糖尿病大鼠主动脉中HMGA1表达变化的研究

发布时间：2018-07-17 00:28

【摘要】：目的应用高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射构建大鼠2型糖尿病模型,观察糖尿病状态下大鼠主动脉血管组织中高迁移率族蛋白A1(high mobility group A1,HMGA1)m RNA和蛋白的表达水平,并探讨可能影响其变化的病理因素,试图为糖尿病血管并发症的发病机制及防治研究提供新的方向。方法4周龄雄性SD大鼠按随机分组方法分为:正常对照组(normol contol group,NC)、高糖高脂喂养组(high-sucrose-high-fat diets group,HSFDs)、糖尿病造模组(diabetes mellitus group,DM)。NC组懫用普通标准大鼠饲料喂养,HSFDs组及DM组均懫用高糖高脂饮食喂养,起始及喂养4周后分别测量体重(body weight,BW)并检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、非空腹血糖(nonfasting blood glucose,NFBG)、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)及空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)等相关生化指标的水平。4周末,DM组大鼠腹腔注射STZ(30mg/Kg),3天后开始每周检测模型组大鼠NFBG,观察血糖升高水平。第8周末处死所有大鼠,采集血液标本检测FPG、NFBG、TC、TG、LDL、HDL、FINS及糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin A1c,HBA1c)等生化指标;留取腹主动脉血管组织,HE染色法观察血管组织形态学改变,q RT-PCR、Western Blot及免疫组化法分别检测血管中HMGA1 m RNA和蛋白表达水平。利用Spearman法分别对FPG、NFBG、TC、TG、LDL、HDL和FINS与HMGA1 m RNA及蛋白表达水平进行相关性分析。结果(1)起始时及喂养4周后,各组大鼠BW、FBG、NFBG、FINS及胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)等指标均无明显差异(P0.05),起始时各组大鼠TG、TC、LDL及HDL水平亦无显著差异(P0.05)。注射STZ后第3、10及21天测DM组大鼠NFBG均明显升高(11.1mmol/l)。第8周末,DM组FBG、NFBG、Hb A1c、TG、TC、LDL及HDL水平较NC及HSFD组均明显增加,而BW、FINS及ISI则明显下降;HSFDs组的BW、FINS、TC及LDL水平较NC组明显增加,ISI则明显下降,以上差异均有统计学意义(P0.05)。(2)荧光定量PCR结果显示,DM组大鼠腹主动脉HMGA1的m RNA表达水平明显高于NC及HSFDs组(P0.05);HSFDs组HMGA1的m RNA表达水平稍高于NC组,但差异无统计学意义(P0.05)。(3)Western-blot及免疫组化结果均显示,DM组大鼠腹主动脉HMGA1蛋白表达水平明显高于NC及HSFDs组(P0.05);HSFDs组HMGA1蛋白表达水平稍高于NC组,但差异无统计学意义(P0.05);此外,免疫组化结果还显示,HMGA1蛋白主要定位于血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)核中。(4)HE染色结果显示,NC组血管内膜平整、光滑,血管平滑肌细胞排列整齐、紧密;DM组血管内膜欠光滑,血管中膜增厚,平滑肌细胞质基质疏松;HSFDs组血管形态介于前二者之间。对各组血管内-中膜厚度(intimia-media thickness,IMT)进行测量,结果显示,HSFDs组血管内-中膜厚度较NC组增加,DM组较NC及HSFDs组增加,差异均有统计学意义(P0.05)。(5)对FPG、NFBG、TC、TG、LDL、HDL及FINS与HMGA1 m RNA及蛋白表达水平进行Spearman秩相关分析,结果显示FBG、NFBG、TC及LDL水平均与大鼠主动脉中HMGA1的表达水平呈正相关性(FBG:HMGA1m RNA:r=0.424,P=0.039,HMGA1 protein(IOD):r=0.549,P=0.005;NFBG:HMGA1 m RNA:r=0.584,P=0.003,HMGA1 protein(IOD):r=0.646,P=0.001;TC:HMGA1 m RNA:r=0.544,P=0.006,HMGA1protein(IOD):r=0.726,P=0.000;LDL:HMGA1 m RNA:r=0.636,P=0.001,HMGA1 protein(IOD):r=0.756,P=0.000)。结论(1)高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射可成功构建大鼠2型糖尿病模型。(2)糖尿病大鼠主动脉可发生中膜增厚,平滑肌细胞质基质疏松等形态改变;主动脉组织中HMGA1m RNA及蛋白表达水平均增加。(3)FBG、NFBG、TC及LDL均与HMGA1表达水平呈正相关性,可能是影响动脉血管组织中HMGA1表达变化的病理因素。
[Abstract]:Objective To investigate the expression level of high mobility group A1 ( HMG A1 ) m RNA and protein in aorta vascular tissue of diabetic rats by intraperitoneal injection of high sugar and high fat diet and to explore the pathological factors which might affect the changes of diabetes mellitus . Methods Four week old male SD rats were divided into normal control group ( NC ) , high - sugar - high - fat diets group ( HSFDs ) , diabetes mellitus group ( DM ) . 鎳�鐢ㄩ珮绯栭珮鑴傞ギ椋熷杺鍏�,璧峰�嬪強鍠傚叄�

本文编号：2128223