miR-664-3p通过靶向调节Smad4和Osterix的表达而促进骨质疏松的发生
本文选题：miR-664-3p + Smad4 ； 参考：《南京医科大学》2015年硕士论文
【摘要】：骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种以骨量减少、骨微结构破坏、骨脆性增加以及易发生骨折为特征的常见的代谢性骨病。激活成骨细胞功能从而促进骨形成是治疗骨质疏松症的策略之一。microRNAs(miRNAs)是在基因转录后水平发挥调控作用的小分子非编码RNA,几乎参与了所有的生理病理过程。研究发现在骨质疏松症中一些miRNAs确实发生了异常表达,但它们是否控制成骨分化和骨骼形成以及是否可以成为骨质疏松症的治疗靶点,仍值得深入研究。淫羊藿苷(Icariin,ICA)是具有促骨形成功效的淫羊藿的主要黄酮类活性物质。在本研究中,我们通过高通量测序技术筛选了ICA处理组和未处理组之间差异表达的miRNAs,并通过Real-time PCR对部分差异miRNAs进行了验证。根据靶基因和成骨分化相关信号通路的预测,从中挑选了下调倍数较大的miR-664-3p进行深入研究。Osterix(Osx)是成骨细胞分化中必不可少的关键转录因子,Smad4是调节成骨细胞分化的重要信号通路BMP2通路的通用信号转导分子。生物信息学分析提示:Smad4和Osx均是miR-664-3p的靶基因。荧光素酶报告基因实验和Real-time PCR及Western blot检测结果表明,Smad4和Osx确实是miR-664-3p的直接靶基因,且mi R-664-3p通过抑制靶基因的翻译而下调靶基因的表达(Smad4和Osx的mRNA表达不受影响)。此外,通过成骨细胞分化标志物碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin,OC)、骨涎蛋白(Bone sialoprotein,BSP)和I型胶原(Collagen I,Colla1)的检测以及ALP活性检测和矿化结节形成等实验,我们发现过表达miR-664-3p能抑制成骨细胞分化,而抑制mi R-664-3p的表达则能促进成骨细胞分化。Real-time PCR和ALP染色结果表明,过表达Smad4或Osx均能逆转miR-664-3p的抑制成骨细胞分化作用。此外,我们检测了成骨细胞分化过程中miR-664-3p的表达情况,结果发现miR-664-3p的表达在成骨细胞分化过程中持续下调。随后通过卵巢摘除术,我们构建了小鼠骨质疏松模型,并对骨质疏松模型小鼠进行ICA灌胃处理。结果表明,在骨质疏松小鼠中miR-664-3p的表达明显上调,而ICA处理能减少骨量的丢失并改善骨小梁微结构。生物信息学分析显示,人源Smad4和Osx基因均为miR-664-3p的靶基因。且通过mimic转染,我们发现人源miR-664-3p能显著抑制人源Smad4和Osx的蛋白表达。鉴定与骨质疏松症相关的血清mi RNAs,并将其作为疾病诊断分子标志物,是开发新的诊断和治疗方法的关键一步。通过检测26例骨质疏松病人和18例匹配对照(年龄、性别等相互匹配)血清中的miR-664-3p,初步发现骨质疏松病人血清中的miR-664-3p表达显著高于对照。总之,我们的研究结果首次证明:1.miR-664-3p参与ICA诱导的成骨细胞分化。2.miR-664-3p通过下调靶基因的表达而抑制成骨细胞分化,进而促进骨质疏松发生;3.通过下调miR-664-3p进而上调Smad4和Osx的表达是ICA治疗骨质疏松的机制之一。4.miR-664-3p可以作为骨质疏松症诊断/辅助诊断的分子标志物,并有可能成为临床上骨质疏松治疗和预后的新靶点。
[Abstract]:Osterix ( Osx ) is a key transcription factor which plays a role in the differentiation of osteoblasts . The expression of miR - 664 - p in serum of 26 patients with osteoporosis and 18 matched controls ( age , sex , etc . ) was significantly higher than that of control .
