长链非编码RNA AK043773在脂肪细胞分化中的作用
本文选题:长链非编码RNA 切入点:AK 出处:《生物技术通报》2017年12期
【摘要】:探索长链非编码RNA(lnc RNA)AK043773在脂肪细胞分化过程中的表达变化和调控作用。将小鼠前脂肪细胞成脂诱导,利用实时定量PCR技术检测成脂分化调控基因KLF7及AK043773的表达,构建AK043773过表达载体检测其对成脂分化的影响。经UCSC数据库检索发现AK043773位于KLF7基因4号外显子的3'端下游,骨髓基质细胞系ST2和前脂肪细胞系3T3-L1成脂诱导分化后,实时定量PCR检测结果显示AK043773及KLF7表达协同下调;构建p CDNA3.1-AK043773过表达载体,转染ST2细胞后能显著提高AK043773的表达,进行脂肪细胞分化条件诱导,通过油红O染色及OD520nm吸光值检测可见AK043773过表达显著抑制ST2细胞中脂滴产生。AK043773及KLF7在脂肪细胞分化过程中协同下调,上调AK043773的表达可显著抑制脂肪细胞分化。
[Abstract]:To explore the expression and regulation of long-chain non-coding RNA(lnc RNA)AK043773 in adipocyte differentiation, the expression of KLF7 and AK043773 genes were detected by real-time quantitative PCR. AK043773 overexpression vector was constructed to detect its effect on adipogenic differentiation. By UCSC database search, it was found that AK043773 was located at the 3'end of exon 4 of KLF7 gene, and the bone marrow stromal cell line ST2 and the preadipose cell line 3T3-L1 induced adipogenic differentiation. The results of real-time quantitative PCR showed that the expression of AK043773 and KLF7 were down-regulated, and the expression of AK043773 was significantly increased after transfection of ST2 cells, and the expression of AK043773 was induced by adipocyte differentiation. Oil red O staining and OD520nm absorptivity test showed that AK043773 overexpression significantly inhibited lipid droplets in ST2 cells. AK043773 and KLF7 co-down-regulated adipocyte differentiation. Up-regulation of AK043773 expression significantly inhibited adipocyte differentiation.
【作者单位】: 天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室天津市代谢性疾病重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金项目(81501846) 天津医科大学代谢病医院内分泌研究所科学基金(2014RC01)
【分类号】:R589.2
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,本文编号:1673549
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