高效液相色谱—质谱串联法检测唾液游离皮质醇在库欣综合征诊断中的应用

发布时间：2017-10-12 22:12

  本文关键词：高效液相色谱—质谱串联法检测唾液游离皮质醇在库欣综合征诊断中的应用

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【摘要】：目的:库欣综合征(Cushing syndrome,CS)是多种病因导致的下丘脑-垂体-肾上腺轴异常,肾上腺皮质长期过量分泌皮质醇的一类疾病。其诊断主要依靠现有实验室技术对血液、尿液中皮质醇含量的检测,然而目前的检测方法均存在不可避免的影响因素。血清中的大部分的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白(corticosteroid-binding globulin,CBG)、白蛋白结合,游离皮质醇仅占3%~5%,因此血清皮质醇的测定受肝功能、妊娠等因素影响较大;24小时尿液游离皮质醇在标本的采集过程中尿液的收集、计量往往十分困难。与这两者不同的唾液皮质醇(salivary cortisol,SC)主要以游离皮质醇形式存在,70%比例平行于血清游离皮质醇,且具有提取方法简便,标本易获得等优点。为方便患者减轻检查痛苦,国内外近年来均有关于检测唾液皮质醇的研究[2]。方法:连续收集2015年10月至11月北京协和医院收治的库欣综合征患者的唾液标本以及病历资料,同时设立正常人对照组。应用组学技术处理样本,进一步用高效液相色谱-质谱串联法对唾液中皮质醇含量进行测定。数据采用IBM SPSS Statistics 20.0软件进行统计学分析,对比唾液皮质醇与血清总皮质醇测定方法结果的差异。结果:本研究共纳入35例库欣综合征患者,以及32例正常人对照。(1)建立了可靠有效的唾液皮质醇提取方法。(2)建立了唾液皮质醇外标法及内标法质谱检测方法。(3)正常人唾液皮质醇节律存在昼高夜低现象(4)库欣综合征患者唾液皮质醇昼夜节律消失。(5)库欣综合征患者血清总皮质醇、唾液皮质醇昼夜差异匹配。结论:唾液皮质醇激素测定是一种可行、有效的化验诊断技术。HPLC-MS可以实现1~100ng/ml皮质醇含量范围的测定,具有较好的可操作性。因库欣综合征目前在国内发病率较低,本研究涉及的病例数有限,为完善方法的可重复性,应进一步扩大样本量,为实现唾液皮质醇检测的临床应用奠定基础。
【关键词】：高效液相色谱-质谱串联法 唾液游离皮质醇 库欣综合征 诊断
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R586
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 第1章 引言10-11
• 第2章 综述11-15
• 第3章 材料与方法15-19
• 3.1 临床资料15-16
• 3.1.1 一般资料15
• 3.1.2 入选标准15
• 3.1.3 排除标准15
• 3.1.4 统计方法15-16
• 3.2 唾液标本的制备方法16-19
• 3.2.1 唾液采集16
• 3.2.2 唾液工作样本制备16
• 3.2.3 液相色谱条件16-17
• 3.2.4 质谱条件17
• 3.2.5 标准曲线17-18
• 3.2.6 数据处理分析18-19
• 第4章 结果19-31
• 4.1 受试者一般情况及地塞米松抑制试验中血尿皮质醇对库欣综合征诊断价值的比较19-22
• 4.2 外标法结果22-28
• 4.2.1 国产氢化可的松标准曲线22-26
• 4.2.2 氘标皮质醇标准曲线26-27
• 4.2.3 外标法测定结果汇总27-28
• 4.3 内标法结果汇总28-30
• 4.4 其他结果30-31
• 第5章 讨论31-36
• 5.1 受试者年龄分布、地塞米松抑制试验中血尿皮质醇对库欣综合征诊断价值的比较31-33
• 5.2 提取唾液类固醇方法33-35
• 5.2.1 唾液采集方法选择33
• 5.2.2 试剂选择33-34
• 5.2.3 HPLC－MS设备、条件34-35
• 5.3 本研究的局限性、创新性35-36
• 第6章 结论36-37
• 参考文献37-40
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果40-41
• 致谢41

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本文编号：1021197