津力达颗粒对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究

发布时间：2017-01-05 20:50

  本文关键词：津力达颗粒对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《河北医科大学》 2015年

津力达颗粒对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究

段力园  

【摘要】：胰岛素抵抗(IR)是2型糖尿病及多种代谢性疾病的共同病理生理基础。而氧化应激是引起IR的关键性因素。既往有研究表明,复方制剂津力达(由人参、黄精、苍术、苦参等17味中药组成)可有效降血糖,改善2型糖尿病患者的症状,并具有保护胰岛β细胞、增加胰岛素分泌、改善IR的作用。但其具体机制尚不明确,本研究拟通过观察津力达在体外细胞水平对高脂诱导的Hep G2细胞IR的影响,探讨其改善IR的机制,为临床用药提供理论依据。目的:观察中药复方制剂津力达对高脂诱导的Hep G2细胞胰岛素抵抗以及氧化应激的影响,探讨津力达改善胰岛素抵抗的机制。方法:采用高脂(含0.25 mmol/L棕榈酸培养基)干预法建立Hep G2细胞胰岛素抵抗模型。Hep G2细胞随机分为2组,正常对照组和高脂培养基组,分别干预24小时后采用葡萄糖氧化酶法测定培养基中葡萄糖浓度,计算葡萄糖摄取率,判断造模成功。造模成功后将高脂培养基组随机分为5组,即高脂对照组(PA)、二甲双胍培养基组(Met)(二甲双胍浓度为0.2 mg/m L)、津力达低剂量组(JLD-L)(津力达浓度为0.75 mg/m L)、津力达中剂量组(JLD-M)(津力达浓度为1.5 mg/m L)和津力达高剂量组(JLD-H)(津力达浓度为3.0 mg/m L),同时设立正常培养基对照组(Con),二甲双胍为阳性药物对照。分别干预48小时后收集细胞,采用相应试剂盒测定各组Hep G2细胞氧化应激相关指标,即还原型谷胱甘肽(GSH)、脂质过氧化物(LPO)的含量,过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;DHE荧光染色检测Hep G2细胞活性氧簇(ROS)的含量;Real-Time PCR检测Hep G2细胞胰岛素信号通路上胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶β(AKT)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的m RNA表达水平;Western Blot检测Hep G2细胞PI3K总蛋白表达水平,以及IRS-1、AKT、c-jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的总蛋白及磷酸化蛋白水平。结果:1 Hep G2细胞的胰岛素抵抗体外模型建立Hep G2细胞培养24小时后PA组培养基中葡萄糖含量较Con组高,差异有统计学意义(P0.05),胰岛素敏感性下降,表明用软脂酸诱导胰岛素抵抗体外细胞模型成功建立。2 MTT法检测干预对Hep G2细胞增殖的影响与Con组相比,PA组分别干预24h、48h能够使Hep G2细胞抑制率升高,增值率下降(P0.05);与PA组相比,Met、JLD-L、JLD-M、JLD-H均能提高Hep G2细胞增值率(P0.05),但未能恢复至Con组水平。3 Hep G2细胞胰岛素敏感性的变化(1)胰岛素信号通路相关指标基因表达水平的变化与Con组相比,PA组Hep G2细胞INSR、IRS-1、PI3K、AKT、GLUT2的m RNA表达下降(P0.05);与PA组相比,JLD-L、JLD-M干预上调IRS-1、AKT、GLUT2的m RNA表达(P0.05),而对INSR、PI3K无明显影响(P0.05);Met以及JLD-H均可上调INSR、IRS-1、PI3K、AKT、GLUT2的m RNA表达(P0.05),但未能恢复至Con组水平。(2)胰岛素信号通路相关指标蛋白表达水平的变化与Con组相比,PA组p-IRS-1/IRS-1比值显著升高,p-AKT/AKT、PI3K/β-actin比值显著降低(P0.05);与PA组相比,Met、JLD-M、JLD-H干预组p-IRS-1/IRS-1比值显著降低,p-AKT/AKT、PI3K/β-actin比值显著增高,差异均有统计学意义(P0.05),JLD-L干预虽能降低p-IRS-1/IRS-1比值,但未能提高p-AKT/AKT、PI3K/β-actin比值。4 Hep G2细胞氧化应激行DHE荧光染色显示,与Con组相比,PA组的细胞核内的红色荧光明显增强,表示细胞内ROS含量明显增加;不同浓度的津力达及二甲双胍干预可以显著减少红色荧光强度,减少ROS生成。Hep G2细胞经高脂孵育后,抗氧化酶GSH-Px、T-SOD、CAT的活性均较Con组下降(P0.05),GSH含量降低(P0.05),LPO含量明显增加(P0.05),药物干预后,Met、JLD-L、JLD-M、JLD-H组LPO含量较PA组减少(P0.05),T-SOD、GSH-Px、CAT活性以及GSH含量较PA组增高(P0.05),但药物干预组组间没有明显差异(P0.05)。5 JNK、p38MAPK信号通路与Con组相比,PA组p-JNK/JNK和p-p38MAPK/p38MAPK比值显著升高(P0.05);与PA组相比,津力达各个浓度组及二甲双胍干预可使p-JNK/JNK和p-p38MAPK/p38MAPK比值显著降低(P0.05),但二甲双胍能使上述比值恢复至正常水平,与对照组无显著差异(P0.05)。结论:1津力达作用于胰岛素信号通路,减轻Hep G2细胞的胰岛素抵抗。2津力达改善Hep G2细胞氧化应激,减少ROS生成,降低LPO含量,恢复抗氧化酶如SOD、GSH-Px、CAT活性,增加GSH含量。3津力达抑制肝脏JNK、p38MAPK应激信号通路,恢复Hep G2细胞胰岛素信号传导。总之,津力达可改善高脂诱导的Hep G2细胞胰岛素敏感性,可能是通过抑制JNK和p38MAPK信号通路,降低Hep G2细胞氧化应激实现的。

