五味子醇甲对糖尿病勃起功能障碍大鼠勃起功能及平滑肌细胞表型转化蛋白影响的研究

发布时间：2018-03-21 09:34

  本文选题：糖尿病性勃起功能障碍　切入点：平滑肌细胞表型转化　出处：《河北医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:通过观察平滑肌细胞表型转化标志蛋白在大鼠阴茎海绵体表达明确糖尿病勃起功能障碍大鼠(Diabetes-inducederection dysfunction,DI ED)阴茎海绵体是否存在平滑肌细胞表型转化及表型转化对勃起的影响;应用药物干预后,探索五味子醇甲对DIED大鼠勃起功能的影响及五味子醇甲与平滑肌细胞表型转化蛋白之间的联系。方法:1筛选DIED大鼠:健康雄性SD大鼠100只(体质量200±20g),适应性喂养1周后,随机取88只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液60mg/kg,余12只为正常对照组(NC)。72h后测定随机血糖,若血糖16.7mmol/L视为糖尿病(DM)大鼠;继续饲养8周,DM大鼠皮下注射阿扑吗啡(APO),30min内未诱导阴茎勃起,视为糖尿病勃起功能障碍(DIED)大鼠;若出现勃起,视为单纯DM组大鼠。2模型分组及药物干预:将DIED大鼠随机分为DIED组;五味子醇甲低剂量组(5mg/kg/d);五味子醇甲中剂量组(10mg/kg/d);五味子醇甲高剂量组(20mg/kg/d);另有NC组和DM组共6组;NC组、DM组、DIED组分别予以生理盐水2ml/d灌胃8周,3个剂量药物组予以相应剂量五味子醇甲灌胃8周,每日1次。3灌胃8周后麻醉大鼠,电刺激大鼠阴茎海绵体神经检测阴茎海绵体内压(ICP)、颈动脉内压(MAP)。4取血测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、血肌酐(Scr)水平。5断头处死,取阴茎海绵体组织,一部分用免疫组化法观察阴茎海绵体内平滑肌肌动蛋白-α(SMA-α)水平;另一部分用Western Blot测定阴茎海绵体内SMA-α,骨桥蛋白(OPN)蛋白表达水平。6数据分析:所得数据应用SPSS 23.0软件分析,数据描述用均数±标准差((?)±s)表示。对正态分布的计量资料组间比较采用方差分析,多个样本均数间的多重比较采用LSD、SNK-q检验。以P0.05认为差异有统计学意义。结果:1各组大鼠体质量及血糖变化:与NC组相比,灌胃前DM组、DIED组,低、中、高剂量药物组大鼠体质量均明显下降,血糖显著增高(P0.05);除NC组外,上述各组间两两相比,大鼠体质量及血糖无显著差异(P0.05)。灌胃8周后,DM组、DIED组,低、中、高剂量药物组大鼠体质量均明显下降,血糖显著升高(P0.05),除NC组外,上述各组间两两相比,大鼠体质量及血糖无显著差异(P0.05)。2电刺激前,各组间的基础ICP无统计学差异(P0.05);电刺激时,各组间MAP值无统计学差异(P0.05);电刺激时,与NC组相比,DM、DIED组大鼠ICP及ICP/MAP依次递减(P0.05);与DIED组相比,低剂量药物组ICP及ICP/MAP无明显改变(P0.05),中、高剂量药物组ICP及ICP/MAP依次递增(P0.05),高剂量药物组上升幅度最大。3各组大鼠间ALT、AST、ALP及Scr水平均无明显差异(P0.05)4免疫组化结果如图所示,与NC组比较,SMA-α在DM组、DIED组表达依次递减(P0.05);与DIED组比较,SMA-α在低、中、高剂量药物组表达依次递增(P0.05),且不同剂量药物组SMA-α表达均低于NC组(P0.05)。5 Western Blot结果SMA-α蛋白表达:与NC组相比,DM组和DIED组阴茎海绵体中SMA-α蛋白含量减少(P0.05),其中DIED组SMA-α蛋白含量最少(P0.05);与DIED组相比,低、中、高剂量药物组SMA-α蛋白含量均高于DIED组(P0.05),其中高剂量药物组SMA-α含量最高,中剂量组次之,再者为低剂量组;不同剂量药物组蛋白含量均低于NC组(P0.05)。OPN蛋白表达:与NC组相比,DM组和DIED组阴茎海绵体中OPN蛋白含量增多(P0.05),其中DIED组OPN蛋白含量最多(P0.05);与DIED组相比,低、中、高剂量药物组OPN蛋白含量均低于DIED组(P0.05),但不同剂量药物组间两两比较OPN蛋白表达无明显差异(P0.05);DM组阴茎海绵体中OPN蛋白含量是除NC组外最低者(P0.05)。结论:1 DIED大鼠阴茎海绵体可能存在平滑肌细胞表型转化;随表型转化程度不同可能造成勃起功能障碍。2五味子醇甲干预后可以改善DIED大鼠勃起功能;五味子醇甲提高勃起功能的作用呈剂量依赖性,高剂量药物组改善勃起作用最强。3五味子醇甲未对DIED大鼠肝肾功能相关指标造成影响。4五味子醇甲可能影响了阴茎海绵体中平滑肌细胞表型转化蛋白的表达,但无剂量依赖性。
[Abstract]:Objective: to make diabetic erectile dysfunction rat protein in rat corpus cavernosum smooth muscle cell phenotype by observing the signs (Diabetes-inducederection dysfunction, DI ED) whether there is influence on the penis erectile cell phenotype and phenotypic transformation of smooth muscle; application of drug intervention, to explore the effects of schisandrin DIED on erectile function in rats and schisandrin and smooth muscle cell phenotype protein between them. Methods: 1 DIED rats were selected: 100 healthy male SD rats (body weight 200 + 20g), after 1 weeks of feeding, 88 rats were randomly selected by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ) solution 60mg/kg, more than 12 were normal the control group (NC) were determined by random blood glucose.72h, if the blood glucose 16.7mmol/L as diabetes mellitus (DM) rats; to continue for 8 weeks, DM rats by subcutaneous injection of apomorphine (APO), 30min did not induce penile erection, as 涓虹硸灏跨梾鍕冭捣鍔熻兘闅滅��(DIED)澶ч紶;鑻ュ嚭鐜板媰璧，

本文编号：1643273