Plin2对骨骼肌脂代谢的功能研究

发布时间：2020-02-24 10:23

【摘要】：骨骼肌是机体利用脂质一个非常重要的组织。越来越多的研究表明肌细胞内甘油三酯的升高与胰岛素抵抗及2型糖尿病的发生发展密切相关。脂滴表面蛋白可调控肌细胞内脂质的储存。Plin2是骨骼肌中表达量最主要的脂滴蛋白之因此研究Plin2是如何调控骨骼肌中脂质的合成和代谢,避免脂质积累过多引起的脂毒性和胰岛素抵抗是及其重要的。本文主要以小鼠成骨骼肌细胞C2C12细胞为模型来研究脂代谢的动态变化以及敲除Plin2时细胞内脂质代谢变化和脂滴表面蛋白的动态变化。在外源脂肪酸油酸刺激下,Plin2的表达量可随着时间点和浓度梯度逐渐升高。蛋白质质谱分析表明Plin2是C2C12细胞脂滴蛋白的主要蛋白,银染和免疫印迹进一步证实了Plin2是主要蛋白条带。紧接着,我们在C2C12细胞中敲除Plin2,发现敲除Plin2后,C2C12细胞合成以及水解TAG的能力均减弱,进一步研究发现细胞内的脂滴数目减少同时脂滴变的更大。我们再次纯化野生型和Plin2敲除株细胞脂滴,并进行了形态学观察和蛋白质组学分析。粒度仪检测结果显示敲除珠细胞的脂滴平均直径为843.3纳米,而野生型细胞的脂滴平均直径仅为377.1纳米。此外脂滴表面蛋白亦发生了不同程度的改变：Plin3成为脂滴蛋白的主要条带；ACSL1在脂滴上明显增多,而ATGL、DGAT1、DGAT2、Rab18和ACSL3均减少。另外脂滴体外实验表明,Plin2敲除珠细胞合成PC和TAG能力显著增强。综上所述,小鼠成肌细胞C2C12的脂滴主要表面蛋白Plin2通过增加脂滴数目、减小脂滴直径以减少脂滴体表比来加速细胞整体的r},性脂的合成速率和水解速率以维持止常的脂质代谢动态平衡。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R589

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本文编号：2582405