芍药苷在晚期糖基化终产物诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨

发布时间：2020-06-24 11:30

【摘要】：目的:我们的实验研究证明,芍药苷(PF)在晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤中有保护作用,并进一步探讨其潜在的作用机制。方法:1.以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,通过晚期糖基化终产物(AGE-BSA)作用建立细胞损伤模型。采用MTT法检测晚期糖基化终产物作用6 h后细胞活力的改变,及用25μM芍药苷预处理0.5 h后对细胞活力的影响;用蛋白印迹(Western blot)法测定LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白的表达水平的变化。2.利用si RNA进行对Atg5基因及RAGE基因行基因沉默或基因敲减,观察基因敲减后细胞活力及LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白表达水平的改变。结果:1.MTT法检测结果显示,与对照组相比,AGE-BSA作用于HUVECs6h后细胞活力明显下降(P0.001),芍药苷预处理组细胞活力的改变与芍药苷浓度呈剂量依赖关系。同样,western blot结果显示,与对照组相比,AGE-BSA组LC3-II及RAGE蛋白表达显著增加;P62蛋白稍有表达增加,但无明显统计学意义;与AGE-BSA组相比,25μM PF预处理组LC3-II、RAGE进一步升高(P0.05),P62表达降低(P0.05)。2.利用si RNA对Atg5基因及RAGE基因进行基因沉默或敲减后,结果显示,与AGE-BSA和PF+AGE-BSA组相比,si RNA敲减后细胞活力明显下降,LC3-II的表达较前明显减少。结论:芍药苷(PF)通过上调自噬作用,保护晚期糖基化终产物对脐静脉内皮细胞的损伤,并且其能够促进自噬流的完成。晚期糖基化终产物受体(RAGE)在这一自噬保护作用中发挥了重要作用。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2
【图文】：

药苷对晚期糖基化终产物引起的内皮细胞损伤有一定的保μM 及 100μM 预处理组细胞生存率无明显差别，因此本实验选AGE-BSA 诱导内皮细胞损伤起保护作用的浓度。（图 1）

P62 蛋白明显下降。从以上结果表明，100 μg/mL AGE-活，但自噬流没有完成，25μM PF 预处理组进一步上调，对细胞有一定的保护作用。（图 2）；

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1 陈玉防;芍药苷在晚期糖基化终产物诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨[D];苏州大学;2015年

本文编号：2727809