌酐比分别为C57组(6.34±0.68)vs W组(7.39±1.84) vs KO组(7.40±1.60),差异无统计学意义。注射LPS后24h,三组小鼠尿白蛋白肌酐比(μg/mg)开始显著升高,提示造模成功。同时KO组(23.70±9.90)明显低于野生型对照组(107.56±22.32)及普通C57小鼠组(132.13±14.26),(P0.05)。三、注射脂多糖(LPS)后,三组小鼠肾脏组织病理结果无明显改变,三组小鼠足细胞数目均有所下降,但KO组足细胞数目较其余两对照组下降得更少。(一)、三组小鼠肾脏组织病理结果实验前,各组小鼠肾脏组织在PAS染色下观察形态正常,肾小球和肾小管均无病变。注射LPS后,三组小鼠的肾小球和肾小管病理改变无明显差别。(二)、足细胞计数结果LPS前,三组小鼠足细胞数目差别无统计学意义。LPS后,三组小鼠足细胞数目都有所下降,但C57组及W组的足细胞数目明显比KO组低,且差别有统计学意义,提示LPS后C57组及W组足细胞丢失得更多；LPS后KO组足细胞也存在丢失,但较对照组少。四、电镜下足细胞特异RANK基因敲除小鼠的足细胞足突融合较野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠有所减少。实验前,各组小鼠肾脏组织在电镜下观察形态正常,足细胞无病变。注射LPS后24h,可以观察到三组小鼠足细胞足突出现融合。但在C57组及W组,足细胞足突融合范围更广泛,而KO组足细胞足突融合情况明显较对照组减轻。五、脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中Integrin-β1、integrin-β3、uPAR表达的影响。(一)、使用激光共聚焦显微镜观察双重免疫荧光染色的小鼠肾脏组织Synaptopodin(绿色荧光)是足细胞特异性骨架蛋白,可以用来定位足细胞。在注射LPS前,三组小鼠Synaptopodin表达无差异。已知在正常小鼠肾小球上,RANK (红色荧光)是微量表达于足细胞的。在本实验结果中,注射LPS前,C57组及W组RANK均微量表达,但KO组无RANK表达。在注射LPS后,三组小鼠Synaptopodin表达均有所下降,且C57组及W组RANK表达量明显上升,但KO组依旧无RANK表达。提示KO组的确为足细胞特异性RANK敲除鼠。脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中integrin-β1表达的影响。在本实验结果中,注射LPS前三组小鼠integrin-β1(红色荧光)在肾小球上表达无明显差异,与Synaptopodin(绿色荧光)共定位。而注射LPS后,三组小鼠integrin-β1的表达均有所下降,但KO组小鼠相对其他两组小鼠integrin-β1表达的下降有所增加。2、脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中integrin-β3表达的影响。在本实验结果中,注射LPS前三组小鼠integrin-β3(红色荧光)在肾小球上表达无明显差异,与Synaptopodin(绿色荧光)共定位。而注射LPS后,三组小鼠integrin-β3的表达均有所升高,但KO组小鼠相对其他两组小鼠integrin-β3表达的升高有所减少。(二)、使用Westernblot检测三组小鼠肾脏组织中integrin-β1、integrin-β3、 uPAR表达的影响。1、脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中integrin-β1表达的影响。Western方法检测发现LPS后三组小鼠肾脏组织的Integrin-β1表达均有所下降,但KO组相对于C57组及W组,Integrin-β1的表达下降的更多。脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中integrin-β3表达的影响。Western方法检测发现LPS后三组小鼠肾脏组织的Integrin-β3表达均有所上升,但KO组相对于C57组及W组,Integrin-β3的表达上升的更少。3、脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中uPAR表达的影响。Western方法检测发现LPS后三组小鼠肾脏组织的、uPAR表达均有所上升,但KO组相对于C57组及W组,uPAR的表达上升的更少。结论一、足细胞特异RANK基因敲除小鼠的体质量,肾脏形态、重量及蛋白尿水平与野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠差异无统计学意义。二、在脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,足细胞特异RANK基因敲除小鼠的蛋白尿水平较其余两对照组有明显减少,提示RANK在足细胞损伤中具有重要价值。三、在脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织病理结果无明显改变,三组小鼠足细胞数目均有所下降,但KO组足细胞数目较其余两对照组下降得更少,且电镜下KO组足突融合较其余两对照组有所减少,提示足细胞特异性敲除RANK基因对足细胞具有保护意义。四、在脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,KO组小鼠的integrin-β1表达较其余两对照组小鼠下降的更多,integrin-β3表达较其余两对照组小鼠上升的更少,uPAR的表达较其余两对照组小鼠上升的更少,提示在足细胞中RANK基因可能通过与integrin-β1,uPAR及integrin-β3等分子相互作用,从而介导足细胞的损伤,影响蛋白尿的发生。
【关键词】：RANK LPS 足细胞 基因敲除
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R692
【目录】：