【关键词】：
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.1
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 段力园;赵静;刘颐轩;宋光耀;;津力达对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠血清瘦素、脂联素的影响[J];解放军医药杂志;2014年12期

2 李长贵,宁光,陈家伦;胰岛素抵抗HepG2细胞模型的建立及鉴定[J];中国糖尿病杂志;1999年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 蒙东才;曹莉;;葛根素对高胰岛素环境下大鼠肝细胞一氧化氮合成的影响[J];抗感染药学;2008年01期

2 卢兆莲;黄才国;;肉桂多酚改善HepG2细胞胰岛素抵抗作用研究[J];辽宁中医药大学学报;2013年02期

3 颜翠萍;赵宇;韩江莉;;绝经后女性血清脂联素与冠心病的相关性[J];临床荟萃;2015年06期

4 曹莉;茅彩萍;顾振纶;;葛根素对高胰岛素环境下大鼠肝细胞葡萄糖消耗的影响[J];中国血液流变学杂志;2007年02期

5 张汝学;贾正平;李茂星;郭丽民;张小华;;体外胰岛素抵抗细胞模型的建立及在药物筛选中的应用[J];中国药理学通报;2008年07期

6 万学东;王西明;夏炎枝;段秋红;秦莉;关中宏;;软脂酸诱导HepG2细胞胰岛素抵抗及其机理[J];江苏医药;2006年01期

7 傅光翊;梁良;刘炎;丁启龙;;米非司酮对胰岛素抵抗大鼠心肌损伤的保护作用及其机制[J];药学进展;2010年08期

8 黄志卓;陈燕波;常翠青;;氯原酸对高胰岛素与高油酸状态下HepG2细胞葡萄糖利用的影响[J];营养学报;2009年05期

9 李峰,王文龙,田宗城,刘美莲,谢平,宋惠萍;17β雌二醇增强小鼠肌原细胞的胰岛素效应[J];中国病理生理杂志;2003年12期

10 邹玲莉;韩国柱;肇小茗;李秋莎;周琴;姜丽平;吕莉;;茶多酚对胰岛素抵抗及非胰岛素抵抗HepG_2细胞体外糖脂代谢的影响[J];中成药;2010年08期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 柳红芳;加味大柴胡颗粒对2型糖尿病胰岛素抵抗影响的临床和实验研究[D];北京中医药大学;2002年

