Rock蛋白抑制剂法舒地尔对前列腺癌PC3、DU145细胞侵袭、迁移和凋亡的影响

发布时间：2017-08-25 20:35

  本文关键词：Rock蛋白抑制剂法舒地尔对前列腺癌PC3、DU145细胞侵袭、迁移和凋亡的影响

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【摘要】：目的:探讨Rho A/Rock信号传导通路在前列腺癌形成过程中的可能作用;研究Rock蛋白抑制剂法舒地尔潜在抗肿瘤侵袭、迁移和促凋亡的作用。方法:分别用5、10、20、40、80、160μmol/L浓度的法舒地尔作用于前列腺癌PC3、DU145细胞24 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,并计算其IC50,取法舒地尔IC50的1/4作为给药剂量用于进一步研究。免疫细胞化学法检测法舒地尔对PC3、DU145细胞Rho A、RockⅠ、RockⅡ蛋白表达的影响;Western印迹检测法舒地尔对PC3、DU145细胞Rho A总蛋白、Rho A膜蛋白、RockⅠ、RockⅡ蛋白表达的影响;通过Transwell、划痕实验、流式细胞术评估细胞的侵袭、迁移、凋亡情况。结果:随着法舒地尔作用浓度的增加,对PC3、DU145的抑制率分别从(9.29±1.23)%、(7.59±1.54)%增加到(81.37±3.97)%、(76.53±2.67)%,呈一定剂量依赖性(P均0.05);细胞迁移实验中实验组穿入下室的PC3、DU145细胞为(39.2±8.4)个和(34.2±6.7)个,阴性对照组分别为(116.8±9.3)和(112.5±10.8)个,差异有统计学意义(P均0.05);划痕实验结果显示实验组PC3、DU145细胞24 h划痕愈合率为(37.26±1.17)%和(32.38±2.73)%,阴性对照组愈合率为(78.12±4.16)%和(69.47±6.71)%(P均0.05);Annexin V-FITC/PI双染色法的结果显示,法舒地尔作用PC3、DU145细胞后凋亡率分别为(31.88±2.49)%、(28.65±2.99)%,显著高于阴性对照组[(7.51±2.28)%、(7.13±1.61)%,P均0.05]。免疫细胞化学检测显示,法舒地尔能明显降低RockⅠ和RockⅡ的表达(与阴性对照组比较P均0.05),而Rho A的表达与阴性对照组比较差异无统计学意义(P0.05);Western印迹也显示,法舒地尔也明显降低Rho A膜蛋白、RockⅠ、RockⅡ蛋白的表达(与阴性对照组比较P均0.05),而Rho A总蛋白表达与阴性对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论:Rho A/Rock信号传导途径可能参与了前列腺癌的形成;法舒地尔能够有效地抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移,并促进其凋亡,其机制可能与法舒地尔下调Rho A/Rock信号通路有关。
【作者单位】： 南京大学医学院附属鼓楼医院男科;
【关键词】： 前列腺癌 RhoA/Rock通路 法舒地尔 侵袭 凋亡 PC DU
【基金】：南京市医学科技发展项目(YKK14078)~~
【分类号】：R737.25
【正文快照】： Effects of the Rho-kinase inhibitor fasudil on the invasion,migration,and apoptosisof human prostate cancer PC3 and DU145 cellsGAO Qing-qiang,CHEN Hai,CHEN Yun,XU Zhi-peng,ZHU Lei-lei,YU Wen,HAN You-feng,DAI Yu-tianDepartment of Andrology,Drum Tower Hosp

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本文编号：738167