凋亡信号调节激酶1通过c-Jun氨基末端激酶通路调控高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤

发布时间：2017-11-26 10:12

  本文关键词：凋亡信号调节激酶1通过c-Jun氨基末端激酶通路调控高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤

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【摘要】：目的研究细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase1,ASK1)对高糖诱导的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)损伤的保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠RGC细胞的分离培养和体外高糖(50 mmol/L葡萄糖)损伤模型。转染ASK1 siRNA沉默ASK1的表达。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASK1 mRNA表达水平;Western blot检测ASK1、JNK蛋白表达量和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平;MTT和CCK-8方法、Ki67染色分别检测RGC生长活力和增殖情况;Annexin-V FITC/PI方法和TUNEL检测RGC凋亡情况;试剂盒方法检测Caspase-3活性。结果 RGC高糖环境下培养4d,细胞生长活力降低明显(P0.05);ASK1表达水平在高糖损伤的RGC中明显上升(P0.05);ASK1 siRNA的转染实验结果显示:ASK1的表达水平明显下降(P0.05),说明沉默表达实验成功;ASK1表达被抑制后RGC的生长活力(P0.05)和增殖能力(P0.05)明显上升,RGC的凋亡(P0.01)和Caspase-3的活力(P0.01)明显降低。沉默ASK1的表达有效地降低JNK蛋白的磷酸化水平。结论抑制ASK1的表达对RGC的高糖损伤有保护作用,其机制可能与抑制JNK通路有关。
【作者单位】： 西安市第四医院眼科 陕西省眼科诊疗中心;
【分类号】：R587.2;R774.1
【正文快照】： 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是引起视力损伤和失明的主要因素,而糖尿病被认为是引起DR的主要致病因素,这与引起的视网膜氧化应激导致的细胞凋亡有关[1]。作为糖尿病的最主要并发症,目前尚没有非常有效的治疗方法。虽然对DR发病机制的研究主要集中于视网膜毛细

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