经尿道灌注干细胞白血病基因慢病毒转染豚鼠糖尿病膀胱病变的效果研究

发布时间：2017-10-19 19:21

  本文关键词：经尿道灌注干细胞白血病基因慢病毒转染豚鼠糖尿病膀胱病变的效果研究

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【摘要】：目的制备糖尿病膀胱病变(DCP)豚鼠模型,经尿道灌注干细胞白血病(SCL)基因慢病毒,观察其转染效果及稳定性。方法 2014年11月—2015年6月,采用随机数字表法在75只普通级荷兰种雄性豚鼠中选取60只单次腹腔注射链脲佐菌素(200 mg/kg),常规饲养6周后按血糖水平11.1 mmol/L筛选糖尿病模型,再常规饲养4周后通过尿流动力学检测仪筛选DCP模型;另15只作为对照组,单次注射配制的链脲佐菌素缓冲液,饲养时间相同。采用随机数字表法从成功造模的DCP模型中选取15只后,再采用随机数字表法分为Ⅰ组(3只)和实验组(12只),Ⅰ组不予处理,实验组经尿道分2次灌注SCL基因慢病毒(1.6×10~7TU),于2次灌注结束后第2、7、14、28天分别采用颈椎脱臼法处死实验组豚鼠3只,记为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,Ⅰ组与Ⅱ组一同处死,取膀胱组织冷冻于液氮中,甘油封固后激光共聚焦显微镜下观察组织中绿色荧光分布情况。采用qRT-PCR检测SCL mRNA表达水平。结果 DCP模型造模过程中,糖尿病模型筛选时弃去18只,尿流动力学检测仪筛选时弃去19只,最终得到DCP模型豚鼠23只,记为DCP模型组。DCP模型组豚鼠最大逼尿肌压低于对照组,最大膀胱容量大于对照组(P0.01)。Ⅰ组豚鼠膀胱组织未见绿色荧光分布,Ⅱ组豚鼠膀胱组织绿色荧光不明显,Ⅲ组豚鼠膀胱组织可见全层遍布极强绿色荧光,Ⅳ组豚鼠膀胱组织可见全层强绿色荧光,Ⅴ组豚鼠膀胱组织仍可见绿色荧光存在。Ⅰ组豚鼠膀胱组织SCL mRNA表达水平为(1.00±0.00),Ⅱ组豚鼠膀胱组织SCL mRNA表达水平是Ⅰ组的(1.22±0.06)倍,Ⅲ组豚鼠膀胱组织SCL mRNA表达水平是Ⅰ组的(50.45±3.17)倍,Ⅳ组豚鼠膀胱组织SCL mRNA表达水平是Ⅰ组的(24.75±6.49)倍,Ⅴ组豚鼠膀胱组织SCL mRNA表达水平是Ⅰ组的(3.27±1.00)倍。结论 SCL基因慢病毒载体转染豚鼠DCP膀胱成功,并能稳定表达,有可能为DCP的临床治疗带来新的研究方式。
【作者单位】： 河南省南阳市第二人民医院小儿外科;石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科;
【关键词】： 糖尿病并发症 膀胱疾病 慢病毒感染 干细胞白血病
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81360120)
【分类号】：R587.2;R694
【正文快照】： Effect of SCL Lentivirus Transfection Through Perfusing Diabetic Cystopathy of Bladder in Guinea Pig Models WEIYan-qing,MA Lu-ping,WANG Jiang-ping,QIAN Biao,WANG Qin-zhang.Department of Pediatric Surgery,NanyangSecond People's Hospital,Nanyang 473000,Chi

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本文编号：1062868