活性维生素D3对糖尿病大鼠足细胞nephrin、podocin、WT1表达的影响

发布时间：2016-10-31 21:00

  本文关键词：活性维生素D3对糖尿病大鼠足细胞nephrin、podocin、WT1表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《河北医科大学》 2013年

活性维生素D3对糖尿病大鼠足细胞nephrin、podocin、WT1表达的影响

曹树翼  

【摘要】：目的：本课题通过建立腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导的糖尿病Sprague Dawley(SD)大鼠模型，应用活性维生素D3干预糖尿病大鼠，采用免疫组织化学、反转录PCR、光镜等方法检测SD大鼠肾组织，观察活性维生素D3对其足细胞nephrin、podocin及WT1表达的影响，探讨活性维生素D3是否可以改善糖尿病大鼠足细胞的滤过功能，从而减少蛋白尿、延缓肾脏病的进展，为糖尿病肾病的早期防治，提供实验性理论依据。 Nephrin是足细胞上第一个被发现的跨膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族成员，特异表达在足细胞上，nephrin可诱导Akt途径使数种靶蛋白磷酸化，保护及减少足细胞凋亡。Podocin通过CD-2AP连接于Nephrin形成复合体，呈发夹样结构插入细胞膜内，其对Nephrin信号传导有增强作用。他们表达异常可影响肾小球滤过屏障通透性，导致蛋白尿的产生。故两者对维持肾小球滤过屏障及足细胞功能和结构完整性发挥着极其重要的作用。肾母细胞瘤抑制基因(WT1)对多种基因表达具有调节作用，是足细胞的特异标志之一，对维持足细胞的正常结构及功能有重要作用。 方法：选择清洁级SD(雄性)大鼠36只，体重200±20g，适应性喂养3天,随机选取24只大鼠给予链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病模型，其余12只做正常对照组（NC组）。将造模成功的大鼠按随机区组原则分为:糖尿病对照组（DN组）、活性维生素D3治疗组（DT组）,每组各12只。DT组在糖尿病模型建立之后予骨化三醇0.03ug/(kg·d)灌胃；NC及DN组以等量的花生油灌胃。分别于模型成功后8、12周测定各组大鼠血钙、血磷、血肌酐、血尿素氮以及24小时蛋白尿，并收集肾组织标本。用苏木素伊红（HE）在光镜下观察大鼠肾组织病理变化；采用免疫组织化学方法及RT-PCR检测肾脏nephrin、podocin及WT1的表达。所得实验数据用均数±标准差(x±S)表示，各组间比较采用单因素方差分析（满足正态性和方差齐性），两组间的比较采用两独立样本t检验（不满足正态性和方差齐性的数据资料采用非参数检验），实验数据应用SPSS13.0统计分析软件处理，以P0.05认为有统计学意义。 结果：1一般情况DN组、DT组大鼠注射STZ后2～4天即出现多饮、多食、多尿，逐渐消瘦，活动减少，而NC组则无上述情况出现。 2生化检测结果各组大鼠24小时尿蛋白定量、血钙、血磷、血肌酐及尿素氮的比较。8及12周末DN组大鼠尿蛋白定量、血肌酐与NC组比较，DN组升高明显（P＜0.05），，DT组比DN组低（P＜0.05）。血钙8周时DN较NC组降低，12周时降低更明显；DT组在8周时与DN组比较差别不大，12周时血钙水平较DN组高，但低于NC组。血磷水平同期各组间比较无差别（P0.05）。 3组织化学变化苏木精--伊红染色（HE）结果光镜HE染色显示,整个实验过程中NC组大鼠的肾脏组织均未见明显病理学改变。与同期的NC组相比,12周末,DN组肾小球体积增大，肾小球系膜区增宽,系膜细胞增多。肾间质、肾小管无明显病理形态学改变。同期DT组肾小球病变不明显。 4免疫组织化学结果8周和12周末DN组、DT组与NC组比较大鼠肾组织中nephrin、podocin及WT1的表达减少，其中12周末降低更为显著（P＜0.05）；8周和12周末DT组较DN组各因子表达升高，但低于同期NC组(P 0.05)。 5Reverse Transcription-PCR (RT-PCR)结果与NC组大鼠相比，糖尿病大鼠肾组织中nephrin、podocin及WT1表达降低，12周末变化更显著（P＜0.05）；8周和12周末DT组较DN组各因子表达升高，但低于同期NC组(P 0.05)。 结论:1糖尿病大鼠肾组织nephrin、podocin及WT1表达下降，与蛋白尿水平呈负相关，提示nephrin、podocin及WT1在糖尿病肾损伤的发生发展过程中发挥一定作用。 2活性维生素D3能够明显减轻糖尿病大鼠蛋白尿的产生及肾脏病理形态学改变，其机制可能与上调nephrin、podocin及WT1蛋白的表达。早期应用活性维生素D3可改善糖尿病肾病大鼠肾小球滤过屏障功能，对延缓糖尿病肾病的发生与发展，具有一定的保护作用。

【关键词】：
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R587.2
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 文鹏;赵梨;吴坚;陆群;;活性维生素D_3类药物的研究进展[J];华西药学杂志;2011年01期

