体外诱导骨髓源间充质干细胞分化为胰岛样结构的初步探讨

发布时间：2018-06-08 07:30

  本文选题：骨髓源间充质干细胞 + 尼克酰胺　； 参考：《广西医科大学》2015年硕士论文

【摘要】：目的：探讨诱导BM-MSCs跨胚层分化为胰岛样结构的方法；探究诱导BM-MSCs分化为胰岛样结构的可行性,并初步建立相关的实验室技术方法。方法：优化BM-MSCs的培养体系,建立骨髓源间充质干细胞系；选用第二代BM-MSCs分两组诱导：Ⅱ尼克酰胺组,含10%FBS、10mM尼克酰胺的高糖DMEM液培养BM-MSCs;Ⅱ胰腺组织裂解液组：用胰腺组织裂解液配制条件培养液培养BM-MSCs。诱导2个月,观察细胞形态变化,诱导后以双硫腙染色对细胞团进行初步鉴定；RT-PCR检测insulin基因的表达,胰岛素免疫组织化学染色方法检测细胞团内胰岛素阳性细胞；Mallory染色区分细胞团内不同胰岛细胞。结果：BM-MSCs集落分布,单个大核,折光透亮。在连续诱导培养过程中,①尼克酰胺组：诱导10d出现细胞聚集；诱导19d聚集的细胞增多形成细胞团；诱导的细胞团表面未有被膜包裹；DTZ染色可见细胞团中央部分染成棕红色,RT-PCR证明诱导细胞insulin基因表达；Mallory染色仅见细胞团内淡黄色的类β细胞。②胰腺组织裂解液组：诱导31d细胞成团；诱导47d形成有被膜包裹的细胞团。DTZ染色可见细胞团染色,其中大部分呈棕红色,部分成猩红色；RT-PCR证明诱导细胞insulin基因表达,免疫组织化学染色可见棕色的胰岛素阳性细胞,Mallory染色可见细胞团周围呈黄色的类β细胞及中央呈红色的类α细胞。结论：适宜条件下,BM-MSCs可跨胚层分化形成胰岛样结构。胰腺组织裂解液能更好的模拟微环境,诱导BM-MSCs形成由类Q细胞与类β细胞组成的,且有被膜包裹的胰岛样结构。
[Abstract]:Objective: to explore the method of inducing BM-MSCs to differentiate into islet like structure, to explore the feasibility of inducing BM-MSCs to differentiate into islet like structure, and to establish some laboratory methods. Methods: the culture system of BM-MSCs was optimized to establish bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs), and the second generation BM-MSCs were divided into two groups: group 鈪，

本文编号：1995120