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R580
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 关庆义,张智海;甲状旁腺功能亢进致骨质疏松一例报告[J];中华骨科杂志;2000年06期
2 ;焦虑可导致骨质疏松[J];浙江中医杂志;2000年11期
3 施刚,王虹;骨质疏松症的钙疗法[J];国外医药(合成药 生化药 制剂分册);2000年06期
4 武军华;史克-比彻姆公司放弃艾多昔芬对骨质疏松的治疗[J];国外医学.药学分册;2000年01期
5 ;浙江省老年学会骨质疏松委员会学术研讨会在杭召开[J];浙江临床医学;2000年07期
6 吴洁,曹缵孙;骨质疏松症的诊断和治疗新进展[J];国外医学.妇幼保健分册;2000年02期
7 韩祖斌;前言——深入开展骨质疏松症的防治[J];实用老年医学;2000年03期
8 杨涛;骨质疏松症的临床表现[J];中国乡村医生;2000年11期
9 施法兴;骨质疏松症的诊断及其治疗[J];江苏临床医学杂志;2000年01期
10 张红喜,邓旭林,蔡德鸿;论防治骨质疏松的难点和对策[J];医学与社会;2000年06期
相关会议论文 前10条
1 郭晓琴;;浅谈骨质疏松症营养防治的方法[A];中国营养学会第12届全国临床营养学术会议资料汇编[C];2009年
2 陈锦平;;骨质疏松症[A];慢性病健康教育能力培训暨糖尿病教育论坛资料汇编[C];2008年
3 邹小娟;戴红;;中药治疗骨质疏松症的研究概况[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
4 刘国辉;成德亮;杨述华;;骨质疏松相关因素分析[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
5 陈瑾瑜;彭永德;游利;;骨质疏松管理模式初探[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
6 晁爱军;;骨质疏松的经济和社会负担[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
7 尹大庆;荣国威;吴海宁;赵新华;;骨质疏松门诊女性958例临床分析[A];全国老年骨质疏松专题学术研讨会论文汇编[C];2000年
8 张莹;高治国;王雪萍;;大庆地区社区骨质疏松症的防治[A];全国老年骨质疏松专题学术研讨会论文汇编[C];2000年
9 凌浩进;;中西结合对骨质疏松症诊治与预防的摘要[A];全国老年骨质疏松专题学术研讨会论文汇编[C];2000年
10 喻恒锋;;骨质疏松症几种治疗手段搭配疗效比较[A];全国老年骨质疏松专题学术研讨会论文汇编[C];2000年
相关重要报纸文章 前10条
1 通讯员 应述辉邋涂晓晨 记者 李艳梅;骨质疏松症正成为流行病[N];长江日报;2007年
2 中国骨质疏松基金会秘书长 赵燕玲;骨质疏松一分钟小测试[N];健康时报;2007年
3 主任医师 孙清廉;导致骨质疏松的危险因素[N];上海中医药报;2007年
4 赵靖;补钙＋运动 有效预防骨质疏松[N];中国消费者报;2007年
5 记者 于丽珊邋通讯员 霍冉;中医药防治骨质疏松功效受关注[N];中国中医药报;2007年
6 李敏;简单运动治疗骨质疏松[N];中国医药报;2007年
7 牛雨;小心！骨质疏松就在身边[N];医药养生保健报;2007年
8 崔玉艳 佳学;乱吃补钙产品反而易得骨质疏松[N];江苏科技报;2008年
9 记者 张东风;专家呼吁：关注中老年人骨质疏松防治[N];中国中医药报;2008年
10 市一医院骨科 李军;骨质疏松的预防与治疗[N];保定日报;2008年
相关博士学位论文 前10条
1 李忻忆;离子束分析技术对骨质疏松症的研究及在其他领域中的应用[D];复旦大学;2014年
2 安奇君;抑制Evi1基因表达促进BMSCs成骨分化治疗骨质疏松症的研究[D];山西医科大学;2015年
3 周锐;维生素D在成骨细胞骨分化中的分子机制及骨质疏松与动脉钙化相关性的临床研究[D];第三军医大学;2015年
4 孙晓迪;雌激素替代治疗对去势联合废用性骨质疏松的影响[D];山东大学;2015年
5 黄旭;间歇式高频率低载荷机械振动治疗骨质疏松的动物实验研究与短期临床观察[D];吉林大学;2016年
6 姜波;基于数据挖掘的倪康裕老师治疗创伤后废用性骨质疏松症的经验研究[D];浙江中医药大学;2016年
7 司志华;神经肌肉促进术对脑梗死大鼠运动功能、骨质疏松和护骨素的影响[D];山东大学;2016年
8 胡航;孕期咖啡因暴露所致成年子代骨质疏松易感的宫内编程机制[D];武汉大学;2015年
9 罗朵生;调肝启枢化浊法治疗原发性骨质疏松症代谢组学研究[D];广州中医药大学;2016年
10 吴穹;DKK1合成多肽对治疗骨质疏松症和成骨作用的研究[D];南京大学;2011年
相关硕士学位论文 前10条
1 徐鹿鹿;骨密度异常人群骨质疏松症相关知识知晓情况的调查[D];遵义医学院;2015年
2 张燕妮;单中心MHD患者骨质疏松患病情况、危险因素调查及骨折和跌倒风险预测[D];川北医学院;2015年
3 王小华;老年人骨质疏松的影响因素分析[D];河北联合大学;2014年
4 张冲;石家庄市在校女大学生综合骨评价值现况调查及影响因素分析[D];河北医科大学;2015年
5 林葳;成年猪椎体类骨质疏松性生物力学模型的快速建立[D];河北医科大学;2015年
6 王婧;老年慢性心力衰竭患者骨质疏松的临床分析[D];石河子大学;2015年
7 王雪洁;2型糖尿病患者骨质疏松症的影响因素分析及超声诊断的应用价值[D];石河子大学;2015年
8 余光书;补肾健脾方对骨质疏松性髋部骨折术后肌力与骨量的影响[D];福建中医药大学;2015年
9 李明;慢性风湿免疫病儿童骨质疏松症的临床分析暨危险因素探讨[D];北京协和医学院;2015年
10 祁宇轩;磁共振扩散加权成像技术在骨质疏松诊断中的应用价值[D];河北医科大学;2015年
，本文编号：2111444
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/2111444.html
