类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T细胞水平检测

发布时间：2017-11-01 23:29

  本文关键词：类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T细胞水平检测

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【摘要】：目的:检测外周血滤泡辅助性T细胞(follicular T helper cells,Tfh cells)的比例及其表面标志,分析与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者疾病活动度的关系。方法:收集40例类风湿关节炎患者及20例正常对照组的外周血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)及血清,流式细胞术检测PBMC中CD4~+CXCR5~+Tfh细胞(CXCR5,趋化因子受体,C-X-C chemokine receptor type 5)的比例及其表面程序性细胞死亡1(programmed death-1,PD-1)、可诱导的协同刺激性因子(inducible co-stimulator,ICOS)、CD40配体(CD40ligand,CD40L)及白介素21受体(interleukin-21 receptor,IL-21R)的表达情况,实时荧光定量PCR方法检测B细胞淋巴瘤-6(B-cell lymphoma 6,Bcl-6)、白介素-21(interleukin-21,IL-21)及IL-21R的表达,酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中IL-21和B细胞趋化因子CXC配体13(B cell-attracting chemokine CXC ligand 13,CXCL13)水平。结果:(1)流式细胞术结果提示,与正常对照组比较,RA患者组外周血CXCR5~+CD4~+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高(16.75±3.92 vs.7.49±1.84,P0.001);低疾病活动度或缓解组RA外周血CXCR5~+CD4~+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高(16.62±3.43 vs.7.49±1.84,P0.001);中疾病活动度组RA外周血CXCR5~+CD4~+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高(16.82±3.07 vs.7.49±1.84,P0.001);高疾病活动度组RA外周血CXCR5~+CD4~+Tfh细胞表达与正常对照组相比明显升高(16.87±5.50 vs.7.49±1.84,P0.001);RA患者外周血ICOS、PD-1、IL-21R在CD4~+CXCR5~+细胞的表达与正常对照组相比显著升高(ICOS~+CXCR5~+CD4~+细胞,8.37±4.28 vs.3.72±1.81,P0.001;PD-1~+CXCR5~+CD4~+细胞,1.57±1.10 vs.0.24±0.30,P=0.035;IL-21R~+CXCR5~+CD4~+细胞,4.60±4.05 vs.0.20±0.19,P=0.006),而CD40L在CD4~+CXCR5~+细胞的表达在两组间差异无统计学意义(3.38±3.71 vs.0.54±0.34,P=0.135)。(2)RA患者组较正常对照组外周血中IL-21R mRNA升高(5.00±4.94 vs.0.74±0.55,P0.001),而转录因子Bcl-6 mRNA[4.54(3.33,7.23)vs.5.31(2.81,7.44),P=0.329]以及IL-21 mRNA[0.72(0.26,3.45)vs.0.56(0.27,3.71)P=0.195]表达差异无统计学意义(P0.05);Bcl-6、IL-21和IL-21R mRNA的表达在不同组RA患者之间差异也无统计学意义(P0.05)。(3)RA患者血清中IL-21、CXCL13水平明显高于正常对照组[IL-21,(200.49±154.56)ng/L vs.(8.21±5.95)ng/L,P0.001;CXCL13,(43.09±1.28)ng/L vs.(93.72±49.72)ng/L,P0.001];相关分析显示IL-21、CXCL13浓度与RA疾病活动度正相关(r0.4),而血清类风湿因子(rheumatoid factor,RF)和抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-citrullinated protein antibody,anti-CCP)与RA疾病活动度无相关性(r0.2)。结论:外周血Tfh细胞及其相关细胞因子在RA患者中显著升高,说明Tfh细胞可能参与RA的发病机制,阻断Tfh细胞的产生,有望成为治疗RA患者的新的作用靶点。
【作者单位】： 北京大学第一医院风湿免疫科;
【关键词】： 关节炎 类风湿 T淋巴细胞 辅助诱导 细胞因子类 受体 CXCR 白细胞介素
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划,2010CB529103)资助~~
【分类号】：R593.22
【正文快照】： blood mononuclear cells and sera were collected.The expressions of CD4+CXCR5+Tfh cells(CXCR5,C-X-C chemokine receptor type 5)and inducible T cell costimulator(ICOS),programmed death 1 posi-tive(PD-1),interleukin-21 receptor(IL-21R)and CD40 ligand(CD40L)p

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