大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析

发布时间：2017-10-23 12:17

  本文关键词：大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析

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【摘要】：旨在构建大鼠NKx6.1启动子的报告载体,验证转录因子T3R对NKx6.1启动子的调控活性。用PCR扩增大鼠脑组织NKx6.1的5'上游启动子片段2.4 kb,应用生物信息学方法预测该片段上潜在的转录因子T3R结合位点,根据不同的结合位点作系列截短,获得3段长度不等的启动子缺失片段,分别克隆到荧光素酶报告基因表达质粒(p GL3-Basic)上,构建相应的报告载体。将报告载体和T3R共转染大鼠星形胶质细胞(rat astrocytes,RA),并检测报告基因荧光素酶的活性。结果显示,成功构建大鼠NKx6.1启动子报告载体,双荧光素酶报告基因活性检测表明T3R对NKx6.1启动子有明显调控作用,其中-1 887 bp-1 507 bp活性最高,即存在关键顺式调控元件。克隆并筛选出启动子核心区域,揭示了甲状腺激素对大鼠NKx6.1的表达调控机制。
【作者单位】： 天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室;
【关键词】： 同源盒基因NKx. 甲状腺激素 双荧光素酶报告检测 启动子活性
【分类号】：R591.1;Q78
【正文快照】： 碘缺乏病(iodine deficiency disorders,IDD)的最大危害是导致不同程度的脑发育障碍,其具体的分子作用机制仍是当前的主要研究方向。同源盒基因Nkx6.1作为一种反式作用因子,与神经系统的分化与发育关系极为密切,对于甲状腺特异基因的表达有重要的作用[1]。Nkx6.1在胚胎期可影

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1 况守龙;胡廷章;;启动子的克隆和研究方法[J];重庆工学院学报(自然科学版);2007年01期

2 李志新;曹双河;张相岐;张怀刚;;伪鹅观草高分子量麦谷蛋白基因启动子的克隆[J];长江大学学报(自科版)农学卷;2007年02期

3 高刚;鲁艳芹;韩金祥;赵丽;;双启动子对增强型绿色荧光蛋白表达的影响[J];中国生物制品学杂志;2009年10期

4 郝迪，

本文编号：1083360