膀胱肿瘤检测微流控芯片的设计与制备

发布时间：2017-08-17 22:25

  本文关键词：膀胱肿瘤检测微流控芯片的设计与制备

  更多相关文章： 微流控芯片 膀胱癌细胞 早期诊断

【摘要】：膀胱癌是发生在膀胱粘膜上的恶性肿瘤,是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,其发病率和致死率较高。而目前临床的技术手段对于膀胱癌的诊断和检测有诸多缺点和不足,例如检测过程有创伤,且敏感性特异性不高。为了更便捷准确地检测出膀胱癌,本文设计并制备出一种新型的用于膀胱癌早期检测的微流控芯片。本研究选取PDMS (polydimethylsiloxane)作为芯片材料,采用模塑法制作芯片；采用三步离心的方式从患者尿液样品中收集膀胱肿瘤细胞,并经过特异抗体的免疫组织化学染色对其进行鉴定；使用硅烷化修饰在玻片上固定特异性抗体,在芯片通过与细胞尺寸相符合的圆柱形阵列结构和细胞抓捕室采用抗原抗体免疫吸附反应进行细胞抓捕与鉴定,调整灌流速度和抓捕条件,通过显微镜观察实验结果。结果显示,在本研究搭建的微流控芯片中,特异性抗体可以成功固定在玻片表面并保存,通过荧光强度反映不同条件下玻片固定荧光抗体的能力,探究得到在硅烷化时间为5 min,抗体孵育时间2 h时,特异性抗体固定效果最好。从尿液样品中提取膀胱癌细胞后,采用特异性抗体Anti-CD15对其进行鉴定实验,免疫组化反应后,部分细胞特异性被荧光标记。芯片内膀胱癌细胞抓捕与鉴定实验显示微流控芯片特异性抓捕到的细胞均被荧光标记,显示微流控芯片特异地捕获到了样品中的膀胱癌细胞。以上结果证明本研究成功设计并制备了可用于膀胱肿瘤检测和诊断的微流控芯片系统,在此基础上成功探究出微流控芯片底部固定特异性抗体的最适宜条件,并以病人尿液为样品,特异性提取鉴定出样品中的膀胱癌细胞,为膀胱癌的早期检测和诊断提供了有力的平台。
【关键词】：微流控芯片 膀胱癌细胞 早期诊断
【学位授予单位】：大连理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TN492;R737.14
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1 绪论8-21
• 1.1 研究背景及意义8-9
• 1.2 微流控芯片上的肿瘤细胞检测概述9-17
• 1.2.1 微流控芯片的材料和制备方式9-10
• 1.2.2 微流控芯片上的肿瘤细胞捕获10-11
• 1.2.3 气动微阀驱动11-13
• 1.2.4 不同种类肿瘤细胞的检测方法13-17
• 1.3 国内外研究现状17-20
• 1.4 本章小结20-21
• 2 膀胱癌检测的微流控芯片系统的搭建21-33
• 2.1 引言21
• 2.2 芯片结构21-27
• 2.2.1 芯片设计方案21-22
• 2.2.2 流体通道结构22-25
• 2.2.3 微流体控制25-26
• 2.2.4 双层芯片结构26-27
• 2.3 微流控芯片的制作27-30
• 2.4 实验结果30-31
• 2.5 讨论31-32
• 2.6 本章小结32-33
• 3 膀胱癌检测微流控芯片的功能实现33-43
• 3.1 引言33
• 3.2 材料与方法33-37
• 3.2.1 材料33-34
• 3.2.2 方法34-37
• 3.3 实验结果37-40
• 3.3.1 抗体包被与固定37-38
• 3.3.2 膀胱癌细胞的提取与鉴定38-39
• 3.3.3 芯片内膀胱癌细胞的抓捕与鉴定39-40
• 3.4 讨论40-42
• 3.5 本章小结42-43
• 结论43-44
• 参考文献44-47
• 攻读硕士学位期间发表学术论文情况47-48
• 致谢48-49

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