糖尿病机械痛大鼠背根神经节中Nav1.7,Nav1.8和Cav3.2的表达与痛觉变化的关系
本文关键词:糖尿病机械痛大鼠背根神经节中Nav1.7,Nav1.8和Cav3.2的表达与痛觉变化的关系
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【摘要】:目的本研究以背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)中离子通道为切入点,以链脲佐菌素制备的糖尿病机械痛(diabetic mechanical allodynia,DMA)模型大鼠为基础,运用分子生物学方法检测DMA大鼠模型DRGs中电压门控性钠离子通道Nav1.7、Nav1.8和电压依赖性T型钙离子通道Cav3.2随疼痛发生发展的表达变化,研究糖尿病痛性神经病变大鼠背根神经节中钠、钙离子通道表达水平变化及其与痛觉变化的关系。实验旨在揭示糖尿病痛性神经病变发病的分子机理,为临床治疗提供新思路和实验依据。方法(1)使用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,对照组予以相同剂量的柠檬酸缓冲液;(2)分别于造模前及造模后第3d,7d,14d,21d,28d测定大鼠血糖和体重;(3)应用von Frey hairs法测定大鼠机械性后爪回缩阈值的变化,筛选DMA模型大鼠并将造模成功大鼠随机分为四组(7d组、14d组、21d组、28d组);(4)运用Western blot技术检测各DMA模型组及对照组大鼠背根神经节中Nav1.7、Nav1.8蛋白表达变化;(5)分别运用实时定量PCR技术和Western blot技术检测各DMA模型组及对照组大鼠背根神经节中Cav3.2 mRNA和蛋白表达变化。结果(1)糖尿病模型组大鼠造模后3 d血糖水平显著升高(血糖浓度16.7mmol/L),与对照组相比,具有明显的多饮、多食、多尿且体重增长缓慢;(2)造模后7 d,约50%的糖尿病模型大鼠双侧后爪出现明显的机械性触诱发痛(DMA模型大鼠),机械痛阈值较正常对照组明显下降(P0.01),持续降低至21d并维持痛阈低值至28d(P0.01);(3)与对照组相比,DMA模型组大鼠DRGs中Nav1.7蛋白表达水平上调且存在长时程增强的趋势,而Nav1.8蛋白表达水平除7d组上调外其余各组均下调且存在长时程减弱的趋势;(4)DMA模型组大鼠DRGs中Cav3.2mRNA与蛋白质的表达变化基本一致,表现为7d及14d组较对照组显著上调而21d及28d组较对照组无显著差异。结论(1)DMA模型组大鼠DRGs中Nav1.7、Nav1.8、Cav3.2在实验早期表达均上调,并与疼痛相关,提示电压门控性钠离子通道Nav1.7、Nav1.8和电压依赖性T型钙离子通道Cav3.2共同参与了糖尿病大鼠周围神经疼痛的发生。(2)DMA模型组大鼠疼痛发展过程中以电压门控性钠离子通道表达变化为主,表现为Nav1.7持续上调而Nav1.8持续下调,且与疼痛变化明显相关,提示电压门控性钠离子通道Nav1.7、Nav1.8在糖尿病大鼠机械痛敏的维持阶段起重要作用。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R587.2
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