UBE2C基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制

发布时间：2017-10-06 02:01

  本文关键词：UBE2C基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制

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【摘要】：目的探讨人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力的影响及作用机制。方法将对数生长期的膀胱癌5637细胞随机分为5组,其中UBE2C siRNA1、2、3组及阴性对照组分别采用瞬时转染法转染3条UBE2C小干扰RNA(UBE2C siRNA1、2、3)和阴性对照-siRNA,空白对照组不进行转染。采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组UBE2C mRNA及蛋白相对表达量,UBE2C siRNA1、2、3组细胞UBE2C mRNA及蛋白相对表达量均低于阴性对照组、空白对照组,UBE2C siRNA2组明显低于UBE2C siRNA1、3组(P均0.05);证实UBE2C siRNA2组沉默效果最好。收集UBE2C siRNA2组和阴性对照组、空白对照组细胞,采用MTT法检测培养0、24、48、72、96 h的细胞增殖能力(以OD490表示),Transwell侵袭实验检测侵袭能力(以穿过小室膜的细胞数表示),Western blotting法检测细胞外调节蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相对表达量。结果随着培养时间的延长,UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组OD490呈升高趋势;UBE2C siRNA2组培养48、72、96 h的OD490均明显低于阴性对照组和空白对照组(P均0.01)。UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组穿过小室膜的细胞数分别为(58.3±2.2)、(129.3±3.1)、(162.7±5.1)个,组间两两比较P均0.01。三组细胞Akt蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均0.05),UBE2C siRNA2组p-Akt蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白对照组(P均0.01)。结论 UBE2C基因沉默后膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力降低,抑制Akt信号转导通路可能是其作用机制。
【作者单位】： 郑州大学第一附属医院;
【关键词】： 膀胱癌 人类泛素偶联酶EC 细胞增殖 侵袭 细胞外调节蛋白激酶B
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81272823) 河南省教育厅科技创新团队支持计划(14IRTSTHN020)
【分类号】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌具有多发、高复发性的特点,复发后的恶性程度较首发时更高。人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)属于泛素-蛋白酶体通路(UPP)中的E2酶家族。UPP家族由泛素激活酶、泛素偶联酶、泛素连接酶等组成[1],可引起真核生物细胞内蛋白的降解[2],对调控细胞周期、细胞程序性死亡、转录及肿瘤

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