长非编码RNA Gas5在小鼠胰岛beta细胞功能中的作用研究

  本文关键词：长非编码RNA Gas5在小鼠胰岛beta细胞功能中的作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。

《南京医科大学》 2015年

长非编码RNA Gas5在小鼠胰岛beta细胞功能中的作用研究

金飞燕  

【摘要】：目的:胰岛beta细胞特异性定位于胰岛中,是机体内唯一能合成和分泌胰岛素的细胞,胰岛beta细胞根据生物体的需求调节胰岛素的分泌,在机体血糖平衡中发挥着重要作用。胰岛beta细胞功能受损或者是由于beta细胞自身免疫性破坏,从而导致T1DM和T2DM的发生。长非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是一类转录本长度超过200 nt的RNA分子,本身并不编码蛋白。lnc RNA具有很强的组织和细胞表达特异性。同时研究发现lnc RNA参与个体发育、细胞分化、细胞周期等重要生命过程,并与人类的重大疾病密切相关。lnc RNA以RNA的形式在表观遗传、转录、转录后多种层面上调控基因的表达水平。新近研究发现lnc RNA在糖尿病病人胰岛中表达异常,提示lnc RNA可能参与了糖尿病的发生发展过程。但是lnc RNA在糖尿病发生发展中的研究报道较少。生长阻滞特异转录物5(Growth arrest-specific transcript 5,Gas5)位于1号染色体。在体内,Gas5在小鼠发育过程中和成年后的各个组织器官都有所表达。而且Gas5在哺乳动物细胞的生长、分化和发育过程中通过转录水平和转录后水平调控。但是Gas5对机体胰岛细胞的整体功能的调节作用尚未见报道。本研究旨在通过细胞和原代水平两个层面,初步探讨Gas5在小鼠胰岛细胞功能中的作用,进一步丰富和完善胰岛功能的基因调控网络。方法:通过实时定量PCR(real-time RT-PCR)检测Gas5在C57小鼠不同组织及二型糖尿病(diabetic mouse,db/db)雄鼠出现高血糖症状后的表达水平。在细胞\及原代胰岛细胞水平,通过特异性的小RNA干扰实验下调Gas5的表达水平。利用流式细胞术、放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)、免疫印迹(western blot)等技术检测Gas5对细胞周期,凋亡及胰岛素合成和分泌的影响。结果:Gas5在小鼠胰腺中相对高表达,主要定位于胰岛中。db/db小鼠发病后,Gas5在db/db小鼠的胰岛中显著性下调。葡萄糖能调控Gas5的表达。细胞水平下调Gas5后,beta细胞周期阻滞,细胞凋亡没有明显变化,胰岛素的合成和分泌能力下降。Ins2的m RNA水平下降,Pdx-1,Maf A m RNA和蛋白水平显著下降。原代胰岛细胞中下调Gas5后,结果显示,Ins2的m RNA水平下降,Maf A和Pdx-1的m RNA水平出现一致下调。结论:本课题组初步证实了Gas5可以通过影响胰岛素的合成和分泌来维持成年小鼠胰岛功能,在T2DM模型db/db小鼠发病后,Gas5的表达下调揭示Gas5可能参与了T2DM的发病过程,提示lnc RNA未来可作为糖尿病研究的新靶点。

【关键词】：
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：Q455;R587.1
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘静;A Novel Vector for Abundant Expression of Antisense RNA, Triplex forming RNA and Ribozyme in vivo[J];High Technology Letters;2000年04期

2 鲁慧英;Detection of hepatitis C virus RNA sequences in cholangiocarcinomas in Chinese and American patients[J];Chinese Medical Journal;2000年12期

3 梁小兵 ,万国江 ,黄荣贵;Distribution and Variation of Ribonucleic Acid (RNA) and Protein and Its Hydrolysis Products in Lake Sediments[J];Chinese Journal of Geochemistry;2002年02期

4 Verheyden B ,徐其武;口服脊髓灰质炎疫苗核壳和RNA的稳定性[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2002年01期

5 CMBE译文组;探索小RNA的功能[J];现代临床医学生物工程学杂志;2004年03期

6 沈维干;RNA interference and its current application in mammals[J];Chinese Medical Journal;2004年07期

7 孙娣;汪洋;张丽娟;闫玉清;;一种简捷提取植物总RNA的方法[J];黑龙江医药;2005年06期

8 南海波;;小麦总RNA的提取[J];渤海大学学报(自然科学版);2006年01期

9 王冬来;;RNA干扰的成功与困惑[J];中国生物化学与分子生物学报;2008年06期

10 杨静;;试验性的小RNA药物可能引发失明[J];中国生物化学与分子生物学报;2009年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 金由辛;;面向21世纪的RNA研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展（下册）[C];1999年

