维生素D对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞中神经酰胺水平的影响

发布时间：2018-07-10 18:38

  本文选题：神经酰胺 + PC细胞　； 参考：《山东大学学报(医学版)》2017年12期

【摘要】：目的研究维生素D(VD)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞中神经酰胺(Cer)水平的影响。方法采用C2-Cer(20μmol/L)刺激PC12细胞,MTT法检测Cer对PC12细胞增殖的影响;高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS)测定VD(50或0 nmol/L)处理的PC12细胞中C16:0-Cer的含量。qRT-PCR法测定VD(50或0 nmol/L)处理的PC12细胞中Cer代谢相关酶mRNA的表达;Western blotting法检测VD(200、100、50、25、12.5和0 nmol/L)处理后,PC12细胞中SPTLC1和Cers6蛋白的相对表达量。结果 C2-Cer能抑制PC12细胞的活性,IC50为2.800μmol/L。与0 nmol/L VD相比,50 nmol/L VD降低了PC12细胞中C16:0-Cer的含量[(19.37±0.61)ng/m L vs(16.50±0.10)ng/m L,P=0.010],升高了SPTLC1 mRNA的表达水平(P=0.001)和Cers6mRNA的表达水平(P0.001),降低了SPTLC1蛋白的相对表达量(P=0.032),升高了Cers6蛋白的相对表达量(P=0.020)。结论 VD降低PC12中Cer的含量,可能与降低SPTLC1蛋白表达有关。
[Abstract]:Objective to study the effect of vitamin D (VD) on the level of ceramide (Cer) in rat adrenal pheochromocytoma cell line PC12. Methods the effects of C2-Cer (20 渭 mol / L) on the proliferation of PC12 cells were detected by MTT assay. Determination of C160-Cer content in PC12 cells treated with VD (50 or 0 nmol / L) by High performance liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry (HPLC-MS). Quantitative RT-PCR method to detect the expression of Cer Metabolism related enzymes mRNA in PC12 cells treated with VD (50 or 0 nmol / L). Western blotting method to detect the expression of Cer Metabolism related enzymes mRNA in PC12 cells treated with VD (20010050252512.5 and 0 nmol / L) The relative expression of SPTLC1 and Cers6 protein. Results C2-Cer could inhibit the activity of PC12 cells and the IC50 was 2.800 渭 mol / L. Compared with 0 nmol / L VD, 50 nmol / L VD decreased the content of C16: 0-Cer in PC12 cells [(19.37 卤0.61) ng/m L vs (16.50 卤0.10) ng/m / L], increased the expression of SPTLC1 mRNA (P0. 001) and Cers6 mRNA (P0. 001), decreased the relative expression of SPTLC1 protein (P0. 032) and increased the relative expression of Cers6 protein (P0. 020). Conclusion VD decreases the content of Cer in PC12, which may be related to the decrease of SPTLC1 protein expression.
【作者单位】： 山东大学基础医学院生物化学与分子生物学系;
【基金】：国家自然科学基金(81271319)
【分类号】：R744.51

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