黄连与生地含药血清改善棕榈酸诱导的NIT
本文关键词:自噬对胰腺脂质沉积及胰岛素敏感性的影响,由笔耕文化传播整理发布。
《华中科技大学》 2012年
黄连与生地含药血清改善棕榈酸诱导的NIT-1胰岛β细胞损伤的分子机制
管炜
【摘要】:目的 通过观察比较黄连与生地及其配伍含药血清改善棕榈酸诱导NIT-1胰岛β细胞的凋亡及功能损伤的情况,进而从胰岛细胞凋亡途径与葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)的信号通路两方面探讨黄连与生地及其配伍减轻脂肪酸对胰岛细胞“脂毒性”损伤的作用,分析可能的分子机制。 方法 第一部分黄连与生地含药血清改善棕榈酸诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡 采用0.25mmol/L的棕榈酸(palmitate,PA)干预胰岛NIT-1细胞24h的“脂毒性”模型,将NIT-1细胞分为模型组、黄连含药血清组、生地含药血清组、黄连-生地含药血清组、瑞格列奈组,另设空白对照组及正常血清组,用Annexin V-PI双标记法流式细胞术检测细胞凋亡率。 第二部分黄连与生地含药血清改善棕榈酸诱导的NIT-1胰岛β细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌功能损伤的分子机制 用含不同浓度葡萄糖的KRBH溶液刺激各组NIT-1细胞胰岛素释放,生物发光法检测细胞内ATP/ADP,膜片钳测定细胞的K+ATP通道电流,膜片钳测定细胞的Ca~(2+)通道电流,激光共聚焦显微镜测胞内Ca~(2+)浓度,放免法测各组胰岛素浓度。 结果 第一部分黄连与生地含药血清改善棕榈酸诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡 与空白对照组比,模型组凋亡率明显升高(P0.01),各个干预组凋亡率均低于模型组(P0.01),黄连-生地配伍血清组凋亡率低于正常血清组、生地血清组及黄血清组(P0.01) 第二部分黄连与生地含药血清改善棕榈酸诱导的NIT-1胰岛β细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌功能损伤的分子机制 1.与空白对照组比,模型组细胞胰岛素浓度明显降低(P0.01),各干预组胰岛素浓度明显高于模型组(P0.01),其中,黄连-生地配伍血清组胰岛素浓度明显高于正常血清组、黄连血清组和生地血清组(P0.05) 2.与空白对照组比,模型组细胞内ATP/ADP的比值明显降低(P0.01),各干预组比值明显高于模型组(P0.01),其中,黄连-生地配伍血清组ATP/ADP浓度明显高于正常血清组、生地血清组和黄连血清组(P0.05) 3.与空白对照组比,模型组细胞K+ATP离子通道电流明显升高(P0.01),各干预组细胞K+ATP离子通道电流明显低于模型组(P0.01),其中,黄连-生地配伍血清组较正常血清组、黄连血清组和生地血清组显著降低(P0.05) 4.与空白对照组比,模型组细胞Ca~(2+)离子通道电流明显降低(P0.01),各干预组细胞Ca~(2+)离子通道电流明显高于模型组(P0.01),其中,黄连-生地配伍血清组较正常血清组、黄连血清组和生地血清组显著升高(P0.01) 5.与空白对照组比,模型组细胞内钙离子浓度明显降低(P0.01),各干预组细胞内钙离子浓度明显高于模型组(P0.01),其中,黄连-生地配伍血清组较正常血清组、黄连血清组和生地血清组显著升高(P0.05)。 结论 1.黄连和生地及其配伍能减少棕榈酸诱导NIT-1胰岛β细胞的凋亡,且配伍组优于单味药组。 2.黄连和生地及其配伍能改善棕榈酸诱导NIT-1胰岛β细胞损伤的GSIS功能,可能通过调节细胞内的代谢使ATP/ADP升高,K+ATP通道关闭,胰岛β细胞去极化,电压依赖性Ca~(2+)通道开放,,Ca~(2+)内流而触发胰岛素分泌,从而保护PA损伤的胰岛细胞GSIS的功能,且配伍组优于单味药组。
【关键词】:
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R285;R587.1
【目录】:
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