2 姜淼;黄连人参对药改善2型糖尿病胰岛素抵抗机制研究[D];北京中医药大学;2006年

3 谢伟东;糖尿病动物脂代谢变化及其菠萝叶对糖脂代谢的调节作用[D];中国协和医科大学;2005年

4 刘毅;小檗碱对3T3-L1脂肪细胞增殖、分化、凋亡及脂肪因子的影响[D];复旦大学;2007年

5 甘可欣;Mfn2表达对高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏糖、脂代谢的影响及机制研究[D];河北医科大学;2012年

6 王念;黄芪多糖抑制2型糖尿病大鼠肝脏PTP1B的表达改善胰岛素抵抗的机制[D];武汉大学;2009年

7 周雯;委陵菜黄酮衍生物抗糖尿病活性及其作用机制研究[D];天津医科大学;2013年

8 陈佩;益生乳酸菌的降糖作用及其机制的研究[D];江南大学;2014年

9 姜保平;两色金鸡菊茶饮对2型糖尿病胰岛素抵抗的预防作用及机制研究[D];北京协和医学院;2015年

10 吴欣莉;南非传统药物Sutherlandia frutescens对小鼠糖脂代谢的影响及机制的研究[D];北京中医药大学;2015年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 石惠荣;冯玉平;李雪梅;罗淑荣;;原发性高血压患者血清抵抗素与动脉粥样硬化的临床研究[J];临床荟萃;2013年06期

2 国蓉;邹俊杰;何逸飞;刘志民;;津力达口服液对2型糖尿病模型大鼠血液和肾脏氧化应激标志物的影响[J];解放军医药杂志;2013年08期

3 白雪琴;韩萍;;代谢综合征患病率的调查及健康管理方案研究[J];中国疗养医学;2011年01期

4 王敬;宋光耀;高宇;曲东明;;银杏叶提取物对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响[J];中国老年学杂志;2007年15期

5 张喜芬;杨立波;孙利;任君霞;韩硕龙;田野;高学东;;津力达颗粒治疗2型糖尿病随机双盲临床研究[J];疑难病杂志;2013年05期

6 蒋美云;;津力达对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响[J];中国医药指南;2013年08期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 傅诚强;胰岛素抵抗和择期性手术[J];国外医学.外科学分册;2001年03期

2 贾伟平;中国人群胰岛素抵抗的状况[J];国外医学.内分泌学分册;2002年04期

3 宁光;李长贵;洪洁;汤正义;李果;龚艳春;彭怡文;郭冀珍;沈卫峰;商淑华;罗邦尧;陈家伦;;胰岛素抵抗基础和临床研究[J];医学研究通讯;2002年11期

4 姚小皓,沈凯,李学军;胰岛素对中枢神经系统疾病的影响[J];生理科学进展;2003年01期

5 柯红林;;2型糖尿病中胰岛素抵抗发生机制的研究进展[J];国外医学(老年医学分册);2003年03期

6 常桂娟;胰岛素抵抗的环境因素[J];现代诊断与治疗;2004年02期

7 米杰 ,张力;胰岛素抵抗[J];中华预防医学杂志;2004年04期

8 王继旺,张素华,任伟,杜娟,陈静,包柄楠,汪志红,苗青;吸烟与胰岛素抵抗的相关性调查与分析[J];中国公共卫生;2004年08期

9 阳柳雪;刘红;;可溶性肿瘤坏死因子受体2与胰岛素抵抗[J];中国医学文摘.内科学;2004年01期

10 康艳明;阳跃忠;;胰岛素抵抗与缺血性心脑血管病变[J];中国医学文摘.内科学;2004年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 陈艳秋;宗敏;华莉;李臻;肖菲;孙建琴;;2型糖尿病患者肝脏脂肪与胰岛素抵抗的关系[A];中国营养学会老年营养分会第七次全国营养学术交流会“营养与成功老龄化”暨国家级继续教育项目“神经系统疾病医学营养治疗”资料汇编[C];2010年

2 陈艳秋;陈敏;宗敏;华莉;李臻;张鑫毅;孙建琴;;2型糖尿病患者肝脏脂肪分布与胰岛素抵抗[A];老年营养研究进展与老年营养供餐规范研讨会暨糖尿病肾病医学营养治疗进展学习班资料汇编[C];2011年

3 宋晓敏;耿秀琴;郭长磊;;胰岛素抵抗几个相关因素在公安人群中的状态与分析[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年

4 游捷;陈瑶;黄培基;林哲章;;血清可溶性肿瘤坏死因子受体与胰岛素抵抗的关系[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年

