葡萄球菌核酸酶的制备及性质研究

发布时间：2019-09-27 03:30

【摘要】：为获得纯度较高的葡萄球菌核酸酶(SNase)以研究其与糖尿病的关系,构建基因工程表达菌E.coli BL21/p ET28aHis-SNase,诱导其表达可溶性胞外蛋白,并对纯化的SNase进行初步性质研究。采用分子生物学方法设计和构建含有SNase基因的表达载体pET28a-His-SNase,再转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞。经过乳糖诱导表达、超声破碎及镍柱亲和色谱等纯化步骤后,以SDS-PAGE和Western blot鉴定His-SNase,并对其性质进行了初步研究。结果表明,乳糖诱导后HisSNase能高效表达,亲和色谱后纯度高达85%以上,且其具备较高的核酸酶活性,作用pH范围较广,有很好的耐热性。本研究为进一步探究葡萄球菌核酸酶与糖尿病的关系奠定了基础。
【作者单位】： 中国药科大学微基因药学实验室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81673340,No.31270985) 江苏省基础研究计划资助项目(No.BK20161462)~~
【分类号】：R587.1
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本文编号：2542477