骨骼肌源性脂联素通过p38MAPK信号通路影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中GLUT4表达

  本文关键词：骨骼肌源性脂联素通过p38MAPK信号通路影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中GLUT4表达的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《安徽医科大学》 2012年

骨骼肌源性脂联素通过p38MAPK信号通路影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中GLUT4表达的研究

陈冬  

【摘要】：目的体外培养骨骼肌L6细胞，诱导其分化成熟，采用棕榈酸诱导的方法，建立骨骼肌L6细胞胰岛素抵抗（IR）模型。给予不同条件的人工干预，探讨骨骼肌源性脂联素对胰岛素抵抗模型中GLUT4表达的影响，及其中p38MAPK信号通路的地位和作用。 方法（1）体外培养大鼠L6成肌细胞并诱导分化为成熟骨骼肌L6细胞，给予不同浓度（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mmol/L）的棕榈酸（PA），并应用葡萄糖氧化酶法分别测定不同时间（2、4、8、12、24、36h）细胞培养上清液葡萄糖浓度，观察不同浓度PA对L6细胞摄取葡萄糖的影响，据此判断胰岛素抵抗模型建立成功与否。（2）根据干预条件的不同，实验分为四组：NC组（对照组，骨骼肌L6细胞组）；NC+SB组(对照+阻滞剂SB203580组)；IR组（胰岛素抵抗模型组）；IR+PIO组(胰岛素抵抗模型+吡格列酮组)。应用Western blot方法分别测定上述四组APN、p-p38MAPK和GLUT4蛋白表达水平。 结果(1)0.4mmol/L的棕榈酸在作用12、24、36h以及0.6，0.8mmol/L棕榈酸作用8、12、24、36h，或1.0mmol/L棕榈酸作用4、8、12、24、36h后，细胞培养上清液中葡萄糖含量，明显高于对照组（P＜0.05）。据此判断胰岛素抵抗模型建立。（2）Western blot结果显示：①与NC组比较，IR组APN和GLUT4蛋白表达减少，差异有统计学意义（P＜0.05），而p-p38MAPK虽减少，但无统计学意义（P＞0.05）；②与NC组比较，NC+SB组p-p38MAPK和GLUT4的蛋白表达减少（P＜0.05），差异有统计学意义，尽管APN蛋白表达水平减少，但无统计学意义（P＞0.05）；③与IR组比较，IR+PIO组其APN、p-p38MAPK和GLUT4蛋白表达增加，，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论1.大鼠L6肌细胞株通过培养并分化成熟后，经过一定浓度和时间的棕榈酸诱导，可以建立大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型；2.大鼠L6肌细胞可以分泌和表达脂联素，并影响L6肌细胞GLUT4蛋白的表达；3.骨骼肌源脂联素上调L6肌细胞GLUT4的表达， p38MAPK信号通路可能是其重要的信号途径之一；4.吡格列酮可增加L6细胞脂联素的分泌，其改善胰岛素敏感性可能和激活p38MAPK信号通路有关。

【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R587.1
【目录】：

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