2 邹敏书;余健;周建华;;活性维生素D及其类似物对足细胞的保护作用[J];临床儿科杂志;2012年01期

3 胡亚洁;焦波;;足细胞裂孔隔膜蛋白质与蛋白尿[J];生命的化学;2009年06期

4 俞银芳;刘兆鹏;;活性维生素D_3类药物研究概况[J];中国药物化学杂志;2006年05期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 文鹏;赵梨;吴坚;陆群;;活性维生素D_3类药物的研究进展[J];华西药学杂志;2011年01期

2 刘佩卉;刘新利;鞠培殿;张海涛;;应用响应面法优化去氢表雄酮1α-羟基化的转化培养基[J];食品与药品;2010年07期

3 尹贻贞;刘兆鹏;;活性维生素D_3的抗肿瘤信号转导作用[J];生命的化学;2009年04期

4 王嘉琳;袁伟杰;;活性维生素D与营养性维生素D在慢性肾脏病治疗中的临床地位[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2011年02期

5 辛星;万献尧;毕丽岩;;维生素D_3及其受体的临床意义[J];医学与哲学(临床决策论坛版);2010年04期

6 赵慧萍;武蓓;隋准;芦丽霞;乔婕;武向兰;王梅;;维持性腹膜透析患者血25(OH)D水平及其相关因素分析[J];中国血液净化;2012年04期

7 施燕;陈丹霞;何志高;;HPLC法同时测定钙泊三醇/倍他米松软膏中2种主药的含量[J];中国药房;2011年21期

8 连星烨;孟增东;;不同地区光照量与人体维生素D水平及骨密度之间的关系[J];中国骨质疏松杂志;2012年02期

9 李斌;李琴;;大剂量维生素D_3对雄性大鼠骨代谢的影响[J];中国医药指南;2012年31期

10 王凤娇;马宏;李素仙;潘丽丽;李伟;王成礼;;骨化三醇对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的研究[J];中国药物与临床;2013年04期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 郑敏;急性白血病儿童维生素D受体基因多态性和表达及维生素D对白血病细胞的影响[D];广西医科大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前7条

1 尹贻贞;活性维生素D_3类药物马沙骨化醇的合成研究[D];山东大学;2011年

2 杨丽娜;1,25(OH)_2D_3对脂多糖及高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞维生素D受体及炎症因子表达的影响[D];中国医科大学;2010年

3 刘佩卉;去氢表雄酮的生物法羟基化修饰研究[D];山东轻工业学院;2010年

4 程省;1,25（OH）_2VD_3对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的影响[D];郑州大学;2012年

5 贾文燕;毛细支气管炎患儿血清25-（OH）-D3水平及维生素D3干预后尿LTE_4的变化[D];苏州大学;2012年

6 张军辉;顺丙烯膦酸的合成骨化三醇关键中间体的合成及应用[D];天津大学;2012年

7 黄体聪;20-甲酰基维生素D类似物中间体及其衍生物的合成[D];南京理工大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 朱汉民;1,25羟化维生素D_3和骨质疏松[J];国外医学(内分泌学分册);2003年02期

2 骆文静,陈景元,王文亮;维生素D及其类似物抗肿瘤作用机制[J];国外医学(肿瘤学分册);2004年06期

3 余健,聂国明;维生素D_3的免疫调节作用[J];国外医学(免疫学分册);2004年06期

4 吴俊,梅长林;活性维生素D在肾脏病领域的应用进展[J];实用药物与临床;2005年05期

5 钱国锋,张秀珍;维生素D受体基因与骨质疏松症[J];现代医学;2003年04期

6 俞银芳;刘兆鹏;;活性维生素D_3类药物研究概况[J];中国药物化学杂志;2006年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈姝君;陈海平;刘奇;;尿毒清颗粒对糖尿病大鼠足细胞损伤的保护作用研究[J];中国中西医结合肾病杂志;2008年10期

2 陈立平;周巧玲;刘抗寒;欧阳春;彭卫生;尹红玲;吴晓英;;洛沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞超微结构及其分子nephrin podocin表达的影响[J];中国实用内科杂志;2006年S2期

3 范青锋,丁洁,张敬京,管娜;Nephrin,podocin及α-actinin在小鼠肾小球足细胞系的表达与分布[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2003年05期

4 管娜,丁洁,张敬京,杨霁云;嘌呤霉素肾病大鼠肾小球中nephrin、podocin和α-actinin与蛋白尿的关系[J];中华肾脏病杂志;2004年01期

5 匡蕾;叶山东;;Nephrin与糖尿病肾病的关系[J];国际病理科学与临床杂志;2011年02期

6 管娜,邓江红,丁洁,张敬京,杨霁云;足细胞分子分布和表达与足突形态变化和蛋白尿发生的关系[J];北京大学学报(医学版);2004年02期

7 孙利,徐虹,杨毅,王莹;原发性肾病患儿肾组织中nephrin和podocin mRNA的表达[J];中华儿科杂志;2005年04期

8 余健;肾小球裂隙隔膜相关分子成分的研究进展[J];华南国防医学杂志;2003年01期

9 管娜,丁洁,张敬京,黄建萍,姚勇,肖慧捷,刘景城,杨霁云;肾病综合征患儿肾小球中nephrin、podocin、α-actinin及WT1的表达[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2002年03期

