骨桥蛋白（OPN）及其整合素受体αvβ3在糖尿病合并高度近视豚鼠视网膜中的表达研究

发布时间：2017-12-03 03:05

  本文关键词：骨桥蛋白（OPN）及其整合素受体αvβ3在糖尿病合并高度近视豚鼠视网膜中的表达研究

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【摘要】：目的:本项研究探讨高度近视对糖尿病视网膜病变中骨桥蛋白(OPN)及整合素αvβ3受体的表达水平的影响,以推断高度近视对糖尿病视网膜病变的影响机制,及其临床应用的意义。通过建立糖尿病合并形觉剥夺性高度近视豚鼠模型,利用免疫组织化学染色法对视网膜组织中骨桥蛋白(OPN)及整合素αvβ3受体的表达情况进行检测。方法:建立四组豚鼠模型,分别为正常对照组、高度近视组、糖尿病组、糖尿病合并高度近视组。选取出生1周龄英国种健康单色豚鼠50只,雌雄不限,排除眼部疾病和先天性屈光不正个体。数字表法随机分为4组,正常对照组8只,余三组每组14只,严格按照实验豚鼠饲养条件适应性喂养一周后开始造模。Ⅰ组为正常对照组,常规饲养20周,第8周时左下腹腔注射空白柠檬酸缓冲液;Ⅱ组为形觉剥夺性高度近视组,采用无创遮盖法遮盖右眼20周诱导形觉剥夺性近视,第8周时左下腹腔等量注射空白柠檬酸缓冲液;Ⅲ组为糖尿病组,饲养8周时空腹24h后左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ)280 mg/kg诱发糖尿病;Ⅳ组为形觉剥脱性高度近视合并糖尿病组,采用无创遮盖法遮盖右眼20周诱导形觉剥夺性近视,第8周时空腹24h后左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ)280 mg/kg诱发糖尿病。Ⅱ组和Ⅳ组以带状光检影屈光度≥-6.00D为形觉剥夺性高度近视成模标准,Ⅲ和Ⅳ组耳缘静脉采血,测空腹血糖≥16.5mmol/L为糖尿病成模标准,血糖未达标准,按180mg/kg补充剂量注射。继续观察喂养至血糖成模后12周,弃去未达成模标准及死亡豚鼠。每组随机选择8只作为实验研究对象。灌注法摘取豚鼠眼球标本,制作石蜡切片分别进行HE染色、免疫组化染色,光镜下观察视网膜组织细胞形态,计数OPN和整合素αvβ3阳性染色细胞比率,最后收集所有数据进行统计学分析。结果:1.无糖尿病组(Ⅰ组、Ⅱ组)体重水平明显较有糖尿病组(Ⅲ组、Ⅳ组)体重高,且差异有统计学意义(P0.05)。无糖尿病组(Ⅰ组、Ⅱ组)空腹血糖水平明显较有糖尿病组(Ⅲ组、Ⅳ组)空腹血糖低,且差异有统计学意义(P0.05)。2.无近视组(Ⅰ组、Ⅲ组)眼轴长度明显较有近视组(Ⅱ组、Ⅳ组)短,且差异有统计学意义(P0.05)。无近视组(Ⅰ组、Ⅲ组)明显较有近视组(Ⅱ组、Ⅳ组)低,且差异有统计学意义(P0.05)。3.免疫组化染色观察OPN及其整合素受体αvβ3呈胞浆表达,染色呈棕黄色颗粒,主要位于内核层、内丛状层、神经节细胞层,有糖尿病组(Ⅲ组、Ⅳ组)骨桥蛋白和整合素αvβ3表达明显高于无糖尿病组(Ⅰ组、Ⅱ组),且差异有统计学意义(P0.05)。其中Ⅲ组的OPN阳性表达率高于Ⅳ组,且差异有统计学意义(P0.05)。Ⅲ组的整合素αvβ3阳性表达率略高于Ⅳ组,差异无统计学意义(P0.05)4.HE染色观察各组视网膜组织形态,Ⅰ组视网膜组织细胞数目、形态、排列、及厚度均正常,Ⅱ组巩膜、视网膜厚度变薄,胞间隙扩大,Ⅲ组视网膜细胞层变薄,视网膜神经节细胞层排列不规则,细胞变形,胞间隙增大,部分细胞变性坏死,视网膜组织出现断裂。Ⅳ组视网膜变薄,神经节细胞层排列不规则,细胞变形,视网膜组织断裂。结论:1.在糖尿病与糖尿病合并近视时,视网膜结构发生改变,尤其以神经节细胞层变化明显。2.无创面罩遮盖法遮挡8周联合腹腔一次性注射STZ 280mg/kg可以成功建立形觉剥夺性近视合并糖尿病豚鼠模型,其中糖尿病模型接近人类I型糖尿病特点。3.OPN在糖尿病合并高度近视豚鼠视网膜组织中的表达较其在糖尿病模型表达低,形觉剥夺性高度近视有可能通过降低眼内OPN的表达,阻碍糖尿病视网膜病变的发展。4.形觉剥夺性高度近视是糖尿病视网膜病变的保护因素。
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R774.1

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本文编号：1247202