2 ;第四届RNA全国研讨会大会报告日程安排[A];第四届全国RNA进展研讨会论文集[C];2005年

3 ;Function of Transfer RNA Modifications in Plant Development[A];植物分子生物学与现代农业——全国植物生物学研讨会论文摘要集[C];2010年

4 王峰;张秋平;陈金湘;;棉花总RNA的快速提取方法[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年

5 关力;陈本楙;楊云虹;郭培芝;魏重琴;邱苏吾;苗健;;关于动物組織中RNA測定方法的研究[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编（生物化学）[C];1964年

6 夏海滨;;小RNA在免疫学领域中的应用研究进展[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

7 ;The stability of hepatitis C virus RNA in various handling and storage conditions[A];中国输血协会第四届输血大会论文集[C];2006年

8 郭德银;;RNA干扰在病毒研究和控制中的应用[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年

9 甘仪梅;杨业华;王学奎;曹燕;杨特武;;棉花总RNA快速提取[A];中国棉花学会2007年年会论文汇编[C];2007年

10 ;Identification and characterization of novel interactive partner proteins for PCBP1 that is a RNA-binding protein[A];中国优生优育协会第四届全国学术论文报告会暨基因科学高峰论坛论文专辑[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者 冯卫东;[N];科技日报;2009年

2 记者 储笑抒 通讯员 盛伟;[N];南京日报;2011年

3 泸州医学院副教授、科普作家 周志远;[N];第一财经日报;2014年

4 麦迪信;[N];医药经济报;2003年

5 董映璧;[N];科技日报;2006年

6 张忠霞;[N];新华每日电讯;2007年

7 聂翠蓉;[N];科技日报;2009年

8 冯卫东;[N];科技日报;2010年

9 冯卫东　王小龙;[N];科技日报;2009年

10 记者 常丽君;[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王赵玮;昆虫RNA病毒复制及昆虫抗病毒天然免疫机制研究[D];武汉大学;2014年

2 包纯;一类新非编码RNA的发现以及产生和功能的初探[D];华中师范大学;2015年

3 李语丽;基于MeRIP-seq的水稻RNA m6A甲基化修饰的研究[D];中国科学院北京基因组研究所;2015年

4 熊瑜琳;miR-122靶位基因STAT3调控长链非编码 RNA Lethe促进HCV复制的机制研究[D];第三军医大学;2015年

5 范春节;高通量测序鉴定毛竹小RNA及其功能分析[D];中国林业科学研究院;2012年

6 王加强;小鼠着床前胚胎特异ERV相关长非编码RNA的定向筛选及功能研究[D];东北农业大学;2015年

7 王业伟;非编码RNA SPIU的结构和功能研究和p19INK4D在APL发病中的作用[D];上海交通大学;2013年

8 邹艳芬;子痫前期中非编码RNA对滋养细胞功能的调控及机制探索[D];南京医科大学;2015年

9 朱乔;miR-10b在人肝细胞肝癌发生中的作用及其机制的初步探索[D];第四军医大学;2015年

10 祝宇红;离子条件下RNA折叠稳定性的理论研究[D];浙江大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 陆聪儿;条纹斑竹鲨再生肝脏中差异RNA的研究[D];浙江理工大学;2015年

2 张晓辉;小鼠几种长链非编码RNA基因功能的初步研究[D];昆明理工大学;2015年

3 全弘扬;长链非编码RNA在细胞内质网应激反应中的相关作用及机制研究[D];北京协和医学院;2015年

4 胡亮;DDX19A识别PRRSV基因组RNA并激活NLRP3炎症小体[D];中国农业科学院;2015年

5 张帅兵;应用RNA干扰技术对旋毛虫Nudix水解酶基因功能的研究[D];郑州大学;2015年

6 郑芳芳;肺癌RNA-Seq数据中RNA编辑事件的识别算法和系统分析[D];苏州大学;2015年

7 陈瑞东;长链非编码RNA MEG3在胰腺癌发生发展中作用的实验研究[D];苏州大学;2015年

8 刘骏武;线虫和水稻中环状RNA的预测及分析[D];华中农业大学;2015年

9 李猷;利用RNA干扰技术提高番茄抗TMV侵染能力的研究[D];牡丹江师范学院;2015年

10 吴术盛;SVCV感染EPC细胞microRNA表达谱的初步研究[D];华中农业大学;2015年

  本文关键词：长非编码RNA Gas5在小鼠胰岛beta细胞功能中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。