二甲双胍对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响

发布时间：2018-04-06 20:07

  本文选题：二甲双胍　切入点：氧化应激　出处：《安徽医科大学》2015年硕士论文

【摘要】：目的 观察高糖条件下培养的大鼠肾小球系膜细胞(Mesangial Cells, MCs)氧化应激水平以及二甲双胍(Metformin,Met)对其氧化应激的影响,探讨二甲双胍保护肾脏机制。方法将大鼠肾小球MCs置于体外培养,分组如下：①「正常对照(NC)组：DMEM液(Glu 5.6mmol/L)②「高糖(HG)组：DMEM液(Glu 25mmol/L)③「二甲双胍1组(Met 1组)：DMEM液(Glu 25mmol/L)+Met (0.5mmol/L)④「二甲双胍2组(Met 2组)：)MEM液(Glu 25mmol/L)+met(1.0mmol/L)⑤「二甲双胍3组(Met 3组)：DMEM液(Glu 25mmol/L)+met(2.0mmol/L)每组细胞培养48h后收集上清液和细胞。采用比色法测定上清液中脂质过氧化物丙二醛(Malondialdehydel,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutaseSOD)活性；采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction, RT-RCR)方法测定MCs内烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate, NADPH)氧化酶的亚基p22phox及p47phox mRNA的表达。各个检测指标均设立6个重复组。结果(1)各组大鼠肾小球MCs上清液中SOD活性比较与NC组比较,HG组SOD活性明显下降(P0.05),各二甲双胍组经不同浓度二甲双胍干预,SOD活性较HG组不同程度升高(P0.05)。其中,Met1组与Met2组SOD活性无明显差异,但Met1与Met3组,Met2组与Met3组SOD活性均存在差异,差异有统计学意义(P0.05)。(2)各组大鼠肾小球MCs上清液中MDA含量比较与NC组比较,HG组MDA含量显著增高(P0.05)。各二甲双胍组MDA含量均较HG组含量显著降低,但均高于NC组,差异有统计学意义(P0.05)。Met1组含量高于Met2组以及Met3组,差异有统计学意义(P0.05)。但Met2组与Met3组MDA含量无明显差异。(3)各组大鼠肾小球MCs p22phox和p47phox mRNA表达水平的比较经高糖刺激后,HG组p22phox、p47phox mRNA表达较NC组明显增加(P0.05)。不同浓度二甲双胍预先干预后,各二甲双胍组p22phox、p47phox mRNA表达量较HG组显著降低(P0.05),但仍高于NC组。Metl与Met2组,Metl与Met3组,Met2与Met3组之间p22phox和p47phox mRNA表达均有差异,差异有统计学意义(P0.05)。(4)肾小球MCs p22phox表达水平与上清液SOD活性及MDA含量的相关性分析MCs内p22phox表达水平与上清液SOD活性呈显著负相关(r=-0.844,P0.05),与MDA含量呈显著正相关。(r=0.911,P0.05)(5)肾小球MCs p47phox表达水平与上清液SOD活性及MDA含量的相关性分析MCs内p47phox表达水平与上清液SOD活性呈显著负相关(r=-0.782,P0.05),与MDA含量呈显著正相关(r=0.913,P0.05)。结论1 高糖可增强体外培养的MCs P47phx、P22phoxmRNA表达,诱导其氧化应激2二甲双胍可抑制高糖诱导的体外培养的MCs P47phox、P22phoxmRNA表达,减轻其氧化应激,并具有一定的浓度依赖性。
[Abstract]:Objective to observe the oxidative stress level of Mesangial cells (MCs) in rat glomerular Mesangial cells (MCS) cultured in high glucose and the effect of metformin (Metformin) on oxidative stress, and to explore the protective mechanism of metformin.Methods Rat glomerular MCs was cultured in vitro.鍒嗙粍濡備笅:鈶犮，

本文编号：1718692