基于神经血管单元分析糖尿病复合脑缺血大鼠模型脑组织病理变化

发布时间：2018-03-27 14:31

本文选题：糖尿病　切入点：脑缺血　出处：《河南中医学院》2015年硕士论文

【摘要】：目的:1复制糖尿病大鼠模型,观察糖尿病因素对大鼠模型神经血管单元结构功能的影响;2建立糖尿病复合脑缺血模型,比较复合性脑缺血大鼠模型在缺血的不同时间点神经血管单元结构功能的改变。方法:1造模:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,尾部采血检测大鼠血糖水平;制备大脑中动脉缺血模型,比较大鼠神经血管单元功能的变化。2分组:实验动物随机分为正常对照组、糖尿病组,正常对照组分为四组包括正常组、假手术组、单纯脑缺血3d和7d组;糖尿病组四组,为糖尿病组,糖尿病假手术组,糖尿病复合脑缺血3d和7d组。用行为学功能检测和TTC染色的方法,检测不同组动物的行为差异,并检测脑组织的梗死体积。3腹主动脉采血,用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清中TNF-α、IL-1、COX-2、v WF、NSE的表达量。4免疫组织化学方法比较各组大鼠脑组织E-选择素、VCAM-1、ICAM-1和CD34的表达。5 Western Blot方法检测大鼠脑组织皮层E-选择素、VCAM-1、CD34的蛋白表达。6透射电镜观察大鼠脑部梗死边缘区细胞超微结构的改变。结果:1)糖尿病组与正常组比较①糖尿病组血清中TNF-α、IL-1、COX-2、v WF、NSE的表达量明显增多,差异显著(p0.05);脑组织中E-选择素、VCAM-1、ICAM-1的表达增高,差异明显(P0.05),而脑组织中CD34的表达量降低,有统计学意义(p0.05)。②糖尿病组神经元外形规则,核周隙变窄,核仁致密,异染色质减少,胞质内线粒体肿胀,嵴变淡、变少,高尔基复合体扩张,粗面内质网的核糖体部分脱落水肿。2)复合脑缺血组与单纯脑缺血组相比较:①神经功能评分:各组之间差异性不明显(p0.05);复合缺血7 d组组间差值明显,有统计学意义(p0.05),其它组组间差值无统计学意义。②tnf-α、il-1、cox-2在糖尿病组中的表达量均高于正常组,差异显著统计学意义p0.05;与正常组相比,单纯脑缺血组模型在3d、7d中呈高表达趋势,差异性明显p0.05;复合脑缺血组与糖尿病组比较,表达均降低,差异性显著p0.05。复合脑缺血3d组与单纯脑缺血3d组比较tnf-α、il-1的表达量降低、cox-2升高,复合7d时各组均降低,差异性明显,有统计学意义p0.05。③vwf因子与正常组相比,单纯脑缺血3d、7d组和糖尿病及糖尿病假手术组血清中vwf因子的表达量升高,单纯脑缺血7d组增加明显有统计学意义(p0.05);与糖尿病组比较,复合缺血组3d、7d组表达量量有所降低,复合缺血7d时其表达量最低,有统计学意义。④血清nse的表达:与正常及正常假手术组相比:单纯脑缺血3d、7d组和糖尿病及糖尿病假手术组表达量增加,差异显著(p0.05)。与单纯脑缺血3d组相比,复合脑缺血3d组血清中的含量降低有统计学意义(p0.05)。与糖尿病及其假手术组相比:复合脑缺血3d和7d组血清中表达量降低,其中7d组降低比较明显,有统计学意义。⑤梗死边缘区e-选择素、vcam-1、icam-1、cd34的表达:糖尿病大鼠模型中e-选择素、vcam-1、icam-1的表达量增加。复合缺血结果显示,糖尿病复合脑缺血大鼠模型3d、7d组中e-选择素、vcam-1、icam-1的表达高于正常组,但一般较单纯脑缺血相应时间点组低。梗死边缘区cd34的表达发现,与正常组相比,缺血组和糖尿病组表达量均下降,复合脑缺血组的表达量高于糖尿病组。⑥大鼠脑组织皮层e-选择素、vcam-1、cd34中蛋白的表达与免疫组化检测大鼠脑组织梗死边缘区的表达相似,e-选择素、vcam-1、在单纯、复合脑缺血和糖尿病组的含量有上升趋势,复合脑缺血7d组与3d组比较其表达量下降。cd34在缺血组和糖尿病组其含量下降,复合脑缺血较糖尿病组表达有所上升。⑦缺血边缘区的形态结构和超微结构的变化:糖尿病复合脑缺血与单纯性脑缺血比较:缺血3d组均出现组织结构疏松,大量的神经细胞坏死,细胞水肿排列不规则,胶质细胞增生,神经元异染色质降解,线粒体嵴变短、稀疏,核糖体脱落;血管内皮细胞肿胀,突触小泡减少。缺血7d组水肿程度有所减轻,缺血边缘区出现形态结构正常的神经元,胶质细胞增生明显,内皮细胞水肿减轻。另一方面糖尿病复合脑缺血观察其形态损伤较单纯性脑缺血严重。结论:1糖尿病模型可使血管内皮损伤,激活胶质细胞,刺激炎症反应,使血管神经元受损。2结合糖尿病痰瘀相关理论与现代物质的联系发现痰瘀相关学说与血管内皮损伤有一定的联系。3糖尿病复合脑缺血条件下,神经血管单元结构功能发生了更为复杂的变化。一方面在炎症反应、细胞因子及胶质细胞增生等各种刺激下,内源性的脑保护机制被激活;另一方面,在糖尿病本身可导致神经元损伤,可加重脑缺血损伤。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：河南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.1;R743.3

【参考文献】