艾塞那肽通过调节脂联素及其受体、氧化应激和内质网应激对高糖培养心肌细胞产生保护作用

发布时间：2018-05-23 17:33

本文选题：胰高血糖素样肽1 + 脂联素　；参考：《山西医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:观察艾塞那肽对高糖培养心肌细胞脂联素及其受体1(AdipoR1)、氧化应激及内质网应激的影响,探讨艾塞那肽对心肌细胞保护作用及机制。方法:将H9C2心肌细胞随机分为4组(每组n=3):对照组(A组,5.6 mmol/L糖培养基)、高糖组(B组,25.5 mmol/L糖培养基);高糖+10 nmol/L艾塞那肽组(C组);高糖+100 nmol/L艾塞那肽组(D组)。按分组处理24 h后检测细胞凋亡率。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定心肌细胞上清液脂联素(Adiponectin)水平。用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶亚单位p22phox(nicotinamide adenine dinucleotide(NADPH)oxidase subunit,p22phox)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-l)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP-78)、和CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)mRNA表达。用免疫印迹法(Western Blot)测定心肌细胞AdipoR1、磷酸化AMP激活蛋白激酶-α(Phosphorylated AMP activated protein kinase,P-AMPK)和葡萄糖转运因子4(Glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达。结果:1.与A组比较,B组心肌细胞凋亡率升高(25.90±0.55比5.60±0.25;χ2=10.958,P0.05),心肌细胞脂联素、AdipoR1和P-AMPK、GLUT4蛋白表达、Nrf2和HO-1mRNA表达水平均显著降低(760±145比1 490±168;0.59±0.08比0.91±0.07;0.59±0.26比0.85±0.03;0.63±0.08比0.86±0.08;0.56±0.02比1.00±0.00;0.48±0.08比1.00±0.00;t=7.942、6.922、13.255、4.536、10.689、13.627,均P0.05),p22phox蛋白表达、GRP-78和CHOP mRNA表达水平升高(0.87±0.02比0.56±0.09;1.33±0.08比1.00±0.00;1.58±0.16比1.00±0.00;t=7.591、5.138、5.994,均P0.05)。2.C组心肌细胞凋亡率为12.2±2.2,低于B组(χ2=6.814,P0.05);脂联素、AdipoR1和P-AMPK、GLUT4蛋白表达、Nrf2和HO-1 mRNA水平分别为1 070±142、0.69±0.02、0.72±0.03、0.78±0.08、0.71±0.09、0.64±0.07,高于B组(t=3.372、2.263、6.477、2.897、3.633、4.225,均P0.05);而p22phox蛋白(0.66±0.04)、GRP-78mRNA(0.99±0.16)和CHOP mRNA表达(1.26±0.28)低于B(t=4.716、4.892、3.272,均P0.05)。3.D组心肌细胞凋亡率(8.7±0.8)低于C组(χ2=2.265,P0.05);脂联素(1306±178)、AdipoR1蛋白(0.82±0.09)和P-AMPK蛋白(0.88±0.20)、Nrf2 m RNA水平(0.91±0.11)和HO-1mRNA水平(0.88±0.08)高于C组(t=2.575、2.349、7.822、4.792、6.518,均P0.05),CHOP mRNA表达(0.96±0.09)低于C组(t=3.185,P0.05)。而p22phox蛋白(0.60±0.14)和GLUT4蛋白(0.89±0.05)、GRP-78mRNA(1.10±0.12)较C组无明显变化(t=1.323、1.702、1.348,均P0.05)结论:1.高糖培养的心肌细胞脂联素水平降低,心肌细胞凋亡率升高。2.高糖培养的心肌细胞p-AMPK、GLUT4表达降低,p22phox表达升高,Nrf2及其下游抗氧化因子表达降低,GRP78及其相关因子表达升高,提示高糖诱导了能量代谢紊乱、氧化应激和内质网应激。3.艾塞那肽可能通过上调脂联素及其受体水平、调节能量代谢,抑制氧化应激、内质网应激,减轻高糖对心肌细胞的损伤,保护受损心肌细胞。
[Abstract]:AIM : To investigate the effects of exenanapeptide on AdipoR1 , oxidative stress and endoplasmic reticulum stress in cultured myocardial cells . Methods : The expression of AdipoR1 ( NADPH ) oxidase subunit p22phox , nuclear factor E2 - related factor2 ( Nrf2 ) , heme oxygenase - 1 ( HO - l ) , glucose - regulated protein 78 ( P - AMPK ) and glucose transporter 4 ( GLUT4 ) protein were determined by ELISA . The expression of p22phox protein ( 0.66 卤 0.04 ) , GRP - 78mRNA ( 0.99 卤 0.16 ) and CHOP mRNA ( 1.26 卤 0.28 ) were significantly lower than that in group B ( 蠂 ~ 2 = 6.814 , P0.05 ) . The expression of p22phox protein ( 0.60 卤 0.14 ) and GLUT4 protein ( 0.89 卤 0.05 ) , GRP - 78mRNA ( 1.10 卤 0.12 ) were lower than that in group C ( t = 1.323 , 1.702 , 1.348 , all P0.05 ) .
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R587.2;R54

【参考文献】