visfatin对体外脂肪细胞胰岛素受体底物和PI3K表达的影响

发布时间：2018-03-31 16:29

  本文选题：糖尿病　切入点：型　出处：《吉林大学学报(医学版)》2017年02期

【摘要】：目的:从胰岛素经典信号传导通路磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)角度探讨内脏脂肪素(visfatin)与2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:复苏、传代和诱导分化人源T2DM前脂肪细胞,构建visfatin过表达载体,进行载体转化、培养和提取;以4个不同表达梯度(0.0、1.0、2.5和5.0μg)转染传代脂肪细胞,以0.0μg组为对照组,其余3组为观察组;Q-PCR法检测visfatin、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)和PI3K(P85α)mRNA表达水平,Western blotting法检测visfatin、IRS-1、IRS-2和PI3K(P85α)蛋白表达水平及IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平,[3 H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法测定细胞葡萄糖摄取率的变化。结果:各组visfatin mRNA及蛋白表达水平随转染浓度梯度升高而升高(P0.01),所构建visfatin过表达载体有效。随visfatin表达增加,各组IRS-1和PI3K(P85α)mRNA和蛋白表达水平以及IRS-1磷酸化程度均明显升高(P0.01),但IRS-2mRNA和蛋白表达水平未出现明显变化(P0.05)。脂肪细胞的葡萄糖摄取率随visfatin表达增加而升高(P0.05)。结论:体外脂肪细胞visfatin过表达可增加IRS-1和PI3K的表达水平。
[Abstract]:Aim: to investigate the relationship between visfatin visfatin (visfatin) and insulin resistance (IRI) in type 2 diabetes mellitus (T2DM) from the point of view of phosphatidylinositol 3 kinase PI3K.Methods: after resuscitation, subculture and differentiation of human T2DM preadipocytes, the overexpression vector of visfatin was constructed, transformed, cultured and extracted, and the adipocytes were transfected with four different expression gradients of 0.01.0,2.5 and 5.0 渭 g, and the control group was treated with 0.0 渭 g.The changes of glucose uptake rate were measured by the method.Results: the expression level of visfatin mRNA and protein increased with the increase of transfection concentration gradient. The visfatin overexpression vector constructed was effective.With the increase of visfatin expression, the expression levels of IRS-1 and PI3K(P85 伪 -tir mRNA and protein, as well as the degree of IRS-1 phosphorylation, increased significantly in each group, but the expression of IRS-2mRNA and protein did not change significantly (P0.05).Glucose uptake of adipocytes increased with the increase of visfatin expression.Conclusion: overexpression of visfatin in adipocytes can increase the expression of IRS-1 and PI3K.
【作者单位】： 昆明医科大学第六附属医院检验科;云南省玉溪市中心血站质管科;昆明医科大学第一附属医院产科;
【基金】：国家自然科学基金资助课题(81160082)
【分类号】：R587.1

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本文编号：1691532