二甲双胍对PCOS患者卵巢颗粒细胞IRS-1及P38磷酸化表达的影响

发布时间：2018-04-21 11:12

本文选题：多囊卵巢综合症 + 颗粒细胞　；参考：《青岛大学》2017年硕士论文

【摘要】：背景:多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种常见的妇科内分泌疾病,其表现高度异质,往往伴随胰岛素抵抗(Insulin resisitence,IR)和糖脂代谢异常。研究表明60%-70%PCOS存在IR,而IR机制可能是胰岛素受体后信号传导系统存在缺陷。胰岛素受体与胰岛素受体底物-1(IRS-l)结合,通过信号级联反应,进一步激活细胞内的丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路和磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)通路。IRS-1具有酪氨酸激酶和丝氨酸激酶活性,在胰岛素受体异常表达时,其磷酸化表达异常,是否影响MAPK通路和PI3K通路导致PCOS患者胰岛素抵抗发生有待深入探讨。研究表明,MAPK促有丝分裂通路异常激活,PI3K糖代谢通路受阻,促进IR的发生。p38作为MAPK通路中重要的信号转导分子,参与胰岛素多种靶向器官的能量代谢。p38参与调节细胞的减数分裂和有丝分裂途径,在MAPK通路中具有重要作用。卵巢颗粒细胞(Granulosa cells,GC)与卵子的发育成熟密切相关,胰岛素抵抗发病机制研究多集中在胰岛素经典靶细胞,如骨骼肌细胞、肝细胞和脂肪细胞,而对卵巢颗粒细胞局部的IR研究甚少,GC局部IR机制仍有待深入探讨。目的:通过研究不同剂量的二甲双胍对PCOS黄素化颗粒细胞中p-IRS-1和p-P38蛋白表达水平的影响,探讨PCOS胰岛素抵抗发生的受体后机制。方法:收集青岛大学医学院附属医院生殖科因不孕行体外受精/卵细胞内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗的助孕患者的颗粒细胞,将PCOS伴胰岛素抵抗非肥胖患者的黄素化颗粒细胞进行分离纯化体外培养(n=30),分别加入不同剂量Met(终浓度分别为0.01m M、0.1m M、1m M),设为PCOS+IN组(n=15),未加Met者为PCOS组(n=15)。非PCOS患者的卵泡黄素化颗粒细胞作为正常对照组(n=15)。用蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测各组颗粒细胞中p-IRS-1和p-P38蛋白的表达情况。同时比较两组患者的不孕年限、血清泌乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、体重指数(BMI)值。结果:(1)t检验统计分析PCOS组的血清促黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、获卵数明显高于正常对照组(P0.05),差异有统计学意义。(2)PCOS组的p-IRS-1和p-P38蛋白表达量较正常组高,差异具有统计学意义(P0.05);(3)不同浓度的Met处理后P-P38蛋白表达量仍较正常对照组高,但较PCOS组低,差异均具有统计学意义(P0.05)。浓度为0.01m M、0.1m M的Met处理后P-IRS-1蛋白表达量与PCOS组比较明显降低(P0.05),浓度为1m M的Met处理后P-IRS-1蛋白表达量与PCOS组比较无明显差异(P0.05)。结论:PCOS患者的卵巢颗粒细胞中IRS-1和P38磷酸化表达水平升高,增强MAPK通路的活性,是导致PCOS患者IR发生的可能机制之一。Met抑制PCOS伴胰岛素抵抗患者的卵巢颗粒细胞P38和IRS-1磷酸化的表达,抑制P-P38和P-IRS-1对MAPK通路的负反馈作用,激活PI3K通路,改善IR状态。
[Abstract]:Objective : To study the effects of different doses of metformin on the expression of p - IRS - 1 and p - P38 protein in PCOS patients . Results : ( 1 ) The expression of IRS - 1 and P - P38 protein in PCOS group was significantly higher than that in normal control group ( P0.05 ) .

【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R711.75

【参考文献】