Angiopoietin-1联用L-mimosine对糖尿病大鼠肾脏缺氧及相关因子的影响

发布时间：2017-09-23 20:00

  本文关键词：Angiopoietin-1联用L-mimosine对糖尿病大鼠肾脏缺氧及相关因子的影响

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【摘要】：背景和目的:糖尿病肾脏存在慢性缺氧和异常的血管生成,且与血管生成调控因子失衡相关。前期实验已证实Angiopoietin-1(Ang-1)可改善糖尿病肾脏血管生成调控因子异常表达,一定程度上缓解糖尿病肾脏微血管病变。本课题通过Ang-1联用低氧诱导因子(HIF)降解抑制剂(L-mimosine,L-mim),探讨其对糖尿病肾脏缺氧及相关因子表达的影响。方法:构建Ang-1腺病毒表达载体(Ad-Ang-1)。使用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导构建SD大鼠糖尿病模型。设正常对照组(N组)、糖尿病组(D组)、Ang-1+L-mim治疗组(AL组)及空白载体组(K组)。AL组于糖尿病成模8周后经阴茎静脉给予Ad-Ang-1(3×108 pfu/只),并隔日腹腔注射L-mim(50mg/kg);于12周、16周后采血观察血糖、尿素、肌酐以及24小时尿蛋白变化;处死大鼠前1.5h静脉注射缺氧探针(Hypoxyprobe?-1),取肾脏组织,免疫组化观察缺氧情况,免疫组化/荧光、免疫印迹(western bloting)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测Ang-1、血管内皮生长因子(VEGF)、HIF-1α、血红素加氧酶-1(HO-1)表达变化。结果:1.三个糖尿病模型组血糖、24小时尿蛋白均明显高于N组(P0.01),且AL组24小时尿蛋白低于D组、K组(P0.05)。2.肾脏病理显示三个糖尿病模型组可见不同程度肾小球增大、系膜基质增多、细胞数增多、肾小管扩张,部分球囊扩张、肾小管上皮细胞颗粒和空泡变性等,AL组病理改变相对减轻。3.肾组织缺氧探针免疫组化显示12周三个糖尿病模型组肾脏阳性着染面积较N组明显增大(P0.01),AL组阳性着染面积较D组、K组明显减小(P0.01),且AL组16周阳性着染面积小于12周(P0.05)。4.免疫组化/荧光及蛋白印迹显示:1Ang-1突出表达于肾小球及肾脏小血管,三个糖尿病模型组肾组织Ang-1明显上调(P0.05),其中AL组16周时上调显著高于D组和K组(P0.01);2VEGF突出表达于肾小管上皮细胞,三个糖尿病模型组肾组织VEGF显著上调(P0.01),其中AL组上调明显高于D组和K组(P0.05);3HIF-1α主要表达于肾小管上皮细胞,三个糖尿病模型组肾组织HIF-1α均显著上调(P0.01),16周时D组和K组较12周时明显下调(P0.05)且显著低于AL组(P0.01);4HO-1主要表达于肾小管上皮细胞,三个糖尿病模型组肾组织HO-1明显上调(P0.05),其中AL组上调明显高于D组和K组(P0.05)。5.RT-PCR结果显示:1三个糖尿病模型组肾组织Ang-1m RNA表达上调,但仅AL组显著高于N组(P0.05),且16周时明显下调(P0.05);2三个糖尿病模型组12周时肾组织VEGFm RNA表达上调,但仅AL组显著高于N组(P0.05),16周时表达均下调,但均无显著统计学意义(P0.05);3三个糖尿病模型组肾组织HIF-1αm RNA表达上调,但仅AL组显著高于N组(P0.05),且16周时仍高于D组、K组(P0.05);4三个糖尿病模型组肾组织HO-1m RNA表达均较N组上调,但仅16周时AL组显著高于N组和D、K组(P0.05)。6.相关分析显示:VEGF与Ang-1、HIF-1α表达水平呈正相关(r=0.868、0.735,P0.05),三者表达水平与缺氧探针阳性着染程度呈负相关(r=-0.928、-0.956、-0.751,P0.05)。结论:1.Ang-1和L-mim联用可改善糖尿病大鼠肾脏缺氧状况。2.Ang-1和L-mim联用可上调HIF-1α、VEGF、HO-1等缺氧相关因子的表达,并且与改善糖尿病鼠肾缺氧相关。
【关键词】：糖尿病肾脏疾病 缺氧 血管生成 促血管生成素-1 L-mimosine
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R692.9
【目录】：

• 中英文缩略词对照表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-21
• 结果21-45
• 讨论45-49
• 结论49-50
• 参考文献50-53
• 综述53-60
• 参考文献（综述）58-60
• 致谢60-61
• 作者简介61

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：907162