10 余健,聂国明;对肾小球裂隙隔膜相关分子成分的研究进展[J];国外医学.泌尿系统分册;2003年S1期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 范青锋;丁洁;张敬京;管娜;邓江红;;Podocin基因敲低对小鼠足细胞nephrin和α-actinin表达分布的影响[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

2 徐新鹏;洪郁芝;叶迅;;雷公藤内酯醇干预高糖影响小鼠肾脏足细胞Nephrin蛋白表达的研究[A];第十二届全国中医糖尿病大会论文汇编[C];2010年

3 高霞;徐虹;;血管生成素样蛋白3在人和大鼠足细胞的定位特点及与足突融合的关系探讨[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

4 俞东容;杨汝春;林宜;周大卫;朱晓玲;王永钧;;防己黄芪汤对阿霉素肾病大鼠足细胞的影响[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编（下）[C];2008年

5 祁佳;黄海长;李惊子;;高糖通过ERK_(1／2)途径调节足细胞podocalyxin蛋白的表达[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

6 李铎;聂静;邹和群;黎敏;余学清;;氧化型低密度脂蛋白对足细胞的损伤作用及机制[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

7 袁博寒;朱晓玲;杨汝春;王永钧;;复方积雪草对FSGS模型大鼠足细胞裂孔隔膜相关分子mRNA表达的影响[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编（下）[C];2008年

8 孙伟;吴汉利;万毅刚;周栋;刘丽;邵家德;朱萱萱;;雷至胶囊对阿霉素肾病模型足细胞病变的影响[A];第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2010年

9 苗静;范青锋;崔庆华;谭颖;赵明辉;丁洁;;足细胞产生的补体成分在足细胞损伤以及嘌呤霉素肾病蛋白尿中的作用[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年

10 陈铖;丁国华;贾俊亚;梁伟;;AngⅡ对大鼠足细胞整合素连接激酶表达的影响[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前7条

1 陈香美 谢院生;[N];健康报;2006年

2 ;[N];保健时报;2003年

3 ;[N];中国妇女报;2000年

4 黄进琪;[N];中国老年报;2002年

5 迅行 编译;[N];大众科技报;2000年

6 康康;[N];保健时报;2004年

7 谈多刚;[N];民族医药报;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 梁伟;Nephrin在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞表型改变中的作用及机制[D];武汉大学;2009年

2 孙利;儿童微小病变肾病几种相关分子的研究[D];复旦大学;2004年

3 袁杨刚;线粒体功能障碍在肾小球足细胞早期损伤中作用的研究[D];南京医科大学;2012年

4 朱春华;线粒体功能障碍在足细胞损伤中的作用及干预研究[D];南京医科大学;2011年

5 胡泉;清热通络复方对糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin和Podocin作用研究[D];成都中医药大学;2010年

6 高健;精原细胞介导的血管生成素样蛋白3表达变化对小鼠肾脏结构和功能的影响[D];复旦大学;2011年

7 李春庆;miRNA对PAN肾病大鼠nephrin介导蛋白尿调控机制及雷公藤制剂的保护作用[D];南京中医药大学;2011年

8 邢玲玲;P13K/Akt通路在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用[D];河北医科大学;2012年

9 邢昌赢;免疫抑制剂在慢性肾脏病中的应用研究[D];南京医科大学;2006年

10 陈立平;Nephrin、podocin在糖尿病肾病模型鼠中的作用及罗格列酮和洛沙坦对其的影响[D];中南大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 曹树翼;活性维生素D3对糖尿病大鼠足细胞nephrin、podocin、WT1表达的影响[D];河北医科大学;2013年

2 邹琦;低剂量雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin及podocin表达的影响[D];福建医科大学;2011年

3 郑云;雷公藤多甙对糖尿病肾病大鼠足细胞病变的影响[D];安徽医科大学;2011年

4 李桂霞;坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用[D];南昌大学;2008年

5 郭藏卉;舒洛地特对阿霉素肾病大鼠足细胞podocalyxin、podocin、WT1表达的影响[D];河北医科大学;2012年

6 聂琳;高糖、AngⅡ对小鼠足细胞凋亡及PKC活性、nephrin、CD2AP表达的影响[D];山西医科大学;2012年

7 潘梦舒;冬虫夏草及雷公藤多甙对糖尿病肾病大鼠足细胞影响的实验研究[D];安徽医科大学;2012年

8 王沛;蛋白尿性肾病患儿尿足细胞及相关分子nephrin的检测[D];广州医学院;2010年

9 潘静;胚胎后肾间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠足细胞Nephrin、Podocin表达的影响[D];中南大学;2009年

10 张瑶;地塞米松对肾小球足细胞CD2AP/TRPC6表达和分布的影响[D];广州医学院;2010年

  本文关键词：活性维生素D3对糖尿病大鼠足细胞nephrin、podocin、WT1表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：160389