糖尿病合并缺血再灌注损伤时胍丁胺对血脑屏障通透性的保护作用及机制的研究

发布时间：2019-09-07 07:34

【摘要】：引文缺血性脑梗死是中风死亡和残疾的主要原因,占世界中风的80%。糖尿病是缺血性脑梗死的重要危险因素。缺血再灌注损伤可以增加糖尿病炎症反应和氧化应激反应。AQP-4主要表达于大脑,并与脑缺血引起的脑水肿有密切关系。一些报道证实,在啮齿类动物大脑水肿时,缺血损伤后AQP-4和AQP-9的表达可明显增高。胍丁胺,是由L-精氨酸在哺乳动物组织中脱羧合成形成的。最近,胍丁胺一直被称为是对啮齿动物短暂性局灶性脑缺血的神经保护制剂。目的在这项研究中,我们利用糖尿病大鼠模型合并大脑中动脉闭塞,(MCAO)和胰岛素抵抗星形胶质细胞氧剥夺模型,研究胍丁胺对糖尿病大鼠血脑屏障(BBB)的保护作用和机制。方法糖尿病大鼠,采用高脂高糖饮食后链佐菌素注射造模,进行缺血再灌注损伤。用干湿重比检验脑水含量,用伊文思蓝染色检测血脑屏障通透性,用罗氏血糖仪检测血液中血糖的含量,用TTC染色检测脑梗死大小,对大脑中AQP-4/AQP-9的表达进行Western-blotting分析研究,用电子显微镜观察梗死组织超微结构。培养原代星形胶质细胞,制备胰岛素抵抗和氧剥夺体外模型。通过MTT检测细胞存活率,免疫荧光双染观察AQP-4/AQP-9表达的位置,Western-blotting检测抑制PKA/PKC后AQP-4/AQP-9的表达变化。结果胍丁胺治疗的糖尿病合并脑缺血大鼠脑组织梗死大小和水肿减轻。电镜下的糖尿病合并脑缺血大鼠脑组织超微结构破坏严重,而胍丁胺治疗后得到改善。糖尿病大鼠脑缺血损伤的脑组织中AQP-4/AQP-9表达在胍丁胺治疗组明显降低。胍丁胺治疗后的胰岛素抵抗合并氧剥夺组细胞存活率较胰岛素抵抗合并氧剥夺组有所改善。AQP-4/AQP-9表达位置与星形胶质细胞重合。抑制PKA/PKC后星形胶质细胞中AQP-4/AQP-9的表达大量减少。结论在脑缺血再灌注损伤中胍丁胺能通过PKA/PKC来调节AQP4/AQP9的表达,从而减轻缺血再灌注损伤引起的BBB通透性增加,并减轻脑水肿,减少脑缺血继发脑水肿引起的脑组织损伤,对脑组织起到保护作用。
【图文】：

图２邋ＴＴＣ染色逡逑

１．４脑组织超微结构逡逑图４所示，投射电子显微镜的图像结果表明，ＮＣ组毛细血管管腔光滑，逡逑基底膜完整，血管内皮细胞和血管周围细胞结构完整、排列规则。在化组中，逡逑我们可Ｗ看到，毛细血管管腔变窄、变形，，血管壁增厚，基底膜破坏，血管逡逑内皮细胞和血管周围细胞水肿，它们的结构变得混乱，表现为线粒体肿胀，逡逑崎消失。Ａ－ＩＲ组较ＩＲ组相比较毛细管管腔内有所改善，血管内皮细胞和血逡逑管周围细胞水肿略有减少，线粒体肿胀减轻、峭减少。在ＤＭ－ＩＲ组，毛细管逡逑管腔狭窄、变形严重，管腔内有附壁血栓，毛细管管壁显著增厚，毛细管基逡逑底膜增厚、破裂，血管内皮细胞和血管周围细胞高度水肿，其结构奈乱，线逡逑粒体肿胀显著
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2;R743.3

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 谢家玲,李蓉,江东;糖尿病患者心理状况分析[J];中国民康医学;2005年01期

2 陈淑敏;糖尿病证治探讨[J];临床荟萃;1994年17期

本文编号：2532876