水飞蓟素改善棕榈酸引起的胰岛素抵抗及机制初步探讨

发布时间：2020-02-25 00:12

【摘要】：目的评价水飞蓟素(Sil)对棕榈酸(PA)诱导HepG2细胞IR的作用并进一步揭示其机制。方法实验分为正常对照(NC)组,棕榈酸(PA)组,Sil干预低剂量(12.5μmol/L,L-Sil)组、中剂量(25μmol/L,M-Sil)组和高剂量(50μmol/L,H-Sil)组。PA诱导HepG2细胞IR,分别给予12.5,25,50μmol/L Sil作用6 h,测定葡萄糖消耗量,使用活性氧簇(ROS)试剂盒测定ROS活性水平。采用Western blot方法检测AKT以及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的NOX2、p67phox、p47phox蛋白表达水平。结果PA组与NC组比较,葡萄糖耗氧量降低[(41.2±6.1)%vs(100±12)%,P=0.0087],磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达量降低[(0.458±0.185)vs(1.00±0.13),P=0.0184],同时PA组ROS水平[(1567±189 vs(14±34)U/ml,P=0.0094]以及NAPDH氧化酶NOX2、p67、p47亚基的表达水平升高(P0.05)。Sil各组与PA组比较可增加葡萄糖消耗量[(52.8±8.4)%vs(62.2±6.5)%vs(82.3±9.8)%],差异有统计学意义(P=0.041、0.039、0.0076);H-Sil组磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达量提高(0.793±0.249),与PA组比较,差异有统计学意义(P=0.0395);Sil可降低ROS水平[(1085±252)vs(851±184)vvs(405±35)],与PA组比较,差异有统计学意义(P=0.047、0.023、0.0015),以及降低NAPDH氧化酶NOX2、p67、p47亚基的表达水平(P0.05),且作用强度随Sil剂量的增加而增强。结论Sil可能通过降低NADPH氧化酶活性降低氧化应激,从而改善HepG2细胞的IR。
【图文】：

并逦ＮＣ逦ＰＡ逦Ｈ邋Ｓｌ１逡逑定量比较。逦ｈ５ｌ逡逑三、统计学方法逦Ｈ逦了逡逑采用ＳＰＳＳ邋１６．０软件进行统计学分析。正态逦＿１（）逦，邋ｗ＾ｍ逡逑分布的计量资料以表示，两组间比较采用逦｜0．５，逡逑分析，多组间比较采用单因素方差逦ｆｌＢ逡逑００邋￣＇＂＂￣￣逡逑分析。逦ＮＣ逦ＰＡ逦Ｈ－Ｓｉｌ逡逑结果逦与ＮＣ组比较ｗ邋ＮＣ邋ｇｒｏｕｐ，？邋Ｐ＜０．邋０１；与ＰＡ组比较ｗ邋ＰＡ逡逑ｇｒｏｕｐ，邋９邋Ｐ＜Ｃ．０．邋０５逡逑 、Ｓｉｌ增加葡萄糖消耗逦图２邋Ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ检测各组ＨｅｐＧ２细胞中Ａｋｔ通路相关蛋白表达逡逑Ｆｉｇ邋２邋Ａｋｔ邋ｐａｔｈｗａｙ－ｒｅｌａｔｅｄ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｉｎ邋ｅａｃｈ邋ｇｒｏｕｐ逡逑ＰＡ组ＨｅｐＧ２细胞葡萄糖消耗量（４１．２士逡逑６．邋１）％邋较邋ＮＣ邋组（１００±１２）％邋减少（Ｐ邋＝邋０．邋００８７），Ｓｉｌ逦三、Ｓｉｌ邋降低邋ＲＯＳ邋含量逡逑各组增加葡萄糖的消耗并随浓度增加葡萄糖消耗量逦＾邋ＮＣａｔｂ＾，ＰＡ｜Ｂ邋ＨｅｐＧ２逦ＲＯＳ邋？逡逑增加，葡萄糖消耗量分别为说８士８．邋４）％，（６２．邋２±较ＮＣ组＝［（人１５＝＝）逡逑６．５）人（８２．３＿９．８）／＾，与ＰＡ—且比较，差异有统ｉ＋随Ｓｉｌ浓度增加而下降，，Ｓｉｌ各组ＲＯＳ水平分别为逡逑学意义（Ｐ＝0．邋０４１、０．邋０３９、０．邋００７６）。（图邋１）逦（１０８５±２５２），（８５１±１８４），（４０５±３５）Ｕ／ｍｌ，与邋ＰＡ逡逑

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