5 谢彬;陈上云;郭坚;刘薇;劳干诚;;监测真胰岛素观察胰岛素抵抗与胰岛素敏感性[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年

6 尹义辉;王经武;;消胰抗治疗胰岛素抵抗的临床研究[A];第七次全国中医糖尿病学术大会论文汇编[C];2003年

7 吕圭源;刘赛月;;中药抗胰岛素抵抗研究进展[A];浙江省2005年中药学术年会论文集[C];2005年

8 王晓静;刘正齐;;一种简便实用且较准确评估胰岛素抵抗的新方法[A];全国中西医结合内分泌代谢病学术会议论文汇编[C];2006年

9 白秀平;李宏亮;杨文英;肖建中;王冰;杜瑞琴;楼大钧;;脂肪分存顺序与肝脏及肌肉胰岛素抵抗的关系[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

10 孙勤;李伶;杨刚毅;欧阳凌云;陈渝;刘华;唐毅;Gunther Boden;;小鼠扩展胰岛素钳夹术的建立[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;[N];保健时报;2004年

2 ;[N];解放日报;2004年

3 中南大学湘雅二医院老年病科副教授 陈化;[N];健康报;2001年

4 张家庆 （教授）;[N];上海中医药报;2003年

5 本报记者 韩晓英;[N];中国中医药报;2002年

6 张怡梅 刘 斌;[N];中国中医药报;2003年

7 健康时报特约记者 陈锦屏;[N];健康时报;2007年

8 殳雪怡;[N];家庭医生报;2007年

9 刘文山;[N];家庭医生报;2007年

10 孟怀东;[N];中国医药报;2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 殷青青;胰岛素抵抗大鼠脑组织损伤机制以及番茄红素的保护作用研究[D];山东大学;2015年

2 施琳颖;二氢杨梅素通过诱导细胞自噬改善骨骼肌胰岛素抵抗的作用及其机制研究[D];第三军医大学;2015年

3 隆敏;下丘脑室旁核神经肽Y长期过表达诱导外周胰岛素抵抗作用机制研究[D];第三军医大学;2015年

4 张敏;胰岛素的聚乙二醇化和聚乙二醇化胰岛素降血糖作用的研究[D];复旦大学;2006年

5 崔兰;延边地区成人胰岛素抵抗与多代谢异常的相关性研究[D];延边大学;2008年

6 曹路;胰岛素抵抗血压升高机制的实验研究[D];天津医科大学;2005年

7 池泉;硝化对胰岛素结构、功能影响的研究[D];华中科技大学;2006年

8 王玉;埃他卡林对胰岛素抵抗的干预作用及其分子机制的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

9 李金梁;胰岛素抵抗与心血管病的临床和药理学研究[D];吉林大学;2012年

10 曹远奎;绝经后妇女性激素环境的改变与胰岛素抵抗[D];复旦大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李晨;辛伐他汀、胰岛素联合用药对糖尿病大鼠下颌骨骨折愈合的影响[D];河北联合大学;2014年

2 贾晓娇;血清Vaspin、痩素、脂联素在妊娠糖尿病患者中水平及与胰岛素抵抗的关系[D];河北医科大学;2015年

3 黄声;胰岛素抵抗与认知功能障碍的关系研究[D];福建医科大学;2015年

4 牛尚梅;骨骼肌PGC-1α在高脂导致的胰岛素抵抗中的作用机制[D];河北医科大学;2015年

5 安雨;血清视黄醇结合蛋白-4与2型糖尿病及肥胖的相关性研究[D];河北医科大学;2015年

6 陈旭;高胰岛素水平导致肥胖相关机制研究[D];郑州大学;2015年

7 刘晨曦;津力达改善棕榈酸诱导的肌细胞胰岛素抵抗的机制[D];河北医科大学;2015年

8 段力园;津力达颗粒对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究[D];河北医科大学;2015年

9 张东蛟;津力达对高脂诱导的胰岛素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪组织中脂代谢的影响[D];河北医科大学;2015年

10 李贵平;黄芪甲苷对高胰岛素诱导人肾小球系膜细胞损伤的保护作用及机制研究[D];安徽医科大学;2015年

  本文关键词：津力达颗粒对高脂诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：235618