PRDM16、CIDE-B蛋白在脂肪组织中的表达及与肥胖的关系

发布时间：2018-10-29 15:49

【摘要】：目的为探讨PRDM16、CIDE-B在成人脂肪组织中的表达水平及与肥胖的关系,本研究通过检测PRDM16、CIDE-B蛋白分别在正常体重者和超重肥胖者的皮下脂肪和腹腔大网膜脂肪组织中的表达水平,发现PRDM16、CIDE-B蛋白相对表达水平与超重肥胖的关系;同时检验PRDM16、CIDE-B基因启动子甲基化水平与二者蛋白相对表达量的关系,探讨PRDM16、CIDE-B基因甲基化与蛋白表达的关系。方法选取医院的腹部手术患者126例,男性25例,女性101例,排除孕妇、残障或精神障碍者、继发性肥胖者、恶性肿瘤患者及乙肝、艾滋病、结核等传染性疾病患者。收集各研究对象的身高、体重、年龄、血糖值等生理生化指标。采用我国肥胖诊断标准,将研究对象分为正常体重组(18.5kg/m2BMI24kg/m2)和超重肥胖组(BMI≥24kg/m2)。首先分别提取皮下脂肪和大网膜脂肪组织的总蛋白,然后采用蛋白质免疫印迹技术,其中PRDM16目的蛋白电泳采用8%分离胶,5%浓缩胶,CIDE-B蛋白电泳采用12%分离胶,5%分离胶,电泳过后转膜2小时,恒压设为80V,最后进行一抗二抗免疫反应,将配置混合好的ECL超敏发光液在凝胶成像系统中与免疫反应后的PVDF膜接触进行发光反应,将所得条带图进行拍照保存。采用Gel pro Analyzer软件分析目的条带的灰度值,每一个样本的目的蛋白相对表达量以目的条带的灰度值和相应样本GAPDH的条带灰度值的比值表示。采用IBM SPSS Statistics 21.0软件进行统计学分析,两组差异比较采用两独立样本t检验或Mann-Whitney U检验,三组差异比较采用方方差分析或Kruskal-Wallis检验,计数资料采用χ2检验;各生理生化因素对蛋白相对表达量的影响程度分析采用多重线性回归;皮下和大网膜脂肪组织目的蛋白的表达量差异采用配对t检验或Wilcoxon符号秩和检验;检验水准α=0.05。结果1.配对样本t检验结果显示,PRDM16蛋白在皮下脂肪组织中的相对表达量高于腹腔大网膜脂肪组织,差异没有统计学意义(t=1.001,P=0.319);CIDE-B蛋白在皮下脂肪组织中的相对表达量高于腹腔大网膜脂肪组织,差异有统计学意义(t=2.340,P=0.021)。2.皮下脂肪组织的PRDM16蛋白的相对表达量在正常组和超重肥胖组的差异有统计学意义(t=2.587,P=0.011),且正常组的相对表达量高于超重肥胖组。大网膜脂肪组织的PRDM16基因的相对表达量在正常体重组和超重肥胖组之间的差异没有统计学意义(t=1.671,P=0.097)。3.皮下脂肪组织的CIDE-B基因的相对表达量在正常体重组和超重肥胖组的差异没有统计学意义(t=1.558,P=0.122)。大网膜脂肪组织的CIDE-B基因的相对表达量在正常体重组和超重肥胖组间的差异有统计学意义(t=2.253,P=0.026),且超重肥胖组的CIDE-B的相对表达量高于正常体重组。4.皮下脂肪组织中,收缩压140mm Hg的CIDE-B基因的蛋白相对表达量小于收缩压≥140mm Hg的CIDE-B的蛋白相对表达量,且差异有统计学意义(t=2.319,P=0.025);大网膜脂肪组织中,舒张压90mm Hg的CIDE-B基因的蛋白相对表达量小于舒张压≥90mm Hg的CIDE-B的蛋白相对表达量,且差异有统计学意义(t=2.290,P=0.024)。三组总胆固醇水平的CIDE-B蛋白相对表达量的差异有统计学意义(F=7.160,P=0.028),进一步多重比较结果显示,3.0TC5.2mmol/L的CIDE-B蛋白表达低于TC≥5.2mmol/L的蛋白表达,且差异有统计学意义(P=0.026)。5.各生理生化指标与蛋白相对表达量的多重线性回归分析结果显示,BMI与皮下PRDM16蛋白相对表达量有关(β=-0.282,P=0.004),BMI水平低者的PRDM16蛋白表达量高于BMI水平高者。BMI与皮下CIDE-B蛋白相对表达量有关(β=0.213,P=0.025),BMI水平高者的CIDE-B蛋白表达量高于BMI水平低者。6.皮下脂肪组织PRDM16蛋白相对表达量与大网膜PRDM16蛋白相对表达量呈显著的正相关(r=0.482,P0.001),皮下脂肪组织CIDE-B蛋白相对表达量与大网膜CIDE-B相对表达量呈显著正相关(r=0.363,P0.001)。而PRDM16与CIDE-B的蛋白相对表达量不存在线性相关(P0.05)。7.皮下脂肪组织中,PRDM16基因的CPG_28位点的甲基化水平与蛋白相对表达量的关系存在统计学意义(β=-3.762,P=0.032),腹腔大网膜脂肪组织中,PRDM16基因的CPG_28(β=-4.726,P=0.002)位点的甲基化水平与蛋白相对表达量的关系存在统计学意义。甲基化水平高的蛋白表达水平较低。结论PRDM16、CIDE-B蛋白表达与成人肥胖存在一定的相关性,皮下脂肪组织中,正常体重者的PRDM16蛋白相对表达量高于超重肥胖者;大网膜脂肪组织中,正常体重者的CIDE-B蛋白相对表达量低于超重肥胖者;CIDE-B蛋白相对表达量与收缩压、舒张压、TC水平可能存在联系;此外,PRDM16基因启动子CPG_28位点的甲基化水平越高,蛋白表达水平越低。
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【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R589.2

【参考文献】