• 摘要3-13
• ABSTRACT13-22
• 引言22-26
• 材料与方法26-45
• 1. 实验材料26
• 2. 主要试剂26
• 3. 主要仪器26-27
• 4. 足细胞特异RANK基因敲除鼠的培育及鉴定27-30
• 5. 脂多糖诱导的短暂蛋白尿小鼠动物模型的建立30-31
• 6. 尿蛋白的测定31-34
• 7. 肾脏病理分析及足细胞计数34-37
• 8. 电镜下足细胞足突融合的观察37-38
• 9. 免疫荧光及激光共聚焦38-40
• 10. 蛋白免疫印迹40-44
• 11. 统计学处理44-45
• 结果45-55
• 一、足细胞特异RANK基因敲除小鼠的体质量,肾脏形态、重量与野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠差异无统计学意义45-47
• 二、注射脂多糖(LPS)后,足细胞特异RANK基因敲除小鼠(KO组)蛋白尿较野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠有所减少47-48
• 三、注射脂多糖(LPS)后,三组小鼠肾脏组织病理结果无明显改变,三组小鼠足细胞数目均有所下降,但KO组足细胞数目较其余两对照组下降得更少48-50
• 四、电镜下足细胞特异RANK基因敲除小鼠的足细胞足突融合较野生型对照组(WT)小鼠及普通C57小鼠有所减少50-51
• 五、脂多糖(LPS)诱导的小鼠短暂蛋白尿模型中,三组小鼠肾脏组织中RANK、Integrin-β1、integrin-β3表达的影响51-55
• 讨论55-61
• 结论61-63
• 参考文献63-66
• 中英文词表66-67
• 在读硕士期间的成果67-68
• 致谢68-69

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 汤曦;吴青;郑春霞;张明超;曾彩虹;张炯;朱晓东;刘志红;;局灶节段性肾小球硬化患者足细胞钙神经蛋白的表达[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2010年04期

2 李卫国;李宇宁;;足细胞对损伤的反应[J];临床儿科杂志;2012年11期

3 尚懿纯;曹式丽;窦一田;;足细胞参与局灶节段性肾小球硬化的机制研究[J];安徽医科大学学报;2013年01期

4 成彩联;郑振达;石成钢;刘迅;叶增纯;娄探奇;;晚期糖基化终产物对足细胞整合素连接激酶的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2013年09期

5 成彩联;郑振达;石成钢;叶增纯;刘迅;娄探奇;;晚期糖基化终产物对足细胞内肾素-血管紧张素系统的影响[J];第三军医大学学报;2013年17期

6 康林;杨巧芳;沈敬华;;足细胞在肾小球疾病中的认识进展[J];中国医药科学;2013年23期

7 赵向娅;冯晓蓓;王朝晖;王伟铭;潘晓霞;李晓;任红;陈楠;;尿足细胞及其相关分子在肾小球疾病中的表达[J];中国中西医结合肾病杂志;2009年06期

8 戴厚永;汤日宁;郑敏;倪杰;马坤岭;刘必成;;结缔组织生长因子在高糖诱导的足细胞上皮间充质转化中的作用[J];中国病理生理杂志;2011年12期

9 郑春霞;刘志红;;足细胞与机体免疫系统[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2012年04期

10 张迎华;朱晓玲;汤绚丽;;尿液足细胞检测及其临床意义的探讨[J];中国中西医结合肾病杂志;2014年03期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 孙绍军;;足细胞表达的蛋白分子与肾小球损伤[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

2 曹璐;毛建华;姚盛华;王文静;王大燕;;Cullin-5表达下调对足细胞形态及增值功能的初步影响[A];2011年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编[C];2011年

3 赵敬;王颖超;赵宗江;杨美娟;;糖肾平对高糖+LPS刺激足细胞上皮间质转分化的影响[A];第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会论文汇编[C];2013年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 孙煜;神经标志蛋白在足细胞中的表达及其调节作用[D];复旦大学;2013年

2 李艳娇;过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对大鼠足细胞Ⅳ型胶原表达的抑制及作用机制研究[D];山西医科大学;2015年

3 宋志霞;活性维生素D3对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用及其机制研究[D];东南大学;2015年

4 方展;醛固酮对足细胞的损伤机制[D];华中科技大学;2009年

5 孙希锋;TRPC6在足细胞损伤中的作用研究[D];华中科技大学;2009年

6 姜华军;CD2AP在足细胞中的生理功能研究[D];华中科技大学;2008年

7 李明珍;线粒体氧化应激与实验性糖尿病肾病足细胞的损伤[D];天津医科大学;2008年

8 刘海梅;地塞米松改善足细胞细胞骨架损伤的分子机制研究[D];复旦大学;2010年

9 陈廷芳;整合素连接激酶在早期糖尿病肾病足细胞转分化中的作用及大黄素对其的干预[D];苏州大学;2015年

10 梁伟;Nephrin在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞表型改变中的作用及机制[D];武汉大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 方超;益气养阴消ve通络中药对高糖培养足细胞裂孔膈膜蛋白的影响[D];河北医科大学;2015年

2 郑婷娜;藕节对高糖环境下足细胞的保护作用及机制研究[D];山西医科大学;2016年

3 丁海华;小檗碱对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对足细胞PI3K/Akt通路的影响[D];安徽医科大学;2016年

4 陈晓雯;基于RNAKL/RANK介导NF-κB及MAPK通路研究二环丙化去氢木香烃内酯保护高糖诱导足细胞的机制[D];南方医科大学;2016年

5 左洋洋;氧化低密度脂蛋白通过PTEN/SR-A途径诱导足细胞损伤[D];南方医科大学;2016年

6 徐玄羽;小鼠足细胞特异敲除核因子-κB受体活化因子对蛋白尿的影响[D];南方医科大学;2016年

7 彭睿;miR-30a下调NFATc3抑制足细胞上皮间质转化的研究[D];重庆医科大学;2016年

8 梁斌;促肾上腺皮质激素与转化生长因子β1对足细胞表型的影响[D];苏州大学;2012年

9 黄凤娟;胰淀素对足细胞的损伤及机制研究[D];郑州大学;2014年

10 于雪馨;鼠输尿管梗阻后肾脏足细胞转化的研究[D];中国医科大学;2008年

，

本文编号：662778