Tomatidine通过调控破骨细胞分化减少雌激素缺乏导致的骨量丢失的实验研究

发布时间：2020-04-10 09:18

【摘要】：随着社会老龄化程度加重,骨质疏松症发病率不断上升,已成为严重影响老年人群健康的慢性疾病之一。骨量丢失及骨骼微结构破坏导致的相关疼痛、身体畸形、及脆性骨折等并发症造成了巨大的社会、经济负担,是亟待解决的问题。以往研究的证据表明骨的代谢是一个动态平衡的过程,成骨及破骨细胞在该过程中发挥了重要作用。女性围绝经期和绝经后10年内,骨代谢处于高转换状态,进入老年期,成骨细胞与破骨细胞活力都降低,骨代谢以低转换型为主。而破骨细胞作为体内唯一具有骨吸收功能的细胞,雌激素撤退后其活性相对升高,与骨质疏松症的发生关系密切,因此目前抗骨吸收药物为治疗骨质疏松症的一线方案。围绝经期和绝经后骨质疏松症的特征是雌激素水平降低,雌激素缺乏导致一系列促炎因子如白细胞介素2(interleukin2,IL-2)、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、及前列腺素E2(PGE2)等生成增加。促炎因子能够促进破骨细胞的分化,从而使骨代谢失衡,骨量丢失加快。Tomatidine为一种源自茄科的甾体生物碱,具有一定抗炎作用,但其在破骨细胞分化及雌激素缺乏导致的骨质疏松中的作用及机制尚不明确。因此,本研究旨在探索tomatidine对破骨细胞分化的影响,为围绝经期及绝经后骨质疏松的预防及治疗提供潜在的新方案。在本研究中,通过体外研究来评价tomatidine的抗炎活性、明确其在破骨细胞分化中的作用,并探索具体的信号通路调节机制。体内实验,通过建立小鼠卵巢切除模型,来验证其对雌激素缺乏所致骨质疏松的治疗效果。本研究分为以下三个部分:(1)Tomatidine对体外IL-1β及脂多糖(LPS)诱导的炎症反应的作用;(2)Tomatidine对破骨细胞分化的影响及对其信号通路的调控机制;(3)Tomatidine对切除卵巢后的C57BL/6小鼠的松质骨量的生理作用。
【图文】：

形态图,巨噬细胞,光学显微镜,形态

２．４实验结果逡逑２．４．１邋Ｔｏｍａｔｉｄｉｎｅ对小鼠ＲＡＷ２６４．７巨噬细胞的细胞毒性分析逡逑为了解ｔｏｍａｔｉｄｉｎｅ邋（图２．１）对ＲＡＷ２６４．７巨噬细胞（图２．２）的毒性，我们采逡逑用邋ＣＣＫ－８邋试验检测不同浓度（０、５、１０、２０、４０、６０、８０邋和邋ｌＯＯｐＭ）的邋ｔｏｍａｔｉｄｉｎｅ逡逑对巨噬细胞增殖能力的影响。经过７２小时的培养，我们发现４（ＨｉＭ以下浓度的逡逑ｔｏｍａｔｉｄｉｎｅ对巨噬细胞没有表现出明显细胞毒性作用，，同时其对巨噬细胞也没有显逡逑示出明显的抑制或者促进增殖的作用（图２．３）。逡逑ＨＯ邋八－＾逡逑Ｈ逡逑图２．１邋Ｔｏｍａｔｉｄｉｎｅ化学结构式。逡逑＿邋：藤＿：媝栥逡逑图２．２光学显微镜下ＲＡＷ２６４．７巨噬细胞形态（２0ｘ）。逡逑２３逡逑

化学结构式,巨噬细胞

